宜賓地區女性感染人乳頭瘤病毒狀況分析

張立營 陳樸 龍琴 沈偉

宮頸癌是一種女性常見的生殖系統惡性疾病，且發病率高。目前普遍認為人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是宮頸癌發生的主要危險因素之一［1］。HPV DNA檢測早已被歐洲生殖道感染和腫瘤研究組織作為篩查宮頸癌的首選方法。HPV具有嚴格的組織特異性，主要感染人的皮膚或黏膜上皮細胞，引起相應部位發生病變。它主要通過性傳播、母嬰傳播、直接皮膚接觸等方式感染。現在HPV已有100多種基因型被人們所熟知，且不同型別導致宮頸上皮的病變不同。依據宮頸癌與HPV型別的關系高低將它分為低危型和高危型。低危型HPV常引起尖銳濕疣等良性病變;高危型HPV與宮頸癌前病變及宮頸癌有關。流行病學資料顯示HPV亞型在不同地區、不同人群、不同年齡階段分布具有一定的差異［2］。宜賓位于四川西南地區，為多民族聚集地，其生活方式、受教育水平及文化背景有顯著的地域性特點，且目前對于該地區女性感染HPV的相關研究比較少。本研究通過對宜賓地區女性感染HPV亞型分布調查分析，希望為該地區HPV感染的診治和宮頸癌的預防提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年3月至2014年9月來我院婦科、泌尿外科、皮膚性病科就診的疑似HPV感染的4053名女性，進行宮頸脫落細胞標本HPV基因型別檢測(多次檢查者只取首次結果)，年齡18～65歲，平均年齡39.5歲。

1.2 儀器與試劑 基因擴增儀:QIAGEN Rotor-Gene Q實時熒光定量PCR分析儀;核酸分子導流雜交儀、HPV-DNA提取試劑盒和HPV分型檢測試劑盒均購自廣東凱普生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標本采集與保存:用HPV專用的宮頸刷采集宮頸脫落細胞標本，然后將宮頸刷放入專用細胞保存液的取樣管中，擰緊管蓋，盡快送檢，若不能及時檢測需置于－4℃冰箱保存，嚴格按照標準化操作說明進行。

1.3.2 標本檢測:采用凱普公司的HPV-DNA提取與分子雜交系統對常見的21種HPV基因型［6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304(81)］進行檢測，嚴格按照儀器與試劑說明書操作。

1.3.3 判斷標準:雜交膜上Biotin對照點與內控點同時出現藍紫色圓點判斷為實驗有效。若雜交膜其它檢測位點無藍紫色圓點，則表示未出現感染;若雜交膜上其它檢測位點出現一個藍紫色圓點則表示HPV單一感染;若膜上出現兩個或多個藍紫色圓點，則表示HPV雙重或多重感染。

1.4 統計學分析 應用SPSS 13.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV感染率及亞型分布情況 在4053例送檢樣本中檢出陽性標本806例，陽性率為19.89%。在21種HPV基因型別中共檢出18種HPV亞型，其中檢出單一HPV亞型感染515例(12.71%)，其中低危型283 例(6.98%)，HPV6、11、42、43、44、CP8034 在單一HPV亞型感染中的檢出率分別為21.91%、19.08%、12.72%、15.90%、17.31%、13.07%;高危型 232 例(5.72%)，HPV16、1 8、31、35、45、51、52、53、56、58、59、66在單一 HPV亞型感染中的檢出率分別為18.10%、7.33%、6.47%、7.76%、9.05%、5.60%、14.66%、4.74%、7.33%、6.90%、7.76%、4.31%。感染兩種及以上HPV亞型占7.18%(291/4053)。見表1。

2.2 HPV亞型混合感染分布情況 在806例HPV陽性標本中，HPV亞型混合感染標本291例，占總感染率的7.18%(291/4053)。其中雙重感染者占混合感染的 53.61%(156/291)、三重感染占 31.96%(93/291)、四重感染占14.43%(42/291)。見表1。

表1 HPV亞型在單一感染和混合感染中的分布情況

2.3 女性感染HPV的年齡分布 將4053例女性患者分成5個年齡段加以分析，女性HPV篩查人群年齡多在36～45歲，45歲以后篩查人數逐漸減少。感染的人群分布以18～35歲年齡組為主，26～35歲年齡段HPV感染率達到高峰，45歲以后開始減少。35歲以下女性HPV感染率明顯高于35歲以上女性，差異有統計學意義(χ2=63.95，P＜0.05)。見表2。

