運用PCR技術對豆奶粉、奶粉與果汁飲料中的有效成分的鑒定研究

陳竹英 陳海梅

摘 要：采納PCR特有的技術，對慣常見到的食品，辨識有效成分。擬定的檢定食品，包含奶粉豆奶、各類果汁飲品。加工得來的多樣食品，抽取某一樣本，檢定這種片段。食品特有的基因片段，涵蓋牛線粒體、大豆之中的凝聚素、植物特性的葉綠體、真核生物以內的核糖體。經由提煉得來樣本之中的DNA，經過接續的純化及檢定，辨別出樣本的特性。鑒定數值表征著：PCR關涉的檢定技術，檢定得來的數值一致，帶有凸顯的穩定特性，且可被重復。

關鍵詞：PCR技術 豆奶粉 奶粉 果汁飲料 有效成分鑒定

中圖分類號：J605 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2015）02（c）-0022-01

加工食材特有的原料，成分偏復雜；通常經由加熱，蛋白質變更固有的屬性，體系架構內的生物酶也失活。加熱制備出來的食品，無法擬定明晰的檢定標準。PCR檢定關涉的對象，被設定成DNA。在各時段的加熱之中，脫氧核酸特有的物質，仍舊能夠存留。為此，PCR這一檢定途徑，不受選出來的原料限制，適宜深加工。單一及二重范疇內的這種擴增，把擴增得來的產物，當成可辨識的分子標記。這樣做，就創設了食品真偽特有的判別技術。生物學框架以內的食品鑒定，能為后續時段的市場管控，提供有序指引。

1 概要的測定流程

1.1 檢定必備試樣

選出來的待測試樣，包含某品牌特有的豆奶粉、豆漿濃縮得來的晶體、某規格下的燕麥片、某品牌特有的精品奶、帶有陽性特性的精品牛肉。選出來的待測飲品，包含某品牌制備的菜汁飲料、果汁特性的類似飲料、非果汁特性的飲品。在這之中，大豆被設定成陽性特性的植物材料。預備好的多重樣本，都從超市購得。

檢定必備儀器，包含臺式架構下的離心機、帶有梯度特性的PCR儀器、某規格下的電泳儀、凝膠特性的成像儀、核酸蛋白特性的分析儀。DNA特有的聚合酶、試驗必備緩沖液，都來自區域范疇內的某生物公司。

1.2 提煉得來脫氧核酸

稱量得來100 mg特有的奶粉及豆奶，安放于某規格下的離心管。添加進來的TE液體，應合乎預設的規格，以及酸堿度。經過漩渦混合，調勻這種液體，并添加牛奶。添加390 μL制備好的裂解液、580 μL酚特有的混合物，經過調和及振蕩，混合均勻。離心1 0min后，取出累積的沉淀，再去添加420 μL預備好的氯化鈉。經由偏高溫度態勢下的溶解，振蕩以后靜止。經由乙醇清洗，然后予以干燥。

2 單一框架內的PCR擴增

2.1 脫氧核酸特有的片段

18Sr特性的片段，也即DNA提煉出來的片段，查驗了它的擴增狀態。提取得來的這種DNA，經由體系架構中的蛋白分析儀，在預設的濃度之間，達到了擬定好的反應要求。液體測定出來的質量濃度，為每微升1190 ng。真核生物攜帶著的內源基因，PCR檢定得來的電泳結果，表征著這一規律：除去非果汁特性的添加飲品以外，篩選出來的一切液體，都測定成陽性。空白對照得來的結論，是陰性的。這就代表著，提煉出來的DNA，適宜擬定的PCR反應。

2.2 牛源特性的檢定

樣本之中的牛源成分，經由單一架構內的檢定，凸顯了這一結論：空白對照及關涉的陰性對照，牛肉都帶有明晰的目的條帶。豆奶粉特性的篩選制品，能擴增至帶有牛源特性的這種條帶。因此，豆奶粉范疇以內的飲品，是涵蓋牛源這一成分的。豆漿晶并不帶有牛源特性的擬定條帶，因此豆漿晶沒能含有明晰的牛源成分。

2.3 辨識大豆成分

樣本特有的大豆成分，單一檢定得來的結果，被歸類成內源特性的PCR檢定。凝聚素特有的這種基因，也能經由預設的流程，予以檢定出來。陰性對照、接續的空白對照，都沒能發覺條帶；然而，陽性對照卻發覺了目的條帶。選出來的大豆樣本，包含多重品牌范疇內的豆奶、同廠家制備出來的豆漿晶。這樣的物質，都含有大豆。

2.4 飲品特有的片段測定

飲品之中的片段，包含rbcL特性的片段。植物內源范疇中的葉綠體，基因片段查驗得來的多重產物，電泳檢定關涉的結論表征著：異丙醇濃縮得來的樣本、帶有超濃縮特性的類似橙汁，測定出來的結果，都凸顯了陽性。空白對照獲取到的這一樣本，都沒能凸顯明晰的DNA。除此以外，沒能經由濃縮的、CTAB提煉制備而成的這種野菜汁、某品牌制備的綠茶、鮮橙多這樣的飲品，包含了偏低態勢下的葉綠體，很難測定出精準范疇內的rbcL。

超濃縮特有的鮮橙汁，不用經由異丙醇的接續濃縮，就能予以提取。鮮橙汁固有的葉綠體，數目還是偏多的，可以經由后續的擴增，得到合乎規格的片段。非果汁特性的篩選飲料中，并不帶有葉綠體特性的脫氧核酸，沒能擴增得到這一片段。

3 二重框架內的PCR測定

3.1 辨識牛源成分

DNA特性的片段之中，涵蓋18Sr范疇中的片段。二重檢定得來的數值表明，空白對照沒能發覺條帶，陰性對照拓展出來的條帶，僅僅延展至預設的18Sr。牛源特性的目的條帶，也沒能凸顯出來。陽性比對特有的擴增，拓展直至牛源特性的給定條帶。豆漿晶并不帶有牛奶這一成分，因此比對得來的終結結果，等同單一架構下的PCR測定。

3.2 未來時段的檢測進展

多重架構內的PCR，帶有迅捷的特性及靈敏層級很高的優勢。二重檢定特有的價值，是查驗rbcL特性的基因，是否潛藏在食物以內。若從擬定好的樣本之中，提煉得來這一范疇的DNA，則可防控假陰性這一虛假結果，保障測定出來的數值精準。

未來時段中，采納單一特性的、二重特性的這種PCR方式，應著力提升原有的精準性。從現狀看，篩選出來的樣本類別，還并不足夠。深加工得來的食品類別，也仍舊偏少。樣本預設的提煉條件、PCR范疇以內的反應條件，都應接著去優化。針對細分出來的多樣類別食物，應當擬定植物源關涉的成分檢定。行業應當預設可用的統一指標，嚴抓平日以內的質量把關。

4 結語

二重及單一架構下的PCR檢定，能夠辨識加工食品以內的牛成分、帶有植物源特性的多重分子。PCR協同下的檢測流程，凸顯了快捷及靈敏這樣的獨有優勢，且帶有明晰的特異性。檢定得來的樣本結果，都帶有同一特性，能夠予以重復。二重檢測特有的目的，是經由片段提煉及檢定，判別樣品這樣的DNA，有序規避假陰性。然而，鑒定選出來的樣品類別，還是帶有局限的；果汁飲品提煉得來的類別，也是偏少的。應當經由接續的提煉及優化，辨識豆奶及果汁涵蓋著的主體成分，以便拓展檢定范圍。

參考文獻

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