潰瘍性結腸炎患者血清IL-1β和IL-18的表達及臨床意義

唐月華王小平

潰瘍性結腸炎患者血清IL-1β和IL-18的表達及臨床意義

唐月華王小平

【摘要】目的檢測潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis，UC)患者血清白介素-1β(IL-1β)和白介素(IL-18)的變化，探討其在UC發生發展過程中的作用。方法活動期UC患者42例，緩解期UC患者20例和正常對照組10例。采用酶聯免疫吸附法(ELISA法)檢測IL-1β和IL-18的含量，評價含量與UC患者病情輕重程度之間的關系。結果活動期UC組患者血清IL-1β和IL-18含量顯著高于緩解期UC組患者和對照組(P＜0.05)，緩解期UC組患者與對照組比較，血清IL-1β和IL-18含量明顯升高(P＞0.05) ;血清IL-1β和IL-18含量活動期UC重型組高于中型和輕型組，與病情病情輕重程度均呈正相關(r值分別為0.623和0.588，P＜0.01)。結論活動期UC患者血清IL-1β和IL-18含量顯著升高，其可作為病情活動性、嚴重性及療效評價的參考指標。

【關鍵詞】結腸炎;潰瘍性;代謝;白介素-1β;白介素-18

作者單位: 211300江蘇省南京市高淳人民醫院消化科

近年來，隨著人民生活水平的提高，潰瘍性結腸炎(ulcerative cditis，UC)發病率有明顯上升的趨勢。雖然UC的發病機制至今尚未完全明了，但是越來越多的證據顯示UC的發生是多因素共同作用的結果［1］，其中，免疫炎癥損傷是其重要發病機制之一。有研究發現NLRP3炎性小體可調節白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)的分泌，其免疫調節作用參與多種炎癥疾病［2，3］。然而有IL-1β和IL-18在UC患者中的研究不多，尤其在疾病過程中其含量比例以及功能的動態變化尚不清楚。本研究檢測UC活動期和緩解期IL-1β和IL-18的變化，評價其在UC病情活動性與嚴重性中的臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇我院2013年6月至2014年6月收住院治療的UC患者62例，其中活動性患者42例，男22例，女20例;年齡30～61歲，平均年齡(45±3)歲。緩解期患者20例，男12例，女8例;年齡29～60歲，平均年齡(48±4)歲。診斷及臨床分度符合中華醫學會消化病分化炎癥性腸病學科組制定的診斷指南。均排除近期急慢性感染性疾病，自身免疫性疾病，腫瘤性疾病，慢性纖維化增生性疾病和播散性血管內凝血，并均未接受任何免疫抑制劑治療［4］。采用Rachmilewitz UC臨床活動指數評估系統(CAI評分)［5］，評價病情活動性:≥4分活動性，＜4分為緩解期。同期選擇健康志愿者10例(正常組)，男5例，女5例;年齡29～62歲，平均年齡(46±5)歲。3組一般資料具有均衡性。

1.2方法

1.2.1標本收集: UC患者和健康對照者均在清晨空腹抽靜脈血5 ml，離心后取其血清，立即放置于－20℃冰箱中保存待檢。檢測前血清自然融化，期間不曾凍融。

1.2.2主要儀器與試劑: LC2129冰箱，海爾; KDC-2044低速冷凍離心機，北京醫用離心機廠; FJ 22003/2008PS全自動γ放射免疫計數器，西安核儀器廠; IL-1β、和IL-18放射免疫分析試劑盒購自福州邁新生物有限公司。

1.2.3血清IL-1β和IL-18的測定:采用放射免疫分析法，試劑盒購自福州邁新生物有限公司，嚴格按照說明書進行操作。使用西安核儀器廠生產的FJ22003/2008PS型全自動γ放射免疫計數器進行放射性測定。

1.3統計學分析應用SPSS 18.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，相關分析采用Permang和Spman等級相關法，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.13組IL-1β和IL-18水平比較活動期UC組患者血IL-1β和IL-18高于緩解期UC組和正常組(P＜0.01)，與正常組相比，緩解期UC組IL-1β、和IL-18含量升高(P＜0.05)。見表1。

表1　3組IL-1β和IL-18水平比較　pg/ml，±s

表1　3組IL-1β和IL-18水平比較　pg/ml，±s

注:與正常組比較，*P＜0.05;與緩解期UC組比較，#P＜0.05

組別　IL-1βIL-18正常組(n=10)0.18±0.22　0.26±0.12緩解期UC組(n=20)　0.24±0.32*　0.32±0.25*活動期UC組(n=42)　1.32±0.34* #　2.60±0.32*#

2.2活動期UC患者IL1β、和IL18與病情嚴重性的關系活動期UC患者IL-1β和IL-18在病情重型組和中型組中明顯高于輕型組(P＜0.05)。在病情重型組UC患者與中型組相比，IL-1β和IL-18含量明顯升高(P＜0.05)。活動期UC患者IL-1β與病情嚴重性呈正相關(r=0.623，P＜0.05)，活動期UC組患者IL-18與病情嚴重性呈正相關(r=0.588，P＜0.05)。見表2。