表2 4053名女性各年齡段HPV感染檢出情況

2.4 HPV感染率與受教育程度關系 初中及以下學歷女性HPV感染率為22.31%(593/2 658)，高中學歷女性HPV感染率為16.45%(155/942)，大學及以上水平女性HPV感染率為12.80%(58/453)。受不同教育程度的女性人群的HPV感染率差異有統計學意義(χ2=31.03，P＜0.05)。

3 討論

宮頸癌是全世界女性比較常見的惡性腫瘤之一。流行病學證實，HPV以性傳播為主要傳播途徑，HPV感染與尖銳濕疣、乳頭狀瘤、宮頸癌前病變和宮頸癌等密切相關［3，4］。有文獻報道，高危型HPV感染是宮頸癌前病變和宮頸癌的主要原因，99.7%的宮頸癌患者可檢測出HPV病毒［5］。宮頸癌的發病要經歷了一個漫長過程，有效的篩查及恰當的治療完全有可能將其阻斷在癌前病變早期階段。HPV分型檢測技術運用于臨床宮頸癌的篩查，其具有靈敏度高、特異性強、可檢測多重感染等優點，對于宮頸癌的早期發現、早期診斷及早期治療具有重要的臨床意義。

在女性人群中，HPV感染率在不同地區、不同人群HPV感染情況存在很大的差異。本研究發現宜賓地區受檢的4053名女性人群中，HPV感染陽性人數806名，感染率為19.89%，高于世界女性人群的平均水平(10.4%)［6］，低于國內相關文獻報道的感染率［7，8］。這可能與我們篩查的女性人群不同有關，因為宜賓地區為多民族聚集地，少數民族人口比例比較高，其生活方式、受教育水平及文化背景與其它地區略有不同。本實驗在21種HPV亞型中共檢測出18種亞型，感染類別以HPV單一型別感染為主，占12.71%(515/4053)，其中低危型占 54.95%(283/515)，主要以HPV6、11和 44為主;高危型占 45.05%(232/515)，主要以HPV16、18和52為主。感染兩種及以上HPV亞型患者占7.18%(291/4053)。多亞型混合感染的增多，這主要與篩查人群健康意識比較薄弱有關。導致HPV多重感染的原因可能是同時感染不同HPV亞型，也可能是多次感染所引起。在混合感染中，以兩重感染為主，常見的感染類型為 HPV6、11、16，18、52之間的混合感染。Lee等［9］研究發現單一HPV感染會使女性患宮頸癌的風險增加19.9倍，而混合感染會使該風險增加到31.8倍。

各地區女性HPV感染率不同除了與區域因素有關外，主要還與待檢人群年齡段、教育程度、宿主免疫力、性生活狀況和各種生活習慣等有關［10］。據相關文獻報道，世界主要地區HPV感染高峰年齡段在34歲之前，35～44歲年齡段HPV的感染率逐漸降低［11］。本研究結果顯示，不同年齡段HPV感染發生率明顯不同，26～35歲年齡組陽性檢出率最高，其次為18～25歲年齡組。35歲以下女性HPV感染率明顯高于35歲以上女性，差異有統計學意義(χ2=63.95，P＜0.05)，與文獻報道［12］大致相同。HPV 在年輕女性中感染率最高，這可能和年輕女性性生活狀況與生活習慣有關。因此，加強女性特別是＜35歲的女性HPV普查工作，對宮頸癌的早期發現和早期治療具有重要意義。

根據女性受教育程度的不同分類，本研究發現初中及以下學歷女性人群感染率最高，高中學歷女性人群次之，大學及以上文化水平女性HPV感染率最低。原因可能是文化程度越高，其居住環境、生活習慣、機體免疫力越強有關，還可能與其性行為、性伴侶數有關，引起女性HPV感染的因素很多，其中性行為是主要因素，如初次性交年齡、性伴侶個數、性交次數等。綜上所述，不同地區、不同人群HPV存在感染率、感染的亞型、感染的年齡段等差異，針對不同的人群，需要了解該人群HPV感染特點。通過本次研究對于掌握本地區女性HPV感染的現狀與HPV型別分布狀態，預防尖銳濕疣、宮頸癌前病變和宮頸癌的發生具有重要的意義。

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