飛天蜈蚣七透皮貼劑的藥效學研究

楊秦雁 李 博

陜西省中醫醫院(西安 710003)

飛天蜈蚣七透皮貼劑的藥效學研究

楊秦雁 李 博

陜西省中醫醫院(西安 710003)

目的：研究飛天蜈蚣七透皮貼劑的藥效作用。方法：通過熱板法和扭體法考察飛天蜈蚣七透皮貼劑的鎮痛作用；通過醋酸致小鼠腹腔毛細血管通透性試驗、二甲苯所致小鼠耳廓腫脹抑制試驗和大鼠棉球肉芽腫試驗考察飛天蜈蚣七透皮貼劑的抗炎作用。結果：飛天蜈蚣七透皮貼劑可以明顯降低熱板和醋酸所致的小鼠疼痛感，改善醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性，顯著抑制小鼠耳腫脹和大鼠棉球肉芽腫。結論：本研究所使用的飛天蜈蚣七透皮貼劑具有良好的抗炎鎮痛作用。

飛天蜈蚣七(Aralia Chinensis L.)，著名的“太白七藥”之一，是五加科楤木屬(Aralia)植物太白楤木的根皮。資源主要分布在秦嶺、巴山各縣山區，因其小枝密布黃棕色的針刺，形象蜈蚣飛天而得名[1-2]，具有祛風除濕、利尿消腫、活血止痛、疏肝解郁、溫中和胃的功效，主要用于治療風濕，跌打損傷，肝炎，癰，民間還可治療兒童、咳嗽等[3-5]。本研究使用飛天蜈蚣七正丁醇極性部位提取物，采用現代制劑技術研發獲得可用于鎮痛抗炎的新型透皮給藥制劑—飛天蜈蚣七透皮貼劑。透皮給藥系統(Transdermal drug delivery system, TDDS)是一種經皮給藥方式，將含藥貼劑敷貼于皮膚之上，藥物以一定的速度滲透入皮膚，然后經由毛細血管吸收從而進入體循環發揮全身或局部的治療作用[6]。TDDS可以控制藥物作用時間和作用強度，減少給藥頻率，保證最佳血藥濃度，并且可以避免口服給藥造成的藥效降低和不良反應，比如肝臟的“首過效應”和胃腸道的破壞[7]。同時，透皮給藥還可以提高患者的依從性。在前期研究中，本課題組已經對飛天蜈蚣七提取物的活性進行了考察，發現其正丁醇提取物有明顯的抗炎鎮痛作用。本實驗旨在制備飛天蜈蚣七透皮貼劑，并對其鎮痛、抗炎等藥理作用進行了研究，以期為飛天蜈蚣七藥材的開發利用提供依據。

1 儀器與試藥 1.1 飛天蜈蚣七透皮貼劑 取聚丙烯酸酯作為骨架材料及膠粘劑，用70%甲醇溶解，加入處方量的粘膠增塑劑葵二酸二丁酯、交聯劑丁二酸、增粘劑聚乙二醇400，促透劑氮酮，混合均勻，60℃水浴振蕩2h，加入飛天蜈蚣七提取物，水浴振蕩至混勻，趁熱將含藥壓敏膠涂布于防粘層，置于60℃烘箱中，揮去有機溶劑，覆蓋上背襯層，切割成合適的大小，密閉，封裝即得。阿司匹林腸溶片(批號:130209)；二甲苯(99% )；乙酸(99.5%)；伊文思藍(99% )；HH-4數顯恒溫熱板水浴鍋(國華電器有限公司)；AUY200電子天平(日本島津株式會社)；722型分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)；8mm打孔器。

1.2 實驗動物 Wistar種大鼠，雌雄兼用，280±20g；昆明種小鼠，雌雄兼用，20±2g，均購于第四軍醫大學實驗動物中心；動物合格證號：陜動準字第01號。

