不同抗凝劑對血氨檢測結果的影響

摘要：目的 探討肝素和EDTA抗凝血對血氨的檢測結果是否存在差異。方法 選取2013年1月～9月在大連醫科大學附屬第二醫院就診的患者90例根據血氨參考范圍入選病例分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三組，每組30例，分別采其靜脈血約3 ml，注入肝素抗凝、EDTA抗凝兩種不同真空采集管中，經離心分離后即提取血漿用干化學法進行血氨值測定并計算均值和差值，進行統計學分析，比較兩組均數差別有無統計學意義，采用t檢驗。結果 Ⅰ組肝素抗凝血值為（22.23±6.19）μmol/L，EDTA抗凝血值為（40.5±15.68）μmol/L，兩組相比較t=5.94，P<0.01；Ⅱ組肝素抗凝血值為（50.79±13.68）μmol/L，EDTA抗凝血值為（74.35±20.9）μmol/L，兩組相比較，t=5.17，P<0.01；Ⅲ組肝素抗凝血值為（121.59±24.72）μmol/L，EDTA抗凝血值為（156.83±21.82）μmol/L，兩組相比較，t=5.85，P<0.01。結論 不同血樣采集管對干化學法血氨測定結果有一定影響，肝素抗凝組的測定結果低于EDTA抗凝組，有顯著性差異（P<0.01）。由于本實驗還受到環境溫度、標本放置時間等因素的影響，而肝素的穩定性較高。因此，為提高測定結果的準確性，建議臨床血氨測定使用肝素抗凝真空管采集標本。

關鍵詞：血氨測定；抗凝劑；肝素；EDTA

Abstract：Objective To study the heparin and EDTA anticoagulant blood for blood ammonia detection results whether there are differences. Methods According to blood ammonia reference range selected cases into Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ three groups，each group of 30 patients， 90 patients. Respectively adopt its venous blood about 3 ml， inject heparin anticoagulation， EDTA anticoagulation two different vacuum acquisition tube， the centrifugal separation namely after extraction plasma or serum with dry chemical method for blood ammonia value determination and calculation mean and difference， carries on the statistical analysis， and compared between the two groups have statistical significance difference mean， the t test. Results Ⅰgroup heparin anticoagulation group value was 22.23±6.19（μ mol/L）， EDTA anticoagulation group value was 40.5±15.68 （μ mol/L）， two groups of compared t = 5.94， P < 0.01； Ⅱ group heparin anticoagulation group value was 50.79±13.68 （μ mol/L）， EDTA anticoagulation group value was 74.35±20.9 （μ mol/L）， two groups of phase comparison， t= 5.17， P< 0.01； Ⅲ group heparin anticoagulation group value was 121.59±24.72 （μ mol/L），EDTA anticoagulation group value was 156.83±21.82 （μ mol/L）， two groups of phase comparison， t= 5.85， P< 0.01. Conclusion Different blood collection tube to dry chemical method blood ammonia determination results have a certain influence， heparin anticoagulation group of the determination results below EDTA anticoagulation group， there is significantly statistical difference （ P< 0.01）. Because of this experiment is influenced by environmental temperature， specimen placed time and so on factors， and the stability of the heparin higher. Therefore， in order to improve the veracity of test results， it is suggested that clinical blood ammonia determination using heparin anticoagulation vacuum tube specimen collection.

Key words：Ammonia determination； Anticoagulant； Heparin；EDTA

腦組織對氨的作用特別敏感，而人體中的氨主要是在肝臟合成尿素而解毒的，肝功能損傷時可引起明顯的血氨升高，進而引起腦功能的紊亂[1]，目前，血氨的測定越來越受到臨床的重視，同時血氨測定的準確性也逐漸受到大家的關注。選擇抗凝劑的標準是根據實驗項目而確定的，抗凝劑的性質不同，對血液成分的影響就不相同。因此需要根據檢驗的目的而做出適當的選擇，才能得到預想的結果[2]。本文旨在探討兩種抗凝劑（肝素、EDTA）對血氨的檢測結果是否有影響及影響程度，以便更好選取抗凝劑。

1資料與方法

1.1一般資料 選取2013年1月～9月在大連醫科大學附屬第二醫院就診的患者90例，其中男性47例，女性43例，年齡38～88歲，平均63歲，同時以肝素、EDTA真空抗凝管抽取標本，所有標本均排除溶血、乳糜和凝集等因素的影響。

1.2標本采集及處理 要求患者早晨空腹，抽取患者靜脈血分別注入真空肝素鋰抗凝管、EDTA-K2抗凝管各3 ml，采血后，顛倒混勻5～10次后立即送檢，血液離體后，隨著二氧化碳失去，通過酶反應蛋白和谷氨酰氨等化合物產氨，會使實驗結果偏高，因此樣品采集后盡快離心標本（3500 r/min，6 min），分離血漿，離心后標本不能溶血及血漿不能含有顆粒物，立即檢測。

