藏雞與茶花雞雜交種蛋低氧孵化性能測定

茍文鈺，張雅文，張 倩，張 浩，吳常信

(中國農業大學動物科技學院 畜禽育種國家工程實驗室，北京 100193)

藏雞與茶花雞雜交種蛋低氧孵化性能測定

茍文鈺，張雅文，張 倩，張 浩*，吳常信

(中國農業大學動物科技學院 畜禽育種國家工程實驗室，北京 100193)

旨在研究藏雞作為父本和母本對雜交種蛋胚胎低氧發育的影響。在模擬常壓低氧的條件下對純種藏雞(TT)、純種茶花雞(CC)、藏雞♂×茶花雞♀(TC)、茶花雞♂×藏雞♀(CT)種蛋進行孵化。而后對種蛋的低氧孵化性能進行測定。結果顯示，在13%氧濃度(約海拔3 980 m)條件下，藏雞與茶花雞正反交種蛋孵化率(36.41%、39.57%)顯著高于茶花雞(16.97%)，藏雞作為母本的種蛋失水率顯著低于茶花雞為母本組，且蛋重較大。本研究說明了種蛋的蛋重、孵化期失水率主要由母本決定；茶花雞與藏雞的雜交種蛋低氧孵化率顯著提高，表現較強雜種優勢，但正反交組間種蛋低氧孵化率差異不顯著；藏雞作為母本的種蛋低氧孵化胚胎發育前期優于藏雞作為父本組，后期則藏雞作為父本的種蛋胚胎發育能力較好。

藏雞；低氧孵化；孵化率；失水率

青藏高原具有典型的高寒、低壓、低氧氣候特征，家禽品種十分單一，藏雞則是數量最多、分布最廣的高原地方雞種。以往的科研工作者也曾嘗試引進低地優良種雞，以豐富西藏地區家禽品種的多樣性，但發現低地雞種引種至高原時種蛋的孵化率極低，這給引種工作造成了極大的困難[1]。為了研究影響高海拔環境對種蛋孵化的因素，學者們做了大量的孵化試驗，結果表明，孵化濕度、O2分壓、CO2濃度均影響禽蛋的孵化效率，其中O2分壓是制約高海拔環境種蛋孵化率的關鍵[1-4]。雞胚對高海拔低氧環境的耐受性受遺傳因素控制，品種間存在差異[1，5]。

本研究選擇低氧適應性能極端差異的雞種藏雞和茶花雞，采用人工輸精進行正反交，收集種蛋進行低氧孵化，測定孵化過程中雞蛋失水率、胚胎生長和孵化率等指標，分析藏雞作為父本和母本對胚胎低氧發育的影響，為研究動物低氧適應性提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

采用人工授精技術，在中國農業大學實驗牧場內收集藏雞×藏雞(TT)、茶花雞×茶花雞(CC)、藏雞♂×茶花雞♀(TC)和茶花雞♂×藏雞♀(CT)組合的種蛋，每組200枚。所有種蛋貯存不超過7 d[6]。

1.2 試驗方法

所有種蛋熏蒸消毒，并稱重，采用本實驗室自行研制的全自動低氧模擬孵化機孵化[7]。孵化條件為溫度37.8 ℃、濕度60%、每2 h翻蛋1次，O2濃度(13±0.2)%(相當于海拔3 980 m)。孵化期22 d，每日定時觀察溫度、濕度、O2濃度。分別在第5、9、11、14、16、18、19 天照檢、稱重，同時在第11、16、18天和出雛期每組分別取12個活胚蛋，觀察胚胎發育情況并稱量胚胎重。解剖所有死胚種蛋，從胚胎大小、卵黃吸收程度、器官發育程度、是否內外啄等判斷胚胎死亡的時期。

1.3 數據分析

對種蛋受精率和孵化率進行卡方檢驗，比較各組間的差異。對種蛋蛋重、失水率、胚胎重/蛋重等數據進行單因素ANOVA方差分析，然后用bonferroni方法調整P值，對各組性狀均值進行多重比較。所有數據均采用SPSS 17.0軟件進行統計分析。

2 結 果

2.1 低氧孵化對種蛋蛋重和受精率的影響

各組種蛋的平均蛋重及受精率見表1。由表1可知，藏母雞組的受精率高于茶花母雞組，且CT組的受精率顯著高于其他組。4組的種蛋受精率均達到試驗要求，可以進行低氧孵化的后續數據分析。對于平均蛋重，藏雞母雞組高于茶花雞母雞組，純種藏雞種蛋重顯著大于其余試驗組。由此可見，平均種蛋重和受精率主要受到母本的影響。同時，在母雞品種相同的條件下，雜交組合的受精率都表現出一定的上升，可能具有雜交優勢，尤其是CT組。