2 方 法 2.1 小鼠熱板致痛試驗[8]選取昆明種小鼠，體重為20±2g，雌性，將小鼠提前3d放置在實驗環境中。對雌性昆明種小鼠進行篩選，將小鼠放入55±0.5℃)水浴熱板上，小鼠痛閾值需處于5～30s之間的范圍，否則即舍棄。篩選后可供實驗用小鼠60只。將小鼠隨機分為6組，即空白對照組、空白基質組、陽性藥對照組(阿司匹林0.2g/kg)、飛天蜈蚣七透皮貼劑高、中、低劑量組(分別為10、5、2.5 g/kg)。給藥前1d，小鼠腹部褪毛，將藥物貼于小鼠腹部褪毛處，以不致敏膠布固定，每天給藥1次，每次貼敷1 h。空白對照組和陽性對照組小鼠灌胃給藥。連續給藥7d，于第七天給藥后的0.5h，1h，2h，4 h對各組小鼠痛閾值進行測定。

2.2 小鼠醋酸致痛試驗[8]選取昆明種小鼠60只，雌雄均用，并且數量各半，小鼠的分組及給藥方法同“2.1”項，連續給藥7d，末次給藥后 1h，對小鼠腹腔注射0.8%乙酸溶液，給藥量按0.1mL/10g體重，記錄小鼠在15min內出現扭體反應的次數和出現扭體反應之前的潛伏時間，并計算各組用藥對小鼠扭體的抑制百分率。抑制率(%)=(1-給藥組扭體反應次數/空白對照組扭體反應次數)×100%

2.3 小鼠醋酸致腹腔毛細血管通透性實驗[9]選取昆明種小鼠60只，雌雄均用，并且數量各半，小鼠的分組及給藥方法同“2.1”項，連續給藥7d，末次給藥后 1h，對小鼠進行1%伊文斯蘭溶液靜脈注射，給藥量為0.1mL/10g體重量，同時對小鼠進行0.6%醋酸溶液腹腔注射，每只小鼠注射0.2mL，注射后20min處死小鼠，用5mL的生理鹽水對小鼠腹腔進行沖洗，收集沖洗液并離心，3000 rpm/min離心15 min，取離心后的上清液，在590 nm處測定其吸光度。

2.4 小鼠耳腫脹抑制實驗[9]選取昆明種小鼠60只，雌雄均用，并且數量各半，小鼠的分組及給藥方法同“2.1”項，連續給藥7d，末次給藥1h后，于小鼠右耳上均勻的涂二甲苯，每只用藥0.05mL，致炎15min后，將小鼠脫頸椎處死，用打孔器沖下左右耳廊，直徑為8mm，分別將小鼠左右耳廊在電子天平上進行稱重，計算各組用藥對小鼠耳腫脹的抑制率。抑制率=(空白模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/空白模型組平均腫脹度×100%

2.5 大鼠棉球肉芽腫試驗[10]取雄性Wistar種大鼠60只，體重為280±20g，大鼠分組和用藥劑量同“2.1”項，乙醚淺麻醉，將已滅菌并稱重的10mg 左右的棉球植入大鼠右側腋窩下，縫合，于手術當日給藥，給藥前1h，大鼠腹部褪毛。連續給藥 7天，最后一次給藥 1h后處死大鼠，將棉球取出，在 60℃烘箱中干燥至衡重。對棉球進行稱重，所得重量減去實驗前棉球重量即得肉芽腫的重量，計算各組用藥對增生的抑制率。

增生抑制率=(空白對照組肉芽平均重-給藥組肉芽平均重)/空白對照組肉芽平均重×100%

2.6 統計學方法 試驗數據以均數±標準差表示，采用SPSS11.0統計軟件進行方差分析(One-Way ANOVA)和組間t檢驗。

3 結 果 3.1 熱板刺激所致小鼠疼痛反應的作用 飛天蜈蚣七貼劑各劑量組與空白對照組和空白基質組相比，均能明顯增加小鼠的痛閾值。0.5h時飛天蜈蚣七貼劑對小鼠痛閾值有一定延長，但是與陽性對照藥阿司匹林組相比，效果略差。在給藥1h，2h時，與空白對照組相比，高、中劑量組均能延長小鼠的痛閾值，且延長效果顯著(P<0.05)，且有一定的量效關系。隨著時間的推移，藥物的作用有減弱的趨勢(結果見表1)。結果說明飛天蜈蚣七透皮貼劑具有明顯的鎮痛作用。

