潰瘍性結腸炎患者血清脂聯素水平變化及意義

何顯　王真　蘇心愛　張清泉　王麗華

潰瘍性結腸炎患者血清脂聯素水平變化及意義

何顯王真蘇心愛張清泉王麗華

【摘要】目的檢測潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)患者血清脂聯素水平，探討其臨床意義。方法用酶聯免疫吸附試驗檢測68例UC患者［根據嚴重程度分為輕度(n=23)、中度(n=24)和重度(n=19) ;根據病變范圍分為乙狀結腸型(n=18)、左半結腸型(n=25)和全結腸型(n=25)］和20例健康體檢者(對照組)血清脂聯素水平，并分析其與UC臨床特征的相關性。結果活動期UC患者血清脂聯素水平顯著高于緩解期UC患者和正常對照組(P＜0.05) ;重度UC患者脂聯素水平與輕、中度比較，差異有統計學意義(P＜0.05) ;直乙結腸、左半結腸及全結腸UC患者血清脂聯素水平與正常對照組比較，差異有統計學意義(P＜0.05)?；顒悠赨C患者血清脂聯素水平與其疾病活動指數正相關(P＜0.05)。結論脂聯素可能參與UC疾病的發生發展。

【關鍵詞】潰瘍性結腸炎;脂聯素;白細胞介素

項目來源:衡水市科學技術研究與發展指導計劃(編號: 11039Z)

作者單位: 053000河北省衡水市，哈勵遜國際和平醫院消化科(何顯、蘇心愛、王麗華)，檢驗科(張清泉) ;河北省衡水市第三人民醫院檢驗科(王真)

潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種易復發的，主要累及結腸的慢性炎性疾病，其臨床表現為腹痛、腹瀉及黏液膿血便。UC發病率近年呈上升趨勢，但是UC的發病原因仍未完全闡明，研究認為UC的發病因素主要為宿主基因易感性、環境因素、感染及免疫因素等幾方面相互作用的結果。其中宿主免疫功能異常、促炎細胞因子和抗炎細胞因子失衡是UC發病的關鍵因素［1］。脂聯素是近年發現的具有抗炎作用的脂肪細胞因子，研究發現炎癥性腸病患者血清脂聯素升高，脂聯素對于炎癥性腸病患者腸黏膜慢性炎癥有調節作用［2］。本研究通過檢測UC患者血清脂聯素水平，進一步探討其在UC發病過程中的作用。

1　資料與方法

1.1一般資料收集哈勵遜國際和平醫院2011年7月至2012年12月UC患者68例，其中男32例，女36 例;年齡19～63歲，平均年齡(39±14)歲;平均體重指數(BMI) 22.8 kg/m2。全部病例均符合2012年炎癥性腸病診斷與治療的共識意見［3］。并根據該診斷標準將入組UC患者分為輕度(n=23)、中度(n=24)、重度(n=19) 3組。所有入組患者根據電子結腸鏡檢查，依據病變范圍將入組UC患者分為乙狀結腸型(n=18)、左半結腸型(n=25)、全結腸型(n=25)。所有入組病例均經過門診或者住院治療后達到病情緩解，并選擇隨訪資料完整28例UC患者作為緩解期對照組。正常對照組20例，均來自我院健康體檢者。排除標準: (1)不符合上述診斷標準與入組標準。(2)重度潰瘍性結腸炎患者，病理提示腸黏膜腸上皮化生或異型增生者;或者合并有消化道腫瘤病變患者。(3)合并有心腦血管、肝、腎和造血系統等原發性疾病患者。(4)妊娠期或哺乳期女性。(5)應用免疫抑制劑及研究中認為有任何不適宜入選的情況。

1.2試劑、儀器血清脂聯素應用雙抗夾心酶聯免疫吸附實驗檢測，試劑盒為武漢博士得公司提供。所有受試者均于清晨空腹采肘靜脈血5 ml，離心取血清，置－20℃冰箱保存待同時檢測。

1.3方法(1)試劑盒平衡至室溫(20～25℃)進行試驗; (2)取出所需酶標板，按照標準品的次序分別加入100 μl的標準品溶液于空白微孔中; (3)空白微孔中加入100 μl的樣品，空白對照加入100 μl的蒸餾水; (4)在各孔中加入50 μl的酶標記溶液; (不含空白對照) ; (5)將酶標板用封口膠密封后，在孵育箱中37℃孵育反應1 h; (6)充分清洗酶標板3～5次，濃縮洗滌液以1∶100的比例用蒸餾水稀釋; (7)酶標板洗滌后用吸水紙徹底拍干; (8)每孔加入顯色劑A、B液各50 μl，20～25℃下避光反應15 min; (9)每孔加入50 μl終止液，輕輕混勻30 s; 30 min內在450 nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。

1.4UC的疾病活動指數(disease activity index，DAI)評分DAI總分為腹瀉次數、便血情況、內鏡下黏膜表現、醫師病情評估分數之和。癥狀緩解＜2分;輕度活動3～5分，中度活動6～10分，重度活動11～12分。