表2　活動期UC患者IL-1β和IL-18與病情的關系pg/ml，±s

表2　活動期UC患者IL-1β和IL-18與病情的關系pg/ml，±s

注:與輕型組比較，*P＜0.05;與中型組比較，#P＜0.05

組別　IL-1βIL-18輕型組(n=15)0.38±0.12　0.16±0.04中型組(n=12)　0.58±0.54*　1.60±0.32*重型組(n=15)　1.58±0.54* #　2.80±0.32*#

3　討論

UC是一種主要累及直腸的非特異性炎性疾病，腸道局部炎性損傷是其重要病理改變，以大量炎性細胞浸潤腸壁和持續活化為特征［6，7］。評價UC的活動性和嚴重性，是制定正確治療方案和評估預后所必須臨床上測評價UC治療過程需要客觀指標來評價病情的活動性，嚴重性，然而目前缺乏一些簡單實用，客觀敏感的評價指標。近年的研究發現。內源性信號，即損傷相關分子模式(damage associated molecularpattern，DAMPs)，從而啟動固有免疫的應答［2，3］。多種因素(如高血壓，代謝，免疫，感染，藥物等異常等)均可以導致腸道損傷，引起NLRP3炎性小體的激活，NLRP3激活caspase-1，caspase-1可以成功地促進IL-1β、IL-18的成熟及分泌。

IL-1β主要由單核巨噬細胞產生，但幾乎所有有核細胞在受到外界抗原刺激后均可合成與分泌IL-1β。UC組織中生成的大量IL-1β，可激活T淋巴細胞和B淋巴細胞，從而上調免疫功能。同時，IL-1β可促進IL-2受體表達。IL-2作為一種重要的細胞因子與T淋巴細胞、B淋巴細胞、單核細胞表面的IL-2受體結合后，能引起T淋巴細胞活化、增殖，促進B淋巴細胞分泌抗原，促進細胞毒T細胞的殺傷作用，增強NK細胞活性等。IL-1β可促進其他炎性細胞因子表達，并協同作用，促進中性粒細胞浸潤［8］。更重要的是，IL-1β促使中性粒細胞和巨噬細胞活化及脫顆粒，促進炎性細胞釋放前列腺素、血栓素、血小板活化因子等，增加上皮細胞和內皮細胞的通透性。這些因素均使腸黏膜炎癥加重，黏膜充血、水腫、屏障功能減弱，引起腸道細菌移位，有利于炎性始動因子的作用［9］。本研究表明，血清中IL-1含量高低與UC患者病情輕重和病變累及的范圍有關，提示血清中IL-1的含量可作為觀察UC患者病情的發展和判斷預后的重要指標之一。

IL-18又名干擾素-γ誘生因子，是由Arifa等［10］從中毒性休克小鼠肝臟中克隆而得到的一種應激誘生蛋白。IL-18主要由巨噬細胞樣細胞產生，研究表明，其由非活性的前體形式合成，經IL-1β轉化酶轉化為成熟的IL-18而發揮生物活性，IL-18具有促進IL-1和GM-CSF產生、誘導Th1細胞產生IFN-γ、誘導TNF-α和多種趨化因子的基因表達與蛋白質合成等多種生物學功能，還作為炎癥前細胞因子(preinflammation cytokine)，參與多種免疫性疾病的發生［11］。從UC患者的腸黏膜中可檢測到IL-18 mRNA的表達，且IL-18陽性細胞主要集中于固有層單個核細胞(尤其是巨噬細胞、樹突狀細胞)和腸上皮細胞;分泌IL-18的細胞呈彌漫性分布，主要位于潰瘍底部、黏膜表面、隱窩膿腫中［12］。本研究表明，血清中IL-18含量高低與UC患者病情輕重和病變累及的范圍有關，其可作為觀察UC患者病情發展和判斷預后的重要指標之一。

本研究結果表明活動期UC患者IL-1β和IL-18變化可作為評價病情活動性與嚴重性的良好指標，有助于判斷臨床治療效果，評價預后。

參考文獻

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10Arifa RD，Madeira MF，de Paula TP，et al.Inflammasome activation is reactive oxygen species dependent and mediates irinotecan-induced mucositis through IL-1β and IL-18 in mice.Am J Pathol，2014，184: 2023-2034.

11Esper L，Utsch L，Soriani FM，et al.Regulatory effects of IL-18 on cytokine profiles and development of myocarditis during Trypanosoma cruzi infection.Microbes Infect，2014，16: 481-490.

12Dinarello CA，Novick D，Kim S，et al.Interleukin-18 and IL-18 binding protein.Front Immunol，2013，4: 289.

(收稿日期:2014－12－21)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.10.031

【文章編號】1002－7386(2015) 10－1534－02

【文獻標識碼】A

【中圖分類號】R 574.621