周圍型肺癌CT征象與Ki67、p53表達(dá)的相關(guān)性研究

史利紅，李會(huì)菊，邢國鳳

(唐山市人民醫(yī)院CT室，河北 唐山 063000)

周圍型肺癌CT征象與Ki67、p53表達(dá)的相關(guān)性研究

史利紅，李會(huì)菊，邢國鳳

(唐山市人民醫(yī)院CT室，河北 唐山 063000)

目的探討周圍型肺癌CT征象與Ki67、p53表達(dá)的相關(guān)性。方法選取我院2013年1月至2014年3月在門診檢查并經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)的周圍型肺癌患者68例，全部患者應(yīng)用64層螺旋CT平掃或增強(qiáng)掃描進(jìn)行肺癌的CT征象判斷，測(cè)定每個(gè)患者蠟塊組織中Ki67、p53的表達(dá)量，探尋不同CT征象與Ki67、p53表達(dá)量的相關(guān)性。結(jié)果有棘狀突起征象的p53陽性表達(dá)比例高(χ2=4.60，P=0.032)，有毛刺征的p53、Ki67陽性結(jié)果比例均高，有相關(guān)性(χ2=5.49，P=0.001 9；χ2=4.27，P=0.039)，有磨玻璃征的p53陰性比例高，有相關(guān)性(χ2=8.22，P= 0.004)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移征象的p53陽性結(jié)果比例高，有相關(guān)性(χ2=11.2，P=0.001)，有分葉征與Ki67陰性結(jié)果比例高，有相關(guān)性(χ2=5.56，P=0.018)，其他CT征象與p53、Ki67表達(dá)量無相關(guān)性。結(jié)論棘狀突起、毛刺征、磨玻璃征和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移征象與Ki67、p53表達(dá)有相關(guān)性，為肺癌不同征象診斷提供依據(jù)。

周圍型肺癌；CT征象；Ki67；p53

周圍型肺癌又名肺野型，是指發(fā)生在肺段以下支氣管直至細(xì)小支氣管的肺癌，是城市死亡率位居首位的惡性腫瘤，在農(nóng)村中，肺癌死亡率逐漸上升。周圍型肺癌的CT表征主要有血管集束征及空洞、支氣管充氣征、空泡征、鈣化、毛刺征、胸凹陷征、分葉征等[1]，CT掃描可以顯現(xiàn)肺癌的影像學(xué)特征，但其診斷率較低[1]。腫瘤生物標(biāo)記物可以反映腫瘤的生物學(xué)特征，p53抑癌基因發(fā)生突變后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞無限制地增長(zhǎng)，變成癌基因，使腫瘤細(xì)胞增生變得非常活躍，因此正常p53基因在腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生、發(fā)展中起到重要決定性作用。Ki67蛋白是一種重要指標(biāo)，用以表示細(xì)胞增殖活性，在已發(fā)生癌變的組織中惡性程度越高，Ki67蛋白表達(dá)越強(qiáng)。腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)簡(jiǎn)便且費(fèi)用低廉，其表達(dá)異常往往早于影像學(xué)的異常，因此推測(cè)腫瘤標(biāo)志物的異常對(duì)周圍型肺癌的生物學(xué)行為具有重要意義。本研究旨在探討周圍型肺癌的CT征象與Ki67、p53表達(dá)的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 按照患者知情同意的原則，選取2013年1月至2014年3月在我院門診檢查并經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)的周圍型肺癌患者68例，全部患者用64層螺旋CT平掃或增強(qiáng)掃描。男性37例，年齡43～75歲，平均65歲；女性31例，年齡36～78歲，平均59歲，其中舌葉和中葉各7例，上葉和下葉分別為38例和16例；病程均不等，均為首次肺癌手術(shù)。

1.2 研究方法 所有患者進(jìn)行64位螺旋CT掃描(德國Siemens公司)，掃描整個(gè)肺部，記錄本次研究的分葉、棘突、含氣管征、毛刺征、磨玻璃征、空洞或鈣化以及縱膈或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移判斷標(biāo)準(zhǔn)為：肺門淋巴結(jié)短徑＜10 mm為非轉(zhuǎn)移；>10 mm和多個(gè)淋巴結(jié)腫大并融合為轉(zhuǎn)移。

1.3 p53和Ki67測(cè)量方法 選用即用型免疫組化EliVision plus試劑盒；鼠抗人p53蛋白免疫組化單克隆抗體及鼠抗人Ki-67抗原免疫組化單克隆抗體。抗原抗體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)參照試劑盒說明書進(jìn)行操作：在測(cè)定前需要用濃度為10 mmol/L，pH值6.0的檸檬酸鹽緩沖液處理甲醛溶液固定的石蠟切片。p53抗體試驗(yàn)中選取肺癌組織的結(jié)果為陽性對(duì)照組，測(cè)Ki67抗體實(shí)驗(yàn)中采用扁桃體陽性染色的切片為陽性對(duì)照組，而陰性對(duì)照組選用正常血清代替一抗。