表1 各組種蛋重及受精率

2.2 低氧孵化對胚胎死亡率和孵化率的影響

各組種蛋低氧(13% O2)孵化胚胎階段死亡率和孵化率見表2。在整個低氧孵化期，胚胎死亡率呈現出兩個死亡高峰期：0～5 和19～22 d。在第1個死亡高峰期0～5 d中，以藏雞為父本組(TC)胚胎死亡率明顯高于以藏雞為母本組(CT)，但胚胎發育后期的死亡率差別不顯著。統計分析顯示，純種藏雞種蛋的孵化率達到50.04%，顯著高于其他組(P<0.05)；純種茶花雞孵化率最低，僅16.97%，顯著低于其他組(P<0.05)。結果說明，藏雞胚胎對低氧環境的適應性高于茶花雞。藏雞和茶花雞雜交種蛋的低氧孵化性能比茶花雞有顯著提高(P<0.05)，但正反雜交組間孵化率差異不顯著(P>0.05)。TC組表現雜種優勢率為8.67%，CT組為18.10%，藏雞作為母本的組合高于藏雞作為父本的組合9.43個百分點。

表2 各組低氧孵化胚胎階段死亡率及孵化率

2.3 低氧孵化對種蛋失水率的影響

種蛋低氧孵化時，各時期累計失水率見表3。孵化期種蛋的失水率反映蛋殼通透性，由母雞的遺傳和飼養環境決定，對孵化率有直接影響。統計分析發現，CC和TC組的種蛋失水率在每個時期均分別高于TT和CT組(P<0.05)，說明茶花雞母雞所產的種蛋蛋殼通透性高于藏雞母雞所產種蛋。

表3 種蛋低氧孵化時各階段累計失水率

2.4 胚胎發育情況

胚胎重/蛋重比值可以反映孵化期胚胎個體的發育能力及對蛋內營養的利用情況。由表4可見，藏雞低氧孵化胚胎早期雖然死亡率低，但發育程度并沒有顯著優于雜交種蛋，直到第2個死亡高峰期即孵化第18天才表現出較強的生長優勢。茶花雞在低氧環境孵化時胚胎重/蛋重比率均顯著低于其他組(P<0.05)，說明其胚胎的生長發育受低氧抑制較大。TC與CT正反交組中，母本為藏雞組的胚胎11和16 d發育較好，胚胎重/蛋重比率顯著高于父本為藏雞組，而父本為藏雞組胚胎18 d和出雛期發育超過了母本為藏雞組，差異達顯著水平(P<0.05)。

3 討 論

表4 各組種蛋低氧孵化胚胎重/蛋重比率

藏雞與茶花雞都是我國特有的地方雞種，都具有體型小、生長緩慢、耐粗飼、抗病力強等特征，并且兩個品種的種蛋大小、蛋形指數、蛋殼厚度、表面覆蓋角質層等均相似，但兩者的低氧適應性差別十分顯著[8]。選擇茶花雞和藏雞及其雜交種蛋進行低氧試驗，可避免由于種蛋重、蛋形指數等因素對低氧孵化率的影響[9]。高海拔地區氣候條件十分特殊，其低氧環境對雞胚的孵化過程有直接的危害，導致種蛋孵化率低、胚胎發育緩慢、畸形率增加等。藏雞低氧的耐受性是長期適應性進化的結果。本試驗結果可以看出藏雞種蛋在低氧條件下孵化率顯著高于茶花雞及雜交種蛋，與前人研究結果一致[10]。本試驗所選用的藏雞為2003年引種至北京飼養、純繁群體，已很好的適應人工授精的輸精方式，相比較于高原生長的藏雞，種蛋的受精率已經達到試驗要求[11]。TT和CT組種蛋均為藏母雞所產，相對于茶花雞所產種蛋(CC和TC組)，蛋重較高，孵化期失水率較低，第1個死亡高峰期(0～5 d)胚胎死亡率較低；這說明藏雞作為母本對受精蛋早期胚胎發育的物質儲備有影響[12]。然而，低氧孵化至第18天，即第2個死亡高峰期開始時，以藏雞為父本的TT和TC組種蛋顯現出低氧下良好的生長發育，死亡率低于茶花雞為父本的CC和CT組。雞蛋孵化的第18天后是胚胎從尿囊絨毛膜呼吸到肺呼吸轉換，以及為啄殼出雛儲備能量的時期，本研究結果說明，父本對胚胎的后期發育和生活力有重要影響。從胚胎重/蛋重比也可以反映出這一規律，TT和CT組胚胎孵化到第16天的該比值仍高于CC和TC組，直至第18天，TT和TC組超過了CC和CT組。孵化率作為衡量胚胎低氧適應性的最主要指標，本試驗中，雜交組合TC與CT組種蛋低氧孵化死亡率比茶花雞顯著下降，但正反交組間沒有顯著差異，說明藏雞無論作為父本還是母本對種蛋低氧孵化性能都有改善作用，這可能是因為低氧適應性屬于常染色體遺傳，且受多種因素協同作用[13]，但本結果與莫德林等的試驗結果并不一致[11]。眾多學者認為，藏雞種蛋失水率較低也是其低氧適應性的表現之一，認為藏雞在長期進化過程中降低了蛋殼的傳導力，從而減少高海拔低壓環境孵化時水分的散失。但本研究中，CT組種蛋失水率低于TC組，CT組孵化率比TC組高，但差異未達顯著水平。鳥類不同物種或品種對高海拔適應反應在蛋殼通透性上的改變，隨低氧程度不同而存在差異。在13%低氧條件下，蛋殼通透性降低是否對胚胎適應性提高起作用，仍需進一步研究[14-16]。胚胎低氧適應性由多種遺傳因素控制，而父本和母本對該性狀差別影響的作用機制，仍需進一步探索研究。

