孫菊華徐濤
(1新疆阿圖什市疾病預防控制中心 新疆阿圖什 845350;2新疆喀什市疾病預防控制中心 新疆喀什 844000)
微生物檢驗樣品采集應注意的問題
孫菊華1徐濤2
(1新疆阿圖什市疾病預防控制中心 新疆阿圖什 845350;2新疆喀什市疾病預防控制中心 新疆喀什 844000)
樣品的采集是微生物檢驗的重要組成部分,用于檢驗的樣品數量和狀況具有重要意義,這對取樣人員和制樣人員提出了很高的專業要求,既要保證樣品的代表性和一致性,又要保證整個微生物檢驗過程在無菌操作的條件下進行,微生物檢驗樣品的采集大致分為取樣,包裝,密封,標志樣品的運輸,接收,保存幾個環節。
1.取樣的定義
取樣是指在一定質量的或數量的產品中,取一個或多個代表性樣品,用于感官,微生物和理化檢驗的全過程,首先在取樣之前應確認貨證是否相符,其次取樣工具要達到無菌的要求,對取樣工具和一些試劑材料應提前準備,滅菌如果使用不合適的采集工具,可能會破壞樣品的完整性,甚至使樣品采集毫無意義,應根據不同的樣品特征和取樣環境,對取樣物品和試劑進行事先準備和滅菌等工作,另外要保證樣品能夠代表整批產品,其檢測結果應具有統計學有效性,樣品到達實驗時的狀況[1]。應能反映出取樣時產品的真實情況。取樣的應根據不同的產品類型,產品狀態等選擇不同的取樣原包裝,直到檢驗前不要開封,以防污染,對于桶裝或大容器包裝的液體食品,取樣前應搖動或用滅菌棒攪拌液體,盡量使其達到均質,取樣時應先將取樣用具浸入液體內略加漂洗,然后再取所需量不應超過其容量3/4,以便于檢驗前將樣品搖勻,取完樣品后,應用消毒溫度計插入液體內測量食品溫度,并做記錄,盡可能不用水銀溫度計以防溫度計破碎后水銀污染食品,如如為非冷藏易腐食品,應迅速將所取樣品冷卻至0-4℃,對于大塊的桶裝或大容器包裝冷凍食品,應從幾個不同部位用滅菌工具取樣,使樣品具有充分的代表性,在將樣品實驗室前,要始終保持處于冷凍狀態,樣品一旦融化,不同使其在凍,冷卻即可[2]。
2.生產過程中取樣;劃分檢驗批次應注意同批次品質量的均一性;如用固定在儲液桶或流水作業線上取樣龍頭取樣時,應事先將龍頭消毒,當用自動取樣器取不需要冷凍的粉狀或固體食品時,必須履行相應的管理辦法,保證產品的代表性不被人破壞。
3.液體產品;通常情況,液態產品容易獲得代表性樣品,液態產品一般盛放在大罐中,取樣時刻連續或間歇攪拌,對于較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其完全混勻,較大的樣品。
4.固體樣品,固體樣品常用的取樣工具有滅菌的解剖刀,軟木鉆和鉗子等,面粉或乃風等易于混勻的食品,其成品質量均勻穩定可以抽取小樣品檢測,但散裝樣品就必須從多個點去取樣,且每個樣品都要單獨處理。
5.表面取樣;通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉移到合適培養。其中進行微生物檢驗,這種惰性載體既不能引起微生物死亡,也不應增值,這樣的載體包括清水,拭子,膠帶等,取樣后應盡早將微生物長期保存在載體上,既不死亡又不增值十分困難,所以應盡早將微生物轉接適當培養基中,轉移前耽誤時間越長,品質評價的可靠性就越差,表面取樣技術只能直接轉移菌體,不能再做系列稀釋。
為了保證樣品的完整性,裝有樣品包裝物應進行封口,以證實其可靠性,即以取樣地點至實驗室,這段時間不發生變化,可采用自粘膠,然后蓋上專用的印章。
取樣過程中應對樣品進行及時,準確的標記,取樣結束應由取樣人寫出完整的取樣報告,樣品應盡可能在原有狀態下迅速運送或發送實驗,保存的樣品應進行必要清晰標記,內容包括,樣品名稱,樣品描述,樣品批號,取樣時間,取樣溫度,確保字跡不會擦掉或脫色。
取樣結束后應盡快將樣品送往實驗檢驗,如不能及時運送冷凍樣品應存在-15℃以下的冷藏,冷藏和易腐食品存放在-15℃冰箱。冷藏和易腐食品存放-4℃冰箱或微生物檢驗樣品應在取樣后6小時內送達實驗室進行檢驗
在接受樣品時,實驗室應與送樣人共同相互確認樣品上內容一般包括;品名。冷藏零售,批發;無菌包裝等不同;抽樣數量不同(個數和質量)抽樣日期.抽樣地點隨貨樣附帶的許可申請單編號;生產或生產廠家名稱(進口商品);抽樣者單位,姓名有無封印,其他搬運儲存,檢驗時注意事項。
實驗室接到樣品后應在36小時內進行檢測9貝類樣品頭通常要在6小時檢測,對不能(立即進行檢測樣品,要采取適當的方法保存,使樣品在檢測結果能夠代表整個產品,實驗室應有足夠和適當的樣品保存設施(如冰箱和冰柜等)保存的樣品應進行,必要和清晰的標記,內容包括,樣品名稱,樣品描述,樣品批號,企業名稱地址,取樣人,取樣時間取樣地點,取樣溫度,(必要時)測試目的等,樣品在保存過程中應保存密封性1、易腐樣品;要用保溫箱或采取必要的措施(使樣品處于低溫狀態(0℃-4℃)應在取樣后盡快送實驗室,并保存樣品送至實驗時不變質,容易腐的飛冷凍食品檢測前不應冷凍保存(除非不能及時檢測)一般不應超過36h,因為保存時間過長會造成樣品中嗜冷細菌的生長和嗜溫菌的死亡2、冷凍樣品;要用保溫箱或采取必要的措施是樣品處于冷凍狀態,送至實驗室前樣品(通常為-18℃)檢測前要始終保持冷凍狀態,防止樣品暴露在二氧化碳氣體中。
通過長期的實踐工作檢驗和科學的實驗表明,用于微生物檢驗樣品的采取主要遵循以下原則1必須保證樣品的采取過程的無菌操作2、取樣要講究,有代表性不同樣品,有不同要求特別是某些特殊樣品,3、樣品的運輸,接收和保存要保持樣品原樣,不能影響質量4、樣品的保障密封和標志要明確以備查詢。
[1]劉珍.化驗員讀本上冊[M].北京:化學工業出版社,2004:78.
[2]雷質文.食源微生物用樣品的抽取的制備手冊[M].北京:中國標準出版社,2010:43.
R446.5
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1009-6019(2015)02-0042-01