探討乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關性

摘要：目的 探討乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關性，為臨床治療乙型肝炎提供參考。方法 采用熒光定量法對我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量進行測定，同時采用ELISA法進行兩對半指標的檢測，對比分析檢測結果。結果 125例HBV-DNA呈陽性，占52.08%；115例HBV-DNA呈陰性，占47.92%。定量為5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。125例HBV-DNA陽性標本中，小二陽14例陽性，小三陽35例陽性，大三陽76例陽性。結論 HBeAg與HBV-DNA拷貝數呈正相關性，為臨床制定合理的乙肝治療方案提供了依據，有利于抑制乙肝病毒的傳染。

關鍵詞：乙肝；兩對半模式；DNA定量；相關性

乙型肝炎是目前我國主要傳染病之一，可引起慢性、急性遷移性肝炎或肝癌。我國是乙肝高發區，相關調查結果顯示，我國乙肝病毒感染人群高達10%左右[1]。乙肝兩對半檢測是臨床診斷乙型肝炎最常用的指標，可對人體乙肝病毒的免疫反應狀態進行反映。HBV-DNA是衡量乙肝傳染性最精確的手段，是確定乙肝病毒感染不同復制狀態的重要方法，HBV-DNA陽性顯示病毒具有傳染性[2]。為探究乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關性，為制定合理治療方案提供科學依據，我院對2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量及兩對半指標進行檢測，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者的臨床資料，排除標準：合并有嚴重心腦血管疾病患者；有精神病遺傳史或家族史患者；無法進行良性溝通的患者。入選資料中男130例，女110例；年齡24～69歲，平均年齡（38.5±1.9）歲。患者對本研究均知情，并簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1血液采集 抽取患者早晨空腹肘靜脈血液5ml，室溫放置2h 3000r/m離心10min，吸取血清-20℃保存。避免反復凍融。

1.2.2 HBV-DNA含量檢測 采用熒光定量PCR法對患者血清標本HBV-DNA含量進行檢測，采用STRATAGENEMx3000P熒光定量PCR儀。采用FQ-PCR法對HBV-DNA進行定量分析，試劑由廈門安普利生物工程有限公司提供，小于5×102IU/ml為陰性（-），超過5×102IU/ml為陽性（+）。

1.2.3兩對半檢測 采用酶聯免疫吸附試驗對患者血清兩對半模式進行檢測，試劑由英科新創（廈門）科技有限公司提供。所有檢測均嚴格按照說明書進行，實驗室設備及操作均嚴格按照衛生部頒發的實驗室工作規范要求進行，以確保檢測的準確性及符合度。

2 結果

2.1 HBV-DNA定量檢測結果 240例疑似乙型肝炎患者血清標本中，125例HBV-DNA呈陽性，占52.08%；115例HBV-DNA呈陰性，占47.92%。定量5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。

2.2 HBV-DNA定量與乙肝兩對半模式的關系 結果顯示，HBV血清標志物為陽性模式中，均存在不同程度的病毒復制，125例HBV-DNA陽性標本中，小二陽14例陽性，小三陽35例陽性，大三陽76例陽性，見表1。

3 討論

乙肝兩對半是臨床最常見的乙肝病毒感染檢測標志物，乙型肝炎病毒免疫學標志共有三對，分別為表面抗原和表面抗體、e抗原和e抗體、核心抗原和核心抗體[3]。表面抗原是人體已經感染病毒的標志，無法反映病毒有無復制、復制程度及傳染性強弱等情況；表面抗體是中和性抗體標志，同時是是否有抵抗力及是否康復的主要標志；e抗原為病毒復制標志，持續陽性3個月則有慢性化傾向；e抗體是病毒復制停止的標志，標志著病毒復制減少，傳染性較弱；核心抗體是曾經感染或正在感染都可出現的標志，對于輔助兩對半檢查具有重要意義[4]。乙肝兩對半又被稱為乙肝五項，其檢查意義在于探究乙肝感染的具體情況。

乙肝病毒DNA是判斷乙肝病毒有無復制的黃金指標，其主要用來判斷體內乙肝病毒含量及傳染程度，HBV-DAN含量越高則表示病毒復制能力越強、傳染性越強。

FQ-PCR是進行基因診斷的有效手段，采用全封閉管進行檢測，不需進行PCR處理，有效避免了較差污染。實時檢測技術的采用，使所得原始模板數量呈線性相關，定量準確率較高。國外研究成果表明，FQ-PCR不僅具有普通PCR的靈敏度，由于熒光探針的應用，可通過廣電傳統對PCR擴增過程中的熒光信號進行直接探測，因此，該方式還具有光譜高精確性及DNA雜交的高特異性，并在極大程度上客服了PCR的眾多缺陷，可用于臨床疾病的早期病原體快速診斷、病情及預后評估，并可對治療效果及遺傳性疾病、腫瘤等進行診斷。ELISA檢測法檢測乙肝兩對半是臨床診斷乙肝病毒感染的傳統手段，它可反應人體對乙肝病毒的免疫反應狀態。ELISA是檢測乙肝兩對半的有效方法，FA-PCR可準確反應HBV-DNA復制水平變化，有利于病情變化及治療效果的觀察。

本研究中，大三陽乙肝病毒陽性率高于小二陽及小三陽患者，與前人研究成果一致。部分HBeAg陽性患者仍存在HBV-DNA為陰性的情況，可能與HBV-DNA的消失比HBeAg消失早或病毒發生變異。小三陽、小二陽HBV-DNA陽性率雖低于大三陽，但仍存在HBV-DNA陽性，提示病毒并未停止復制，只是在一定程度上減緩了復制速度，可能與HBV發生前，病毒基因發生突變或機體發生特異性免疫耐受有關。特異性免疫耐受性的突變在極大程度上引起HBeAg分泌，但對病毒本身的復制不產生影響。在HBeAg為陰性的模式中，部分樣本HBV-DNA濃度較高，可見，乙肝患者血液循環中HBV-DNA與HBeAg具有相關性。本研究表明，HBeAg陽性標本通暢存在較高濃度HBV-DNA，HBeAg陰性組HBV-DNA濃度較低，經推理可得HBeAg與HBV-DNA拷貝數呈正相關性。

綜上所述，乙肝兩對半及HBV-DNA術基層醫療機構常規檢查項目，乙肝兩隊邊可充分反映乙肝患者的病情狀況，HBV-DNA檢測則可對乙肝病毒是否存在傳染性進行判斷，HBeAg與HBV-DNA拷貝數呈正相關性，為臨床制定合理治療乙肝方案提供了依據。對疑似乙肝病毒攜帶者可定期進行HBV-DNA的檢測，以確定其是否存在傳染性，從而從根源上抑制乙肝病毒的傳染。

參考文獻：

[1]于永歌，佟靜，陳瑩潔.乙型肝炎病毒與HBV-DNA定量的相關性分析[J].中外健康文摘，2014，20：186-187.

[2]孫翠平.乙肝兩對半與HBV-DNA復制的臨床對比以及聯系[J].中國保健營養（中旬刊），2013，3：590-591.

[3]彭宇生.乙肝病毒外膜大蛋白檢測在診斷乙型病毒性肝炎中的臨床意義[J].中國保健營養（中旬刊），2013，1：402-402.

[4]曾蕓珠，歐陽少燕.乙肝兩對半模式與乙肝病毒DNA定量的相關性分析[J].醫學信息，2013，28：240-240.編輯/成森