4 結 論

本試驗通過分析藏雞、茶花雞以及其正反交種蛋低氧胚胎適應性，發現種蛋的蛋重、受精率主要由母本決定；低地雞與藏雞的雜交種蛋低氧孵化率顯著提高，表現較強雜種優勢，但正反交組間種蛋低氧孵化率差異不顯著；藏雞作為母本的種蛋低氧孵化胚胎發育早期優于茶花雞為母本組，后期則藏雞作為父本的種蛋胚胎發育能力較好。

[1] 吳常信，李 寧.藏雞高原低氧適應生理與遺傳基礎[M].北京：中國農業大學出版社，2012. WU C X，LI N.Physiology and genetics of adaptability to highland hypoxia in Tibetan chicken[J].Beijing：China Agricultural University Press，2012.(in Chinese)

[2] 強巴央宗.西藏藏雞種質資源特性研究[D].南京：南京農業大學，2008. CHAMBA Y Z.Breed characters of Tibetan chicken[D].Nanjing：Nanjing Agricultural University，2008.(in Chinese)

[3] 張 浩.藏雞高原低氧適應生理機制及其雜交利用研究[D].北京：中國農業大學，2005. ZHANG H.Physiological mechanism of adaptability to highland hypoxia and utilizing by crossing in Tibetan chicken[D].Beijing：China Agricultural University，2005.(in Chinese)

[4] 張 浩，吳常信，強巴央宗，等.氧氣對低地雞蛋胚胎死亡和孵化率的影響[J].畜牧獸醫學報，2006，37(2)：112-116. ZHANG H，WU C X，CHAMBA Y Z，et al.Influences of oxygen on embryonic mortality and hatchability of chicken eggs[J].ActaVeterinariaetZootechnicaSinica，2006，37(2)：112-116.(in Chinese)

[5] ZHANG H，BURGGREN W W.Hypoxic level and duration differentially affect embryonic organ system development of the chicken (Gallusgallus)[J].PoultSci，2012，91(12)：3191-3201.

[6] 康貽林，濮存全.如何提供理想的種蛋貯存條件[J].中國家禽，2010，32(12)：52-53. KANG Y L，PU C Q.How to provide the ideal conditions for eggs[J].ChinaPoultry，2010，32(12)：52-53.(in Chinese)

[7] 張 浩，茍 瀟，魏澤輝，等.自動化低氧模擬孵化機的研制與測試[J].中國家禽，2005，27(17)：31-33. ZHANG H，GOU X，WEI Z H，et al.Development and test of the automation simulation low oxygen hatch machine[J].ChinaPoultry，2005，27(17)：31-33.(in Chinese)

[8] 孫 祥，郭成欲.云南茶花雞的種質特性[J].當代畜牧，2009，11：34-35. SUN X，GUO C Y.Breed characters of Chahua chicken[J].ContemporaryAnimalHusbandry，2009，11：34-35.(in Chinese)