1.4 p53和Ki67評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 顯微鏡下觀察細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒即為陽性結(jié)果，計(jì)數(shù)1 000個(gè)視野下細(xì)胞中陽性細(xì)胞所占的比例。40倍顯微鏡下p53 1 000個(gè)細(xì)胞中陽性結(jié)果所占比例≥10%為陽性，反之為陰性；50倍顯微鏡下Ki67 1 000個(gè)細(xì)胞中陽性結(jié)果記錄大于等于50%為陽性，反之為陰性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CT征象與p53表達(dá)量的相關(guān)性 有棘狀突起征象與p53陽性結(jié)果比例高有相關(guān)性(P＜0.05)，有毛刺征與p53陽性結(jié)果比例高有相關(guān)性(P＜0.05)，有磨玻璃征與p53陰性比例高有相關(guān)性(P＜0.05)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移征象與p53陽性結(jié)果比例高有相關(guān)性(P＜0.05)；其他CT征象與p53表達(dá)量無相關(guān)性(P>0.05)，見表1。

2.2 CT征象與Ki67表達(dá)量的相關(guān)性 有分葉征與Ki67陰性結(jié)果比例高有相關(guān)性(P＜0.05)，有毛刺征與Ki67陽性結(jié)果比例高有相關(guān)性(P＜0.05)，其他CT征象與Ki67表達(dá)量無相關(guān)性(P>0.05)，見表2。

表1 CT征象與P53表達(dá)量的相關(guān)性(例)

表2 CT征象與Ki67表達(dá)量的相關(guān)性(例)

3 討論

周圍型肺癌好發(fā)于小支氣管部位，由于小支氣管的功能結(jié)構(gòu)，組織較薄，免疫細(xì)胞分布的少，是肺癌組織快速生長(zhǎng)的好地方。周圍型肺癌大多發(fā)病在40歲以上，60～79歲之間為發(fā)病高峰，男女發(fā)病比例為2.13：1。肺癌主要的癥狀是咳嗽、咳痰和咯血，但是否出現(xiàn)臨床癥狀和體征取決于肺癌發(fā)生的部位和病變發(fā)展的程度等多種因素，由于周圍型肺癌生長(zhǎng)方式的不同，導(dǎo)致其CT征象不同。周圍型肺癌采用CT平掃時(shí)首先看到的局部結(jié)構(gòu)不規(guī)則而無序，能見到明顯的“瘤-肺”組織界面，包括有毛刺和棘狀突、分葉、磨玻璃影等征象特點(diǎn)；其次，癌組織的內(nèi)部表征即鈣化、空洞、含氣支氣管像等征象；最后是癌組織和肺組織周圍結(jié)構(gòu)的關(guān)系，主要為阻塞性肺氣腫、胸膜增厚、炎性斑和衛(wèi)星灶等。本次研究主要探討周圍型肺癌在臨床診斷上最為常見的征象，包括分葉、毛刺、棘狀突起、含氣支氣管像、鈣化和空洞、磨玻璃征等[2-4]。

臨床CT診斷中征象較多，一般以分葉征較多見，分葉征的形成是由多個(gè)腫塊相互融合所致，腫塊的形狀多樣，以凹凸不平常見。腫塊形成的病理基礎(chǔ)是相互融合的腫塊在不同的生長(zhǎng)方向上速度不同，或者在生長(zhǎng)中受到氣管或血管的障礙阻擋所致。在周圍型肺癌中分葉征象最為常見，分葉征的存在表示腫瘤的形成的概率很高，癌細(xì)胞在病理上已經(jīng)具有較強(qiáng)的增殖能力和較高的惡化程度。毛刺表象為從癌組織邊緣開始向肺野內(nèi)縱深，與胸膜有一定距離，毛刺大小不等，呈掃尾狀的密度分布，在臨床上這種征象診斷為周圍型肺癌也比較常見；癌細(xì)胞生長(zhǎng)加快，開始向周圍的淋巴管和血管束親潤后的結(jié)果是其病理基礎(chǔ)，或者是在結(jié)締組織擠壓作用下擠壓癌組織引起的周圍間質(zhì)反應(yīng)性增生。

隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，除傳統(tǒng)CT診斷外可以采用生物樣本進(jìn)行診斷，本文探討組織中p53和Ki67表達(dá)量與肺癌征象的相關(guān)性。人類的惡性腫瘤中有一半以上發(fā)生了p53基因突變或基因缺失[3]，p53基因的表達(dá)和肺癌的產(chǎn)生和發(fā)展緊密相連。現(xiàn)在已經(jīng)有證實(shí)p53基因發(fā)生突變是由于p53蛋白與腺病毒編碼癌蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合[4-5]，突變的p53基因就會(huì)促進(jìn)細(xì)胞增長(zhǎng)，影響細(xì)胞內(nèi)蛋白降解，在不同CT征象中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生會(huì)增加細(xì)胞內(nèi)蛋白的降解，這與本研究得出的結(jié)果相符。在周圍型肺癌的臨床患者中，腫瘤組織檢測(cè)鱗癌組織中Ki67抗原陽性的百分率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于腺癌。在肺癌患者中，Ki67抗原陽性的檢出率加之p53的表達(dá)強(qiáng)度增強(qiáng)方面，CT中診斷顯示支氣管氣相、胸膜凹陷征、空泡征毛、玻璃征、空洞和鈣化表現(xiàn)兩者是相似的[6]。癌細(xì)胞分化程度與抗原抗體反應(yīng)中Ki67抗原陽性的檢出率呈負(fù)相關(guān)。從本研究得出Ki67表達(dá)量與分葉征和毛刺征均有相關(guān)性，可能是Ki67和細(xì)胞增殖密不可分，是重要的調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的影響因子，表達(dá)的水平與肺癌的產(chǎn)生和發(fā)展緊密相連，可作為特殊的評(píng)價(jià)細(xì)胞增生增長(zhǎng)的判斷指標(biāo)。腫瘤的形成、發(fā)展、擴(kuò)大、分期、轉(zhuǎn)移及治療等與腫瘤標(biāo)志物p53、Ki67在多個(gè)方面有很明顯的關(guān)聯(lián)性，而與p53蛋白的表達(dá)強(qiáng)度之間呈一定的負(fù)相關(guān)的聯(lián)系。

周圍型肺癌臨床CT征象在一定程度上對(duì)腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)性指標(biāo)Ki67與p53進(jìn)行推測(cè)，隨著科技的發(fā)展，診療技術(shù)的不斷提高，會(huì)不斷解開CT肺癌征象與p53、Ki67的機(jī)制相關(guān)性，在未來有望指導(dǎo)臨床建立周圍型肺癌的個(gè)體化治療。

[1]胡輔裕.周圍型肺癌76例患者的CT表現(xiàn)與血清腫瘤標(biāo)記物及p53、Ki67的蛋白表達(dá)的相關(guān)性研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2014, 11(1)：30-32.

[2]李興榮.周圍型小肺癌X線與CT診斷方法臨床分析[J].海南醫(yī)學(xué),2011,22(19)：75-76.

[3]李軍華.12例肺大細(xì)胞癌的診斷與治療體會(huì)[J].海南醫(yī)學(xué),2010, 21(21)：75-76.

[4]孫 超.p53及耐藥相關(guān)基因的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌化療耐藥性的研究[J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(14)：45-48.

[5]朱剛明,李兆勇.局灶性機(jī)化性肺炎的多層螺旋CT診斷及與周圍型肺癌鑒別[J].臨床放射學(xué)雜志,2014,33(11)：1675-1679.

[6]諸志剛.低劑量多層螺旋CT肺癌檢出的影像學(xué)特點(diǎn)[J].臨床放射學(xué)雜志,2014,33(12)：1850-1854.

Correlations between CT signs and expression of Ki67,p53 in peripheral lung cancer.

SHI Li-hong,LI Hui-ju, XING Guo-feng.CT Room,Tangshan People's Hospital,Tangshan 063000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo explore the relationgships between CT signs and the expression of Ki67,p53 in peripheral lung cancer.MethodsSixty-eight patients of peripheral lung cancer who were confirmed by postoperative pathology from January 2013 and March 2014 in our hospital were enrolled in the study.All patients underwent 64-slice spiral CT scan or enhanced scan for the CT signs.The expressions of Ki67 and p53 in wax tissue of each patient were detected,and the relationships between CT signs and the expression of Ki67,p53 were explored.ResultsPatients with spinous protuberant sign had higher proportion of p53 positive expression,with significant correlation(χ2=4.60,P=0.032),and patients with spicular sign had higher proportion of p53 and Ki67 positive expressions(χ2=5.49,P=0.001 9;χ2=4.27,P=0.039).Patients with ground-glass opacity had higher ratio of p53 negative(χ2=8.22,P=0.004),and those with lymph node metastasis signs had higher proportion of p53 positive(χ2=11.2,P=0.001).Patients with signs of lobulation had higher negative expression of Ki67(χ2=5.56，P=0.018).However,other CT signs showed no significant correlations with the expression of p53 and Ki67.ConclusionThe spinous protuberant sign,spicular sign,ground-glass opacity and lymph node metastasis sign are correlated with the expression of p53 and Ki67,which provides reference for the diagnosis of lung cancer.

Peripheral lung cancer;CT signs;Ki67;p53

R734.2

A

1003—6350（2015）11—1616—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.11.0578

2014-12-15)

史利紅。E-mail：shilihong1211@163.com