虹吸法制備冷沉淀質控不合格原因分析

單泓 王姣杰

[摘要] 目的 探討虹吸法制備冷沉淀不合格發生率及不合格的原因，為采供血機構制備出高質量的冷沉淀提供理論依據。 方法 回顧性分析2011年1月～2014年1月期間我血液中心質控科對我科采用虹吸法制備的冷沉淀質量控制結果，統計不合格原因，計算不合格率，并從各個環節探討影響冷沉淀質量的因素。 結果 每個月隨機抽檢4袋，連續36個月，共抽檢144袋，不合格產品共計17袋，不合格率為11.8%；不合格產品中，均為Ⅷ因子含量不足。 結論 冷沉淀不合格原因主要為Ⅷ因子含量不足，從原料血、原料血漿及冷沉淀制備等多個環節進行控制可以減少或預防不合格產品的出現。

[關鍵詞] 冷沉淀；虹吸法；不合格原因；質量控制

[中圖分類號] R457 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）02-0094-03

冷沉淀是從新鮮冰凍血漿中提取、低溫下不溶解的血漿蛋白部分，主要含有第Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子、第XⅢ因子以及纖維結合蛋白等成分。近年來隨著對冷沉淀臨床應用領域的研究不斷深入，冷沉淀臨床應用范圍也在擴大，不僅用于血液病的治療，而且越來越多地用于各種外科手術及創傷引起的凝血機制異常等出血性疾病[1-5]。因此，冷沉淀的需求量也在不斷增加。制備出足量、高質量的冷沉淀制品是采供血機構的職責。我們通過對2011年1月～2014年1月期間用虹吸法制備的冷沉淀質控結果進行分析，從各個環節探討影響冷沉淀質量的因素，現報道如下。

1材料與方法

1.1 儀器設備及試劑

大容量低溫離心機（德國賀利氏）、CT-4T-6C型數字控制水浴血液融化箱、熱合機、DXJ-1型血漿速凍機（鄭州）、因子Ⅷ活性測定試劑盒（凝固法）（德國希森美康公司）、纖維蛋白原檢測試劑盒（德國希森美康公司）。

1.2 冷沉淀原料血漿

河南省紅十字血液中心2011年1月～2014年1月期間制備的200 mL新鮮冰凍血漿，由400 mL新鮮全血在采集后6 h內經大容量低溫離心機離心后分離并置-65℃冰箱速凍而成。

1.3 冷沉淀制備方法

我血液中心采用虹吸法制備冷沉淀，具體步驟：①全自動低溫循環水浴融化箱預溫至6℃，將新鮮冰凍血漿置于融化箱內，每次不超過30袋；②10 min后，將轉移袋移至融化箱外的托盤中，并打開止流夾，調整至虹吸狀態；③當血漿融化至剩余40～50 mL血漿及白色冷不融物時，關閉止流夾，熱合斷開，并迅速將其置于血漿速凍機中。

1.4 質控科常規抽檢

2011年1月～2014年1月期間，每月隨機抽檢4袋，連續36個月，共計抽檢144袋，每袋產品檢測內容包括容量及Ⅷ因子、纖維蛋白原含量。Ⅷ因子、纖維蛋白原含量檢測按試劑盒操作說明進行。

1.5 不合格產品判斷

國家質量標準要求來源于400 mL全血制備的冷沉淀 FⅧ≥80 IU，纖維蛋白原含量≥150 mg，我血液中心容量為標示量50（mL）±10%，容量超標或不足、Ⅷ因子及纖維蛋白原含量不符合國家標準[6]均視為不合格產品。

2 結果

2.1 抽檢結果

2011年1月～2014年1月期間共抽檢36批次144袋產品中，不合格產品共計17袋，總不合格率為11.8%，總合格率為88.2%，見表1。由表1中數據可知，冷沉淀合格率呈增加趨勢。