表1 熱板刺激所致小鼠疼痛反應作用(n=10)

3.2 醋酸致痛小鼠的鎮痛作用 飛天蜈蚣七透皮貼劑可有效增長小鼠扭體潛伏期，減少扭體次數。給藥組的扭體潛伏期有明顯的延長，且高、中劑量組的扭體抑制率分別達到了51.5%和49.0%，與陽性藥阿司匹林組(50.0%)相當；說明與空白對照組比較，飛天蜈蚣七透皮貼劑有顯著的鎮痛作用(P<0.05)，且存在一定的量效關系，結果見表2。

表2 醋酸致痛小鼠的鎮痛作用(n=10)

3.3 對腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性的影響 飛天蜈蚣七透皮貼劑在高、中、低劑量下均能降低小鼠毛細血管通透性，與對照組相比作用顯著(P<0.05)，與陽性對照藥阿司匹林相比作用相當。這表明飛天蜈蚣七透皮貼劑可以減少炎性介質的滲出，具有顯著的抗炎作用，結果見表3。

表3 小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(n=10)

3.4 對小鼠耳腫脹和大鼠棉球肉芽腫的抑制作用 飛天蜈蚣七透皮貼劑在高、中、低劑量下均能對小鼠耳腫脹發揮明顯的抑制作用，并且與對照組相比，抑制作用顯著(P<0.05)，高劑量組對小鼠耳腫脹的抑制作用(61.0%)要大于陽性對照藥阿司匹林組(53.5%)，中劑量組、低劑量組對小鼠耳腫脹的抑制作用則于陽性對照藥阿司匹林組相當。這表明飛天蜈蚣七透皮貼劑能顯著抑制由二甲苯致炎而引起的小鼠耳腫脹，具有良好的抗炎活性。結果見表4。與空白對照組相比，飛天蜈蚣七透皮貼劑在高、中、低劑量下均能對大鼠棉球肉芽腫發揮抑制作用，且該抑制作用顯著(P<0.05)。空白對照組和空白基質組大鼠肉芽組織增生較明顯，并且在對大鼠肉芽組織進行剝離時，在該組織周圍或內部可以觀察到有大量炎性液滲出。飛天蜈蚣七透皮貼劑各劑量和陽性對照藥阿司匹林組大鼠肉芽組織周圍或內部炎性滲出液較少。這進一步表明飛天蜈蚣七透皮貼劑有明顯的抗炎作用，結果見表4。

表4 小鼠耳腫脹和大鼠棉球肉芽腫的

4 討 論 目前，透皮給藥系統(TDDS)由于其獨特優勢已成為藥物制劑研究開發的新熱點，我國中藥資源豐富，并且中藥具有毒副作用小的優點，因此成為了TDDS研究的一個重要領域。但是，在臨床上使用的中藥大多數為復方制劑，中藥成分較為復雜，給中藥經皮給藥新制劑的研究與開發帶來許多問題。本研究將中藥飛天蜈蚣七中的有效成分進行提取分離，使用飛天蜈蚣七提取物作為透皮貼劑的主要成分來制備中藥透皮貼劑，保持了飛天蜈蚣七的療效,藥效學試驗表明制備的透皮貼劑具有明顯的鎮痛抗炎作用，且其抗炎鎮痛活性大小與劑量正相關。本試驗的藥效學研究為飛天蜈蚣七藥材的開發應用奠定了基礎，同時也為其進一步應用于臨床提供理論依據。但對于其抗炎鎮痛的機理探討，尚有待于進一步研究。

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(收稿2015-08-20；修回2015-09-30)

藥效學 @飛天蜈蚣七透皮

R282

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.12.057