[9] 陳增軍.種蛋大小對孵化率及健弱雛率影響的試驗報告[J].中國畜牧獸醫，2008，35(4)：146-147. CHEN Z J.The test report of egg size effect on hatching rate and weak health chicken rate[J].ChinaAnimalHusbandry&VeterinaryMedicine，2008，35(4)：146-147.(in Chinese)

[10] 張 浩，吳常信，強巴央宗，等.小型蛋雞及其雜交種蛋高海拔孵化性能研究[J].中國農業科學，2006，39(7)：1507-1510. ZHANG H，WU C X，CHAMBA Y Z，et al.Hatchability of miniature laying chicken and its hybrids at high altitude[J].ScientiaAgriculturaSinica，2006，39(7)：1507-1510.(in Chinese)

[11] 莫德林，李 奎，強巴央宗，等.交配組合和環境溫度對西藏地區雞蛋孵化效果的影響分析[J].畜牧獸醫學報，2006，37(1)：28-33. MO D L，LI K，CHAMBA Y Z，et al.Analysis of the effect of mating system and environment factors on egg hatchability at Tibet altitude[J].ActaVeterinariaetZootechnicaSinica，2006，37(1)：28-33.(in Chinese)

[12] CHRISTENSEN V L，DAVIS G S.Maternal dietary iodide influences turkey embryonic thyroid function[J].PoultSci，2001，80(9)：1286-1292.

[13] 路 毅.正反交結果相同就一定是常染色體遺傳嗎[J].中學生物學，2012，28(13)：44-45. LU Y.Is the have a same result of intercrossing that must be euchromosome genetic[J].MiddleSchoolBiology，2012，28(13)：44-45.(in Chinese)

[14] 耿照玉，王秀玲.種蛋孵化期失水率及蛋殼氣孔密度與孵化率的關系[J].中國畜牧雜志，1990，26(5)：12-14. GENG Z Y，WANG X L.the relationship between hatchability and eggshell stoma density，water loss rate in egg incubation[J].ChineseJournalofAnimalScience，1990，26(5)：12-14.(in Chinese)

[15] HEMPLEMAN S C，ADAMSON T P，BEBOUT D E.Oxygen and avian eggshell formation at high altitude[J].RespirPhysiol，1993，92(1)：1-12.

[16] LEON-VELARDE F，WITTEMBURY J，CAREY C，et al.Shell characteristics of eggs laid at 2800 m by hens transported from sea level 24 hours after hatching[J].JExplZool，1984，230(1)：137-139.

(編輯 郭云雁)

The Measurement of Hatchability of Eggs from Intercrossing of Tibet and Chahua Chickens under Hypoxic Incubation

GOU Wen-yu，ZHANG Ya-wen，ZHANG Qian，ZHANG Hao*，WU Chang-xin

(NationalEngineeringLaboratoryforAnimalBreeding，CollegeofAnimalScienceandTechnology，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100193，China)

The aim of this study was to investigate the effect of Tibet chicken as male and female parents on hypoxia development of hybrid eggs.Eggs from Tibet × Tibet (TT)，Chahua × Chahua (CC)，Tibet × Chahua (TC) and Chahua × Tibet (CT) chickens were incubated under hypoxic condition.Then the hatchability of eggs were examined.The results showed that the hatchability of TC (36.41%) and CT (39.57%) groups were significantly higher than that of CC group (16.97%) under 13% oxygen concentration (equivalently 3 980 m altitude).Eggs from Tibet hens (including TT and CT groups) had a higher egg weight and a lower water loss during incubation than eggs from Chahua hens (including CC and TC groups).The results indicated that the egg weight and the water loss during incubation were mainly determined by female parent.The intercrossing eggs between Tibet chicken and Chahua chicken had higher hatchability and had stronger heterosis in traits of hypoxic hatchability.There was no significant difference in hypoxic hatchability of eggs between TC and CT groups.The embryo development of eggs from Tibet chicken as female parent was better at early stage and embryo development of eggs from Tibet chicken as male parent was better at last stage under hypoxic incubation.

Tibet chicken；hypoxic incubation；hatchability；water loss

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.07.004

2014-09-28

國家自然科學基金項目(31272401；91331118)

茍文鈺(1988-)，女，甘肅甘谷人，博士生，主要從事藏雞低氧適應性機制的研究，Tel：010-62734852，E-mail：gouwy520@126.com

*通信作者：張 浩，副研究員，博士生導師，主要從事高原動物低氧適應分子遺傳機制的研究，Tel：010-62734852，E-mail: zhanghao827@163.com

S831.3

A

0366-6964(2015)07-1102-05