梁 錚,柏彩英,羅婭莎,張 文,藍(lán) 鍇,李苗苗,周 強(qiáng)△(.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院, 廣州 500;.廣東省婦幼保健院檢驗(yàn)科,廣州 5000;.廣東醫(yī)學(xué)院,廣州 5808)
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·論 著·
MALDI-TOF-MS技術(shù)快速鑒定臨床酵母樣真菌的應(yīng)用評(píng)價(jià)*
梁 錚1,柏彩英2,羅婭莎1,張 文1,藍(lán) 鍇1,李苗苗3,周 強(qiáng)1△(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院, 廣州 510120;2.廣東省婦幼保健院檢驗(yàn)科,廣州 510010;3.廣東醫(yī)學(xué)院,廣州 523808)
目的 評(píng)價(jià)基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)在快速鑒定臨床分離的酵母樣真菌中的應(yīng)用價(jià)值。方法 收集臨床分離的酵母樣真菌135株,分別用VITEK MS、API20C和CHROMargar顯色培養(yǎng)同時(shí)進(jìn)行鑒定與比較,χ2檢驗(yàn)分析VITEK MS和API及顯色培養(yǎng)基鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確率,以真菌內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)基因測(cè)序作為鑒定結(jié)果的金標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)比較各種方法在臨床使用中的優(yōu)缺點(diǎn)。結(jié)果 VITEK MS、API20C和顯色培養(yǎng)基鑒定的準(zhǔn)確率分別為98.5%(133/135)、78.5%(106/135)、59.3%(80/135),經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=51.996,P<0.05)。結(jié)論 MALDI-TOF-MS可將酵母樣真菌快速、準(zhǔn)確地鑒定到種。
酵母樣真菌; MALDI-TOF-MS質(zhì)譜分析; ITS基因測(cè)序
近年來(lái),深部真菌感染發(fā)生率和病死率在逐年增加[1],其中以白色假絲酵母為主,其他酵母菌樣真菌也頻繁被檢出。傳統(tǒng)的真菌鑒定方法主要有CHROMagar顯色培養(yǎng)基和生化鑒定系統(tǒng)如API20C、全自動(dòng)微生物鑒定儀Vitek、Microscan及Biolog鑒定系統(tǒng)等,這些檢測(cè)需較長(zhǎng)周期和較高成本,難以鑒定不常見或生化反應(yīng)相近的真菌;分子學(xué)鑒定方法(如熒光雜交和PCR)快速、準(zhǔn)確,但對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求較高,難進(jìn)行推廣。基質(zhì)輔助激光解析/電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜分析(MALDI-TOF-MS)是應(yīng)用于病原微生物快速檢測(cè)的一項(xiàng)新技術(shù),不同的病原菌經(jīng)MALDI-TOF-MS檢測(cè)可以形成特異性的指紋圖譜,將待測(cè)病原菌的質(zhì)譜圖與已有質(zhì)譜圖庫(kù)進(jìn)行比較,即可確定病原菌種屬,擁有快速、穩(wěn)定、重復(fù)性好等特點(diǎn),本文將探討法國(guó)生物梅里埃VITEK MS質(zhì)譜儀在臨床酵母樣真菌快速鑒定中的應(yīng)用價(jià)值。……