表1 2011年1月～2014年1月期間冷沉淀質控結果不合格例數統計

2.2 虹吸法制備冷沉淀不合格產品檢測結果

不合格產品共計17袋，每袋產品均不同批次，均為Ⅷ因子含量低于國家標準，具體每袋產品檢測結果見表2。

表2 虹吸法制備冷沉淀不合格產品檢測結果（x±s）

注：每袋冷沉淀為IU，由200 mL新鮮冰凍血漿制備而成，國家標準：FⅧ含量≥80 IU/U

3 討論

冷沉淀是從新鮮冰凍血漿中提取、低溫下不溶解的血漿蛋白部分，主要含有第Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子、第XⅢ因子以及纖維結合蛋白等成分，是臨床常用的血液成分之一。目前制備冷沉淀常用的方法有傳統離心法和水浴虹吸法。由于傳統離心法需要在4℃冰箱長時間緩慢融化至一段時間后，再進行離心分離，耗時長，Ⅷ因子衰減過多，再加上離心時不可避免使溫度上升，從而導致Ⅷ因子喪失過多，最終使所制備的冷沉淀制品合格率較低[7-9]，難以滿足臨床需求。而虹吸法制備冷沉淀具備操作簡單、制備時間短、溫度恒定、Ⅷ因子含量高等優點，近年來該方法受到很多采供血機構的青睞。盡管虹吸法制備冷沉淀有諸多優點，筆者發現仍然有不合格產品出現，對不合格產品進行分析，有利于今后工作的改進，整體提高冷沉淀的質量，從而有利于臨床患者的治療。

從抽檢結果看，纖維蛋白原含量合格率為100%，不合格原因主要為Ⅷ因子含量不足，總不合格率為11.8%。纖維蛋白原是較為穩定的凝血因子，冷沉淀的制備溫度和制備時間對其影響較少，因此抽檢合格率為100%，與李雪梅等[7]的報道一致。Ⅷ因子為不穩定凝血因子，主要參與內源性凝血過程，能形成凝血活酶，加速凝血因子Ⅹ活化，加快內源性凝血過程，Ⅷ因子含量不足直接影響著冷沉淀的臨床應用效果。血液離體后，影響不穩定凝血因子質量的因素有多種，溫度、時間、工作人員的操作方式等都能影響[10-13]。冷沉淀為新鮮冰凍血漿的衍生制品，新鮮冰凍血漿的質量也直接影響著冷沉淀的質量。制備新鮮冰凍血漿需要的全血，不僅要求符合制備成分血的要求，還需要在采血源頭加以控制，要求一針穿刺成功、采血順暢的全血，如果穿刺不順暢、采血時間過長，可能會啟動獻血者的凝血機制，引起全血中的凝血因子含量異常，這種全血不宜制備新鮮冰凍血漿，在血液采集時，應對此類血液給予標識，以避免制備成新鮮冰凍血漿；另外，制備新鮮冰凍血漿的原料血即新鮮全血，應盡快放在4℃冰箱保存，盡可能減少不穩定凝血因子效價降低。全血分離制備出新鮮液體血漿后，要迅速在-65℃以下的速凍機中凍成固體狀態，然后保存在-20℃以下的冰箱中。如果新鮮液體血漿在室溫存放時間過長，也會影響血漿中不穩定凝血因子含量。冷沉淀制備過程中，影響不穩定凝血因子質量的因素也是多方面的，融化溫度、時間都會影響冷沉淀的質量[14，15]。制備冷沉淀應使用專用低溫水浴融化箱，微電腦能把溫度控制在1～6℃，并能較好地控制融化速度，這些是保證冷沉淀質量的重要因素之一。冷沉淀制備好后，應盡快放置在-65℃以下的速凍機中凍成固體狀態，速凍是保存凝血因子Ⅷ的關鍵步驟，速凍時，要把冷沉淀逐袋擺平，不要重疊堆放。臨床患者輸注冷沉淀時，重癥患者常常需要一次性輸入多袋產品以保證療效，如果容量過多就會不可避免地增加患者的心臟負擔或循環血容量。因此容量控制也很重要，要求工作人員制備時嚴把質量關，每袋產品都要用電子秤稱重，以避免每袋冷沉淀容量過多。

從連續三年的抽檢結果看出，通過對血液源頭及制備過程的嚴格管理，用虹吸法制備的冷沉淀不合格制品呈逐漸減少趨勢。我中心將冷沉淀質量標準定為75%抽檢合格為符合血液質量標準。目前，我中心冷沉淀合格率已達到90%以上。冷沉淀產品合格率的不斷提升，不僅可以保證患者的療效，同時也可以減少用量起到相對節約血源的作用，因此，在一定程度上可以緩解血站冷沉淀供給緊張的局面。

總之，冷沉淀是臨床常用血液制品之一，近年來其應用范圍及用量呈上升趨勢，采供血機構應該重視影響冷沉淀質量的各個環節，從采血源頭抓起，注重從業人員的專業知識培訓及責任感教育，從而為臨床提供充足、高效、優質的冷沉淀制品。

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（收稿日期：2014-09-26）