常州老年人載脂蛋白E基因型與膽囊結石病的相關性研究

崔文賢，陳桂金

（常州市第七人民醫院檢驗科，江蘇常州213011）

常州老年人載脂蛋白E基因型與膽囊結石病的相關性研究

崔文賢，陳桂金

（常州市第七人民醫院檢驗科，江蘇常州213011）

載脂蛋白E是機體內最主要的載脂蛋白，具有遺傳上的多態性［1，2］。在分析膽囊結石的研究中發現載脂蛋白E基因多態性與膽囊結石具有一定的相關性［3，4］。本研究對2010年2月至2014年2月期間診治的120例膽囊結石患者進行分析，采用聚合酶鏈式反應－限制性片段長度多態性分析患者載脂蛋白E基因型與膽囊結石的相關性，并分析不同載脂蛋白E基因型與患者血脂水平的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對本院2010年2月至2014年2月期間診治的膽囊結石患者進行分析。120例患者男性67例，女性53例，年齡51－69歲，平均（58.7±6.9）歲。所有膽囊結石患者均經過手術證實。排除標準：糖尿病、高脂血癥、肥胖、心腦血管疾病及肝腎功能異常和惡性腫瘤患者。以同期健康體檢者120例為對照組。兩組一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 儀器與試劑

PCR擴增儀購自美國BIO－RAD公司；凝膠成像儀購自美國BIO－RAD公司；離心機購自德國Eppendorf公司；HhaI限制性內切酶購自TAKARA公司；引物由上海生物工程公司合成；其余試劑為市售分析純。

1.3 聚合酶鏈式反應－限制性片段長度多態性分析

DNA提取試劑盒購自北京天根生物有限公司。PCR擴增引物序列：F－5’－TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA－3’，R－5’－ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC－3’。擴增程序：95℃－5 min；94℃－30s，63℃－30s，72℃－30s，30個循環；72℃延伸5min。PCR產物經瓊脂糖凝膠電泳純化后用HhaI限制性內切酶酶切，分析酶切片段。

1.4 血清脂蛋白分析

高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、總膽固醇和甘油三酯檢測試劑盒購自南京建成生物工程中心。所有的檢測過程均按照說明書進行操作。

1.5 統計學分析

統計數據采用SPSS19.0處理。計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較采用單因素方差分析。P＜0.05認為具有統計學差異性。

2 結果

2.1 膽囊結石患者載脂蛋白E基因型頻率分析

在對膽囊結石患者載脂蛋白E基因型頻率分析時發現膽結石組患者E3／4基因型頻率明顯高于健康對照組，有明顯的統計學意義（P＜0.05），而其余基因型頻率在兩組之間無統計學差異性（P＞0.05），見表1。

表1 膽囊結石患者載脂蛋白E基因型頻率分析

2.2 膽囊結石患者載脂蛋白E等位基因頻率分析

在對膽囊結石患者載脂蛋白E等位基因頻率分析時發現E4基因型頻率明顯高于E2和E3等位基因頻率，具有顯著的統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 膽囊結石患者載脂蛋白E等位基因頻率分析

2.3 不同載脂蛋白E基因型與血清脂蛋白水平相關性分析

分析不同載脂蛋白E基因型與血清脂蛋白水平相關性發現E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明顯低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、總膽固醇和甘油三酯水平明顯高于其他基因型患者（P＜0.05，P＜0.01），見表3。

表3 不同載脂蛋白E基因型與血清脂蛋白水平相關性分析

3 討論

載脂蛋白E主要在肝臟細胞內合成，且其基因在人類體內具有多態性。載脂蛋白E可能通過調節機體內血脂水平參與了膽結石的發病過程。本研究在對常州老年人載脂蛋白E基因型與膽囊結石病的相關性進行研究時發現膽結石組患者E3／4基因型頻率明顯高于健康對照組，且膽結石組患者的E4基因型頻率明顯高于E2和E3等位基因頻率；E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明顯低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、總膽固醇和甘油三酯水平明顯高于其他基因型患者。因此，載脂蛋白E3／4基因型與膽囊結石發病密切相關，且E4等位基因可能是膽結石發生的易感因子。

載脂蛋白及血脂的異常與膽囊功能及膽結石密切相關［5，6］。在分析載脂蛋白B基因EcoRI多態性與膽石癥關系的相關性研究中發現波蘭人群中載脂蛋白B基因與膽結石的發病密切相關，且其等位基因E－／－是膽結石的保護因子［7］。在對異常黑膽質與載脂蛋白E基因多態性的關聯分析中也發現載脂蛋白E多態性位點rs405509與異常黑膽質密切相關［8］。分析載脂蛋白B基因XbaI多態性與膽石癥相關性的研究中也證實亞洲人群中膽結石的發病與載脂蛋白B基因Xbal多態性密切相關，且X＋是膽結石獨立的危險因素［9］。本文在對膽囊結石患者載脂蛋白E基因型頻率分析時發現膽結石組患者E3／4基因型頻率明顯高于健康對照組，且兩組之間有明顯的統計學意義，而其余基因型頻率在兩組之間無統計學差異性，表明載脂蛋白E多態性也與本地區膽囊結石患者的發病相關。

載脂蛋白是機體內最主要的載脂蛋白，且與膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的代謝過程相關。本文在分析不同載脂蛋白E基因型與血清脂蛋白水平相關性時也發現E3／4基因型患者血清中高密度脂蛋白明顯低于其他基因型患者，而低密度脂蛋白、總膽固醇和甘油三酯水平明顯高于其他基因型患者，表明E3／4基因型可能是通過調節血脂水平異常參與了膽結石的發病過程。在對血脂水平與膽囊結石發病關系的研究中也發現血糖及血脂水平異常是慢性膽囊炎合并膽結石發病的重要原因，且可以作為疾病診斷和嚴重性判斷的重要指標［10］。

因此，載脂蛋白E3／4基因型與膽囊結石發病密切相關，且E4等位基因可能是膽結石發生的易感因子。

［1］王秀云，耿立軒，張 超，等.人性化護理在改善急診膽結石患者心理及疼痛中的應用價值［J］.世界華人消化雜志，2015，21（13）：2149.

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［3］李榮年，楊 光，王長淼.血清脂類、載脂蛋白指標異常與膽囊膽固醇結石病例對照分析［J］.中國誤診學雜志，2011，8（10）：2305.

［4］羅家柱，梁倩花.膽囊膽固醇結石患者血脂、脂蛋白、載脂蛋白水平及相關性研究［J］.中國醫藥科學，2011，11（20）：64.

［5］范培云，羅 瑋，姚勇利.阿托伐他汀對糖尿病合并膽囊結石者脂代謝的影響［J］.現代預防醫學，2011，9（4）：767.

［6］李前春，鐘立明.血脂與膽囊結石的相關性分析［J］.安徽醫藥，2015，8（5）：937.

［7］冀 軍，劉 揚.載脂蛋白B基因EcoRI多態性與膽石癥關系的相關性評價［J］.臨床醫藥實踐，2014，10（3）：173.

［8］拉扎提·鞏沙哈提，冷愛枝，劉建波，等.異常黑膽質與載脂蛋白E基因多態性的關聯分析［J］.新疆醫科大學學報，2014，8（6）：672.

［9］劉照國，劉 雷，盧海明，等.載脂蛋白B基因XbaI多態性與膽石癥關系的Meta分析［J］.中國普通外科雜志，2013，12（8）：1011.

［10］陳子廣.血糖、血脂水平與膽囊結石發病的關系分析［J］.醫學理論與實踐，2015，10（7）：910.

2015－03－29）

1007－4287（2015）10－1775－03