疣狀胃炎組織p16、VEGF表達及其與Hp的相關性研究

陸才金，蘇東星，吳縣斌，石海英

(南寧市第二人民醫院消化內科，廣西 南寧 530031)

疣狀胃炎組織p16、VEGF表達及其與Hp的相關性研究

陸才金，蘇東星，吳縣斌，石海英

(南寧市第二人民醫院消化內科，廣西 南寧 530031)

目的 探討p16蛋白、血管內皮生長因子(VEGF)在疣狀胃炎(VG)組織中的表達及其與幽門螺桿菌(Hp)的關系。方法選取2013年1～9月我院胃鏡室收集并經胃鏡確診為VG的胃黏膜活檢標本60例和正常胃黏膜活檢標本30例，采用免疫組化SP法檢測VG組織中p16、VEGF的表達，并判斷有無Hp感染。采用Spearman相關性分析方法分析p16、VEGF在VG組織中的表達與Hp的相關性。結果VG的Hp感染率明顯高于正常胃黏膜組織(P＜0.05)；VG組織中p16的表達陽性率明顯低于正常胃黏膜組織(P＜0.05)，而VG組織中VEGF的表達陽性率明顯高于正常胃黏膜組織(P＜0.05)；Hp感染與VG組織中p16、VEGF的表達均呈正相關(rp16=0.261，rVEGF=0.268，P均＜0.05)。結論p16、VEGF的表達及Hp感染均參與了VG的形成發展過程，p16、VEGF表達與Hp感染起協同作用。

疣狀胃炎；p16；VEGF；Hp感染

疣狀胃炎(Verrucous gastritis，VG)是指胃黏膜表面發生病變而呈疣狀或痘診狀突起的一種慢性胃炎，又稱痘疹狀胃炎和慢性糜爛性胃炎[1]。有研究[2-3]指出，VG與胃癌的發生及進展具有密切關系，而幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是誘發VG形成的重要因素之一，同時也被認為是誘發VG癌變的主要誘因之一，大部分胃炎和胃癌患者均伴有Hp感染發生。本研究通過檢測VG和正常胃黏膜組織中p16蛋白、VEGF的表達及Hp感染發生情況，研究VG組織中p16蛋白、VEGF的表達與Hp感染的關系，以探討p16蛋白、VEGF的表達與Hp感染在VG的形成發展過程中的作用，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2013年9月我院胃鏡室收集的VG胃黏膜活檢標本60例，均符合中華醫學會內鏡分會慢性胃炎的內鏡分型分級標準及治療試行意見[4]里VG的內鏡診斷標準，其中男性38例，女性22例，年齡21～64歲，平均(44.30±13.48)歲，成熟型VG 32例，未成熟型VG 28例；正常胃黏膜活檢標本30例，男性16例，女性14例，年齡22～63歲，平均(43.79±14.28)歲。兩組病例在性別、年齡等一般資料上比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。所有病例均未給予H2拮抗劑、質子泵抑制劑等藥物治療和抗Hp感染治療。

1.2 檢測方法 所有組織均經過10%中性甲醛溶液固定，石蠟包埋，常規4 μm厚連續切片，蘇木精-伊紅染色。采用免疫組織化學SP法檢測抑癌基因p16蛋白、VEGF在VG組織及正常胃黏膜組織中的表達，主要試劑為p16及VEGF兔抗人多克隆抗體、免疫組化試劑盒和DAB試劑盒，均由福建邁新生物技術開發有限公司提供。實驗操作均嚴格按照試劑盒說明書進行DAB顯色、蘇木精復染，以PBS緩沖液代替一抗作陰性對照，已知p16、VEGF表達陽性的胃癌切片代替一抗作為陽性對照。采用尿素呼氣試驗及快速尿素酶試驗檢測Hp，主要試劑為尿素14C呼氣試驗藥盒(上海欣科有限公司)、胃Hp pH指示劑診斷試劑盒(福建三強生物化工有限公司)，試驗操作步驟均嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 結果判定 (1)p16表達判定：p16陽性表達為細胞核和(或)細胞質出現棕黃色顆粒，以顯色細胞數＞20%判定為陽性，以顯色細胞數＜20%判定為陰性。(2)VEGF表達判定：VEGF陽性表達為細胞漿和(或)細胞膜出現棕黃色顆粒，以顯色細胞數＞25%判定為陽性，以顯色細胞數＜25%判定為陰性。采用雙盲法進行細胞計數，兩位病理醫師計數差異＞10%時，需再次計數。(3)Hp感染判定：尿素呼氣試驗及快速尿素酶試驗檢測均為陽性判斷為Hp陽性，兩項檢測均為陰性判斷為Hp陰性，若兩項檢測結果不一致，則需再次鑒定。