1.5統計學分析應用SPSS 16.0統計軟件，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗，相關性分析采用Pearson相關分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1活動期UC患者與正常對照組血清脂聯素比較

活動期UC患者血清脂聯素水平為(12.8±4.4)μg/ml，與正常對照組(8.4±2.6)μg/ml比較，差異有統計學意義(t=9.925，P＜0.05)。緩解期UC患者血清脂聯素水平為(9.9±3.1)μg/ml，仍高于正常對照組血清脂聯素水平(8.4±2.6)μg/ml(t=4.785，P＜0.05)。

2.2不同程度UC患者血清脂聯水平變化正常對照組血清脂聯素水平為(8.4±2.6) pg/ml，輕度UC患者脂聯素水平為(8.9±3.0) pg/ml，中度UC患者脂聯素水平為(9.5±3.1) pg/ml，重度UC患者脂聯素水平為(14.1±3.8) pg/ml，重度UC患者脂聯素水平較輕度、中度UC患者UC患者脂聯素水平有明顯升高(t值分別為4.317、7.173和8.610，P＜0.05)。但輕度與正常對照組、中度與輕度比較，UC患者血清脂聯素水平比較，差異均無統計學意義(t=1.886，P＞0.05)。

2.3血清脂聯素與病變范圍關系直乙狀結腸、左半結腸及全結腸UC患者血清脂聯素水平分別為(9.9±3.1) pg/ml、(10.2±3.8) pg/ml和(13.9±4.1) pg/ml，與正常對照組血清脂聯素水平(8.4±2.6) pg/ml比較差異有統計學意義(t值分別為5.841、5.893和6.869，P＜0.05)，病變范圍越大，血清脂聯素的含量越高，但在直、乙狀結腸組與左半結腸組血清脂聯素水平之間差異無統計學意義(t=3.078，P＞0.05)。

2.4血清脂聯素水平與UC患者DAI評分關系活動期UC患者血清脂聯素水平與其DAI評分呈正相關(r=0.583，P＜0.05)。

3　討論

目前UC發病機制仍未完全闡明，免疫因素在其發病過程中的作用越來越受到重視。研究認為UC患者宿主免疫功能紊亂，促炎細胞因子和抗炎細胞因子失衡，輔助性T淋巴細胞及其細胞因子在UC發病過程中起重要作用［4］。

脂聯素是近年發現的具有抗炎作用的脂肪細胞因子，主要表達于脂肪細胞、骨骼肌細胞、心肌細胞及內皮細胞。脂聯素與胰島素抵抗呈負相關，在非酒精性脂肪肝、肥胖、2型糖尿病患者體內表達降低。脂聯素通過抑制腫瘤壞死因子的產生及其活性，抑制核因子的活化，并誘導單核細胞、巨噬細胞及樹突細胞產生IL-10等抗炎細胞因子，從而發揮其抗炎作用［5，6］。在對脂聯素基因敲除小鼠模型研究后發現，在相同誘導條件下，脂聯素基因敲除小鼠較野生小鼠進展致更為嚴重的結腸炎癥，提示脂聯素參與腸黏膜炎癥發生發展過程［7］。在對葡聚糖硫酸酯鈉誘導小鼠結腸炎模型中研究發現，脂聯素具有抑制腸上皮細胞趨化因子的產生，抑制巨噬細胞的吞噬作用及促炎細胞因子的釋放，證實脂聯素具有抑制腸黏膜炎癥發生發展的作用［8］。也有研究發現與健康對照組相比，UC患者血清脂聯素無明顯升高，研究認為脂聯素不參與UC發病過程［9］。但是多數研究認為脂聯素在UC發病過程中起到抑制腸黏膜炎癥作用。我們通過研究發現，UC患者血清脂聯素水平較正常對照組升高，隨著病情進展，病變范圍的增大，UC患者血清脂聯素水平升高越明顯。治療后血清脂聯素水平降低，但仍高于正常對照組。研究發現UC患者體內脂聯素表達升高，脂聯素通過調節IL-10高表達發揮其抗炎作用［10，11］。UC患者體內脂聯素水平升高，推測與UC患者免疫失衡，促炎細胞因子表達增強，抗炎細胞因子表達減弱，血清脂聯素被動性升高，上調抗炎細胞因子的表達，發揮其抗炎作用，以進一步恢復抗炎細胞因子與促炎細胞因子之間的平衡。通過對UC患者血清脂聯素水平與疾病活動指數研究發現:活動期UC患者血清脂聯素水平與疾病活動指數呈正相關，因此血清脂聯素水平可作為評測UC疾病狀態的一個參考指標。

當然，UC發病中涉及多種細胞因子，并且相互影響，血清脂聯素的變化只是為探討UC發病機制及尋找新的治療方法提供一個切入點。脂聯素在UC發病過程中的免疫作用仍需進一步、大樣本研究。

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(收稿日期:2014－11－12)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.10.032

【文章編號】1002－7386(2015) 10－1536－02

【文獻標識碼】A

【中圖分類號】R 574.621