針對PEDV的運輸車輛消毒方法效果比較

朱秀高（武漢回盛生物科技有限公司，湖北武漢430042）

回盛“豬醫生”專欄

針對PEDV的運輸車輛消毒方法效果比較

朱秀高
（武漢回盛生物科技有限公司，湖北武漢430042）

摘要：豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PDEV）引起的，其在豬群內部和豬群之間的傳播往往由運輸車輛的污染引起，本文用4個試驗分別評估了時間和溫度、消毒劑Staloan F粉、Accel消毒劑、清洗+消毒+熱輔助干燥和凈化（TADD）對被PDEV污染的運輸車輛的消毒效果，發現對運輸車輛加熱至71℃持續10分鐘或于20℃（室溫）至少7天均可有效地殺滅PEDV；Stalosan F消毒粉不能有效地殺滅PDEV；Accel消毒劑在不同病毒含量下均可有效地殺滅PEDV；清洗+消毒+TADD也可有效地殺滅PDEV。

關鍵詞：豬流行性腹瀉病毒；運輸車輛；消毒

1971年，豬流行性腹瀉（PED）在英格蘭的育肥豬群中被首次發現，豬流行性腹瀉病毒（PEDV）的病原在1978年被分離確認。從20世紀70年代到80年代，該病毒在歐洲其他地區快速傳播，造成了豬只嚴重的腹瀉與養豬業巨大的經濟損失。目前PEDV是歐洲的一種地方性病原，但并未引起大范圍的發病。亞洲一些地區在1982年首次發現該病后，就一直沒有停止。2013年5月，美國首次在豬群中發現了PEDV，病毒導致母豬和仔豬出現了嚴重的腹瀉，并造成美國全境感染仔豬近乎100%的死亡。基因分析顯示引起美國豬群發病的病毒與中國分離株的同源性接近99%，但目前還不能確定病毒是如何進入美國的。

盡管病毒進入美國的途徑還不明確，但目前已經知道受PEDV污染的運輸車輛往往是PED在豬群內部和豬群之間傳播的源頭，具有極大的傳播風險，這與對其他病毒如高致病性豬藍耳病病毒（PRRSV）和豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）傳播途徑的認識是一致的。過去，運輸工具這一潛在傳播風險的消除需要通過一系列措施，包括清洗、消毒以及熱輔助干燥和凈化（TADD）等。根據對TGEV的控制效果，這些措施應該對與其結構相似的PEDV具有非常好的消毒效果，可以用于被PEDV污染車輛的消毒。

1　試驗設計

2013—2014年，共進行了4次不同的試驗，以分別評價不同的車輛消毒方法。試驗一主要測定了殺滅糞便中PEDV所需要的時間和溫度；試驗二對消毒劑Staloan F粉（施立安）殺滅糞便中PEDV的效果進行了評估；試驗三測定了Accel消毒劑殺滅糞便中PEDV的效果（為測定沒有進行車輛清潔時消毒劑的消毒效果，在進行試驗一和試驗三時沒有清除設備上的糞便）；試驗四評估了多種車輛消毒方法，其中包括清洗、消毒和TADD。

1.1試驗一

本試驗設計了8對不同時間和溫度的處理組合。將5 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機散布在面積為15.24 cm×15.24 cm×2.54 cm的鋁盤底面（類似于運輸車輛的底盤）。然后按照表1的設計進行處理，處理后將糞便用10 mL生理鹽水稀釋并重新收集，再灌胃感染4周齡大小的PEDV陰性仔豬，灌服后觀察仔豬有無出現腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態，每個處理組內含4個重復。試驗結果見表1。

表1　試驗一各組的處理方式及效果

1.2試驗二

本試驗中設置了三個不同的處理組：Stalosan F消毒粉（施立安）組、陽性對照組和陰性對照組。將5 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機散布在面積為15.24 cm×15.24 cm ×2.54 cm鋁盤底面（類似于運輸車輛的底盤）。處理過程中，陰性對照組和陽性對照組用密閉的罩子覆蓋，以防止與Stalosan F消毒粉接觸。把撒布樣品后的鋁盤放在商業運豬車的底面和兩側，將Stalosan F消毒粉用電動噴粉器按81 g/㎡的標準噴灑在整個車廂內，1小時后將鋁盤從車廂內取出置于20℃（室溫），然后用10 mL緩沖液沖洗稀釋糞便并收集，其中4 mL做他用，剩下約6～8 mL灌服給4周齡大小的PEDV陰性仔豬，每頭豬對應一個鋁盤。灌服后觀察仔豬有無出現腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態，每個處理組內含8個重復。試驗結果見表2。

表2　試驗二各組的處理方式及結果

1.3試驗三

本試驗根據糞便污染程度（輕Vs重）和消毒劑濃度（1∶16 vs 1∶32）不同設置了6個處理組。將5 mL或10 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機散布在面積為15.24 cm× 15.24 cm×2.54 cm鋁盤底面（類似于運輸車輛的底盤）。然后按表3的設計對各處理組用Accel消毒劑進行處理，再用10 mL緩沖液稀釋并回收糞便，給4周齡大小的PEDV陰性仔豬灌服。灌服后觀察仔豬有無出現腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3—7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態，每個處理組內含4個重復。試驗結果見表3。

1.4試驗四

本試驗中設置了9個不同的處理組。每個處理組中均用10 mL未稀釋的PEDV陽性糞便樣品（陰性對照組用陰性糞便樣品）隨機散布在面積為15.24 cm×15.24 cm× 2.54 cm鋁盤底面（類似于運輸車輛的底盤）。然后將鋁盤按不同組合的TADD程序進行處理。再用10 mL緩沖液稀釋并回收糞便，給4周齡大小的PEDV陰性仔豬灌服。灌服后觀察仔豬有無出現腹瀉的臨床癥狀，并采集感染后3～7天的糞便拭子，用RT-PCR檢測PEDV的感染狀態，每個處理組內含4個重復。試驗結果見表4。

表3　試驗三各組的處理方式及結果

表4　試驗4內各組的處理方式及結果

1.5試驗結果

試驗一中，71C-10M和20C-7D組均能100%殺滅PEDV病毒，與陽性對照組相比差異顯著；試驗二中，Stalosan F處理組與陽性對照組相比沒有顯著性差異；試驗三和試驗四中，所有處理組均能100%殺滅PEDV，與陽性對照組相比差異顯著。

2　討論

根據上述結果，對運輸車輛加熱至71℃持續10分鐘或于20℃（室溫）至少7天均可有效殺滅PEDV。

此外，消毒劑Accel在不同病毒含量下均可有效殺滅PEDV；而Stalosan F消毒粉不能完全殺死糞便中的PEDV。這提示我們針對不同的環境條件，需要選擇合適的消毒劑。消毒劑的廣譜性不僅體現在它們的抗菌譜廣，更為重要的是它們的理化特性復雜，這些特性包括液體、粉劑和不同的泡沫質量等。對消毒劑來說抗菌譜活性非常重要，但這些理化特性更重要，因為這些特性能夠影響它們的應用范圍和在不同條件下的消毒效果。試驗四的結果顯示出一個完整的車輛消毒措施的重要性，它包括沖洗、消毒和最后的烘干（干燥），在這一試驗中，所有處理組均能有效殺滅PEDV。此外，值得注意的是，一般來說，溫度在車輛進行沖洗和消毒后對殺滅病毒非常重要，而在試驗一中，溫度的作用并不十分明顯。

中圖分類號：S851.34+7.6

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4645(2015)03-0073-03

收稿時間：2015-03-09