1.4 統計學方法 本研究數據采用SPSS18.0統計軟件進行分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，兩組間的計數資料采用χ2檢驗，p16、VEGF在VG組織中的表達與Hp的相關性采用Spearman相關性分析方法分析。以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 VG組及正常胃黏膜組Hp感染情況比較 VG組60例中Hp陽性38例，Hp陰性22例，Hp陽性率為63.33%；正常胃黏膜組30例中Hp陽性8例，Hp陰性22例，Hp陽性率為26.67%。VG組Hp陽性率明顯高于正常胃黏膜組，差異具有統計學意義(χ2=12.482，P＜0.05)。

2.2 VG組織及正常胃黏膜組織中p16、VEGF的表達比較 VG組織中p16的表達陽性率明顯低于正常胃黏膜組織，而VG組織中VEGF的表達陽性率明顯高于正常胃黏膜組織，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 VG組織及正常胃黏膜中p16、VEGF的表達陽性率比較[例（%）]

2.3 VG Hp感染與p16、VEGF表達的相關性 Spearman相關性分析結果顯示，VG中Hp感染與VG組織中p16、VEGF的表達均呈正相關(rp16= 0.261，rVEGF=0.268，P均＜0.05)，見表2。

表2 VG Hp感染與P16、VEGF表達的相關性[例（%）]

3 討論

VG特點是再發性或持續性胃黏膜多發性疣狀隆起或痘疹狀病灶，病變部位一般呈糜爛、凹陷，多發于胃竇部[5]。目前臨床認為VG的發生發展與Hp感染、過敏、胃酸分泌異常、膽汁反流等相關，其中Hp感染是導致VG發生發展的最重要因素[6]。有研究[7]提出，Hp感染參與VG形成與發展過程的作用機制可能是通過釋放某些致病因子作用于胃黏膜，進而使胃黏膜發生損傷、充血水腫、點狀壞死、局部隆起增生、凹陷、片狀糜爛等病變，從而導致胃部炎癥反應的發生。據文獻[8]報道，VG合并Hp感染的發生率可高達75.0%。本研究對VG組織與正常胃黏膜組織的Hp陽性率進行檢測，發現VG組織中的Hp陽性率為63.33%，明顯高于正常胃黏膜的Hp陽性率，與肖晨等[9]研究結果相一致，提示Hp感染在VG的發生與發展過程中起著較重要的作用。

p16基因是一種新型抑癌基因，在多種腫瘤細胞株中存在高頻率純合子缺失、突變等現象，其表達產物p16蛋白可直接參與細胞周期的調控，進而抑制腫瘤細胞惡性增殖和分裂[10]。有研究提出，p16基因參與了疣狀胃炎發生發展過程及向胃癌轉變的過程[11]。VEGF是一種可直接作用于血管內皮細胞促進血管內皮細胞增殖和新生血管生成的因子，主要通過與其受體KDR結合，作用于血管內皮細胞，促進血管內皮細胞大量增殖，誘導血管新生[12]，還可通過增加血管通透性，使腫瘤細胞生長、滲出及擴散轉移[13]。因此，VEGF異常表達在促使正常胃黏膜或胃炎向胃癌的轉變及胃癌進展的過程中起著較重要的作用[14]。本研究對VG組織及正常胃黏膜組織的p16、VEGF的表達情況進行探討，結果顯示VG組織的p16表達陽性率明顯低于正常胃黏膜，而VEGF表達陽性率明顯高于正常胃黏膜，表明p16、 VEGF的表達均參與的疣狀胃炎的發生及發展過程，p16、VEGF異常表達提示疣狀胃炎具有向胃癌轉變的可能性。此外，本研究對VG組織中p16、VEGF的表達與Hp感染的相關性進行分析，結果顯示VG中Hp感染與VG組織中p16、VEGF的表達均呈正相關，表明抑癌基因p16、VEGF的表達與Hp感染具有協同作用。

綜上所述，p16、VEGF的表達及Hp感染均參與了VG的形成發展過程，p16、VEGF表達與Hp感染具有協同作用，共同促進VG的形成發展及其向胃癌轉變。

[1]郭愛華,張 清.133例疣狀胃炎的臨床、內鏡及病理分析[J].臨床消化病雜志,2013,25(2):106-107.