1.3儀器和試劑 采用美國強生公司Vitros-350干式生化分析儀對血氨進行分析；試劑由積水醫療科技（中國）有限公司生產的含有EDTA-K2抗凝血的真空采血管、肝素鋰抗凝血的真空采血管。所有試劑都采用廠家原裝試劑及質控品，以求處于穩定狀態。所有結果均采用國家現行檢測標準進行判斷。

1.4統計學處理 所有計量數據用（x±s）表示，采用 SPSS 13.0 統計軟件統計分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

由于血氨的參考范圍為9～33 μmol/L，故將90例患者的檢測結果按照血氨的參考范圍分成三組（Ⅰ組：血氨值<33.00 μmol/L，Ⅱ組：血氨值33.00～80.00 μmol/L，Ⅲ組：血氨值>80.00 μmol/L），并分別求出差值，見表1。

三組2種方法血氨結果的比較：Ⅰ組肝素抗凝標本血氨值為（22.23±6.19）μmol/L，EDTA抗凝標本血氨值為（40.5±15.68）μmol/L；Ⅱ組肝素抗凝標本血氨值為（50.79±13.68）μmol/L時，EDTA抗凝標本血氨為（74.35±20.9）μmol/L；Ⅲ組肝素抗凝標本血氨值為（121.59±24.72）μmol/L時，EDTA抗凝標本血氨值為（156.83±21.82）μmol/L。肝素抗凝組與EDTA抗凝組比較，差異均有統計學顯著性意義（P<0.01），見表2、圖1。

3討論

血氨是由機體代謝產生的氨以及消化道吸收來的氨進入血液而形成的。正常情況下，氨在肝臟內代謝成為尿素，嚴重肝臟疾病時氨不能被清除而導致血氨的升高，所以其測定主要應用于肝昏迷等的檢測和處理[3]。另外，血氨測定對兒科診斷氏綜合癥非常有用，該征有嚴重低血糖、大塊肝壞死和急性肝衰竭并伴有肝脂肪變性，在肝酶譜增高前即可見到血氨的升高[4]，對診斷某些先天性代謝的紊亂如鳥氨酸循環的氨基酸代謝缺陷（高血氨）也很重要，它提供了一個準確的檢測結果，對臨床診斷和進一步明確病因有重大意義。

因為血中氨含量非常少，在標準狀況下1L水能溶解1176L氨，所以血氨的檢測對抗凝劑和環境有著嚴格的要求。

本次實驗中肝素抗凝組測定結果和EDTA抗凝組測定結果相比較低，一個重要原因是肝素是一種含硫酸基團的黏多糖，分子量約為1.5萬，屬于一種陰離子多聚電解質，和陽離子有不同的親和力。其抗凝的機制是和抗凝酶Ⅱ一起，在低濃度的情況下能夠抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，并且能夠使抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶的作用加強，進而阻止凝血酶的形成。另外，它還有抑制因子x和抑制凝血酶的自我催化的作用，因此對測定結果一般無影響[5]。臨床常用肝素鋰，雖其價格較貴，但抗凝效果較好。而EDTA的作用機制是通過與水相中的鈣離子形成穩定的螯合物而阻止血液凝固。通過不同的抗凝劑來獲得血漿標本，肝素鋰作為重要的抗凝劑在國外被廣泛地應用，而再國內多使用肝素鈉抗凝劑和EDTA-K2抗凝劑，與國外使用的有所不同[6]。

有研究表明，在20℃時，血氨濃度每小時約增加5.2 μmol/L[7]，如果血氨濃度在測定前已經發生變化，則易導致誤診、漏診。另外，標本放置時間越長，其血氨濃度越高。因此，血氨檢測中標本的前處理至關重要。標本放置時間越長或不及時分離血漿或血清易造成血氨結果的升高。同時，有文獻顯示[8-9]，某些藥物和患者的自身狀況也會改變體內氨的濃度。血氨測定結果的準確性在很大程度上取決于標本的收集和儲存，也因此常常造成測定的結果出現變動及在參考值上難以統一[10-11]。所以，在分析測試檢驗的標本之前需要進行質量控制，同時也希望臨床醫護人員引起重視，共同做好質量控制[12]。

由本次實驗結果可知，三組2種方法測得的數值比較，EDTA抗凝組結果普遍高于肝素抗凝組，且變化幅度也大小不一，數據變化亦不穩定。因此，為了保證血氨檢測結果的準確性，減少患者的誤診和漏診，血氨的標本很有必要使用能抑制其分解的抗凝劑，特別是那些標本量大而不能及時處理和檢測時更應該注意，肝素抗凝穩定性高，對測定結果影響不大，是血氨測定的首選抗凝劑。

參考文獻：

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[12]張波.重視檢驗前質量控制，進一步提高檢驗質量[J].國際檢驗醫學雜志，2008，29（2）：18.

編輯/肖慧