放射免疫法和酶聯免疫法檢測人血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價的效果

史冠宇

摘要：目的對于人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價的檢測，分別采用放射免疫法、酶聯免疫法，并對兩種方法的檢測效果進行比較。方法研究對象為來自國家臨檢中心乙肝表面抗體質控品2份，來自中國生物制品檢定所提供的線性參比品的國家標準品3份。分別采用放射免疫法、酶聯免疫法對其血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價進行檢測，并對兩種方法的檢測效果進行比較。結果對于中國生物制品檢定所提供的3份參比品、國家臨檢中心2份質控品乙肝表面抗體效價的檢測，分別采用放射免疫法、酶聯免疫法的檢測效果無明顯差異，P>0.05，差異無統計學意義，樣本濃度值相關性良好，相關系數r均大于0.95;對于1-400號高抗血漿、401-800號低抗血漿、801-1000號普通血漿乙肝表面抗體效價的檢測，分別采用放射免疫法、酶聯免疫法的檢測效果無明顯差異，P>0.05，差異無統計學意義，樣本濃度值相關性良好，相關系數r均大于0.95。結論對于人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價的檢測，采用酶聯免疫法不但檢驗成本低、操作簡單快捷，而且特異性強、準確度高，對血液制品行業乙免原料血漿乙型肝炎病毒表面抗體效價的篩查具有重要的意義，非常值得推廣和應用。關鍵詞：酶聯免疫法;放射免疫法;乙肝表面抗體效價

酶聯免疫吸附劑測定法，簡稱酶聯免疫法，或者ELISA法。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合，然后通過顯色來檢測。放射免疫法是利用同位素標記的與未標記的抗原，同抗體發生競爭性抑制反應的方法，研究機體對抗原物質反應的發生、發展和轉化規律。本文分析了采用酶聯免疫法和放射免疫法對人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價進行檢測的效果。以下是我的報道：1材料與方法1.1樣品材料研究對象為來自國家臨檢中心乙肝表面抗體質控品2份，來自中國生物制品檢定所提供的線性參比品的國家標準品3份。?1.2儀器和試劑盒抗-HBs免疫球蛋白國家標準品，標示濃度值為2.5lU/支（批號20041001）。北京萬泰生物藥業有限公司表面抗體酶聯免疫定量檢測試劑盒（批號R20110503），線性范圍和正常參考范圍分別為10-300mlU/ml，0-10mlU/ml。放免r測量儀（上海原子核研究所四環儀器廠生產），放射免疫法試劑盒（北京北方生物技術研究所提供），表面抗體放射免疫定量檢測試劑盒（批號：110620），線性范圍和正常參考范圍分別為0-1000mlU/ml、0-10mlU/ml。?1.3統計學方法選取SPSS13.0軟件，對數據進行統計分析。計數資料采用t檢驗。差異明顯具有統計學意義（P<0.05）。2結果對于中國生物制品檢定所提供的3份參比品、國家臨檢中心2份質控品乙肝表面抗體效價的檢測，分別采用放射免疫法、酶聯免疫法的檢測效果無明顯差異，P>0.05，差異無統計學意義，樣本濃度值相關性良好，相關系數r均大于0.95;對于1-400號高抗血漿、401-800號低抗血漿、801-1000號普通血漿乙肝表面抗體效價的檢測，分別采用放射免疫法、酶聯免疫法的檢測效果無明顯差異，P>0.05，差異無統計學意義，樣本濃度值相關性良好，相關系數r均大于0.95。3討論采用放射免疫法對人體血漿中乙型肝炎病毒表面抗體效價進行檢測，不但費時、復雜，而且一次無法進行大量樣品檢測。酶聯免疫吸附劑測定法，簡稱酶聯免疫法，或者ELISA法。本文研究了酶聯免疫法對乙型肝炎病毒表面抗體效價的檢測，其基本原理是使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性;使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體②酶標記的抗原或抗體③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。采用酶聯免疫法不但檢驗成本低、操作簡單快捷，而且特異性強、準確度高。參考文獻[1]許麗楓，張效林.酶聯免疫法和膠體金法對乙肝病毒表面抗原檢測的對比分析[J].疑難病雜志，2010，04：257.?[2]胡曉.乳膠層析法與酶聯免疫法測定乙肝病毒標志物的相關性分析[J].浙江預防醫學，2010，05：92-93.?[3]劉秀琴，傅杭州，張曉俐.化學發光微粒子免疫分析法與酶聯免疫法測定乙肝表面抗原的比較[J].海南醫學，2010，08：104-105.?[4]孔慶飛，班立芳，王勇鳴.酶聯免疫法和發光免疫法測定乙肝病毒標志物比較[J].中國現代醫生，2010，09：65-67.