[2]陳 潔,朱海杭,徐永居,等.疣狀胃炎與胃癌的關系探討[J].中國內鏡雜志,2014,20(3):333-336.

[3]杜建新,馬洪德.疣狀胃炎與幽門螺桿菌感染關系分析[J].西南軍醫,2013,15(4):435-436.

[4]中華醫學會消化內鏡分會.慢性胃炎的內鏡分型分級標準及治療的試行意見[J].中華消化內鏡雜志,2004,21(1):77-78.

[5]劉春龍,肖陽娥,周大元,等.疣狀胃炎893例臨床及胃鏡分析[J].中國內鏡雜志,2011,17(10):1107-1108.

[6]卜煜鋒,張曉海,桑旭東,等.疣狀胃炎的胃鏡及病理結果分析[J].中國內鏡雜志,2011,17(7):692-694,698.

[7]丁世華,劉 俊,王建平,等.疣狀胃炎與胃癌的關系探討[J].海南醫學,2010,21(9):11-12.

[8]郭 銳,王 萌.幽門螺桿菌感染與疣狀胃炎的相關性研究[J].中國醫師進修雜志：內科版,2007,30(10):62-63.

[9]肖 晨,蘇東星,潘志剛,等.P16蛋白在疣狀胃炎、胃癌的表達和幽門螺桿菌感染的臨床意義[J].廣西醫學,2011,33(3):277-279.

[10]仰麗麗,文 劍.p16和p21在胃癌組織中的表達及臨床意義[J].江蘇醫藥,2014,40(5):538-540.

[11]丁世華,劉 俊,舒 晴,等.抑癌基因PTEN及P16蛋白在疣狀胃炎及胃癌組織中的表達及意義[J].世界華人消化雜志,2010,18 (19):2047-2049.

[12]卜煜鋒,張曉海,張洪濤,等.HIF-1α、VEGF在疣狀胃炎中的表達及意義[J].醫學研究雜志,2011,40(9):141-143.

[13]張 成,高廣榮,李 達,等.PAR-2、VEGF和CD34在胃癌組織中的表達及其臨床意義[J].實用醫學雜志,2013,29(11):1773-1776.

[14]陳 潔,朱海杭,徐永居,等.血管內皮生長因子及其受體KDR在疣狀胃炎及胃癌組織中的表達及意義[J].世界華人消化雜志, 2013,21(21):2031-2037.

Expression of p16,VEGF in verrucous gastritis tissue and the correlation with Helicobacter pylori infection.

LU Cai-jin,SU Dong-xing,WU Xian-bin,SHI Hai-ying.Department of Gastroenterology,Nanning Second People's Hospital,Nanning 530031,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo observe the expression of p16 protein,vascular endothelial growth factor(VEGF) in verrucous gastritis(VG)tissues and its relationship withHelicobacter pylori(Hp)infection.MethodsSixty gastric mucosal biopsy specimens from patients diagnosed as VG by gastroscopy and 30 normal gastric mucosal biopsy specimens were collected,which were tested for the expression of p16,VEGF by immunohisto-chemical SP method and detected for Hp infection.The relationship between the expression of p16,VEGF in VG tissues and Hp infection was analyzed by Spearman correlation analysis.ResultsThe rate of Hp infection in VG tissues was significantly higher than that of normal gastric mucosa(P＜0.05).The rate of positive expression of p16 in VG tissues was significantly lower thanthat of normal gastric mucosa tissues(P＜0.05),and the rate of positive expression of VEGF in VG tissues was significantly higher than that of normal gastric mucosa tissues(P＜0.05).The expression of p16,VEGF was positively correlated with Hp infection in VG tissues(rp16=0.261,rVEGF=0.268,P＜0.05).ConclusionThe expression of p16,VEGF and Hp infection is involved in the process of formation and development of VG,with synergistic action.

Verrucous gastritis;p16 protein;VEGF;Hp infection

R573.3

A

1003—6350（2015）08—1117—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.08.0400

2014-10-09)

南寧市科學研究與技術開發計劃項目（編號：200501083C）

陸才金。E-mail:2471728309@qq.com