梨輪紋病原菌及生防菌對梨果實抗氧化酶體系的影響

張麗麗　常有宏　陳志誼等

摘要[目的]了解梨果實接種梨輪紋病原菌后的防御機制和生防菌的酶活作用機理。[方法]采用不同處理在梨果實上接種梨輪紋病原菌和噴施生防菌，測定其對梨果實抗氧化酶體系的影響。[結果]丙二醛（MDA）：生防菌處理對MDA含量變化影響不大，輪紋菌處理MDA含量48 h達到高峰值，為10.22 nmol/g，是對照的1.86倍，輪紋菌+生防菌處理MDA含量24 h達到高峰值，為8.92 nmol/g，是對照的1.62倍；超氧物歧化酶（SOD）：生防菌處理的SOD酶活值48 h達到高峰，為126.69 U/[g（FW）·min]，是對照的1.54倍，輪紋菌與輪紋菌+生防菌處理均在24 h出現活性高峰，酶活值分別為122.10和135.32 U/[g（FW）·min]，是對照的1.48和1.65倍；過氧化物酶（POD）：生防菌、輪紋菌、輪紋菌+生防菌處理的POD酶活均在24 h達到高峰值，分別為385.34、342.50、290.00 U/[g（FW）·min]，為對照的1.83、1.62、1.38倍；過氧化氫酶（CAT）：生防菌、輪紋菌、輪紋菌+生防菌處理的CAT酶活在6 h時均達到高峰值，分別為133.33、114.17和113.35 U/[g（FW）·min]，為對照的1.33、1.14和1.13倍；多酚氧化酶（PPO）：生防菌處理和對照差異不明顯，輪紋菌處理酶活高峰出現在12 h，為81.86 U/[g（FW）·min]，為對照的1.76倍，輪紋菌+生防菌處理酶活高峰出現在24 h，為70.00 U/[g（FW）·min]，為對照的1.50倍。[結論]輪紋菌和輪紋菌+生防菌對MDA含量影響較大；輪紋菌及生防菌都能激發SOD酶活性的升高；接種輪紋菌及噴施生防菌都能激發POD酶活性的升高；輪紋菌及生防菌都能激發CAT酶活的升高；單獨施用生防菌效果不明顯，輪紋菌更能激發PPO酶活性的升高。

關鍵詞梨輪紋病原菌；生防菌；抗氧化酶

中圖分類號S436.612文獻標識碼

A文章編號0517-6611（2015）07-096-03

Effects of Botryosphaeria berengeriana f.sp. piricola and Biocontrol Bacteria on the System of Antioxidant Enzymes in Pears

ZHANG Li-li1，2， CHANG You-hong2， CHEN Zhi-yi3 et al （1. Agro-technical Station of Xiangcheng Agricultural Bureau of Suzhou City， Suzhou， Jiangsu 215000； 2. Institute of Horticulture， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences， Nanjing， Jiangsu 210014； 3. Institute of Plant Protection， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences， Nanjing， Jiangsu 210014）

Abstract [Objective] The aim was to understand defense mechanism of pear after inoculated Botryosphaeria berengeriana f.sp. piricola and mechanism of antioxidant enzymes of biocontrol bacteria. [Method] Pears were treated by Botryosphaeria berengeriana f.sp. piricola and biocontrol bacteria， and the change of antioxidant enzymes were determined. [Result] The biocontrol bacteria had little effect on MDA； the content of MDA treated by B. berengeriana reached high peak in 48 h， was 10.22 nmol/g which was 1.86 times of CK； the content of MDA treated by B. berengeriana and biocontrol bacteria reached high peak in 24 h， was 8.92 nmol/g which was 1.62 times of CK. The content of SOD treated by biocontrol bacteria reached high peak in 48 h， was 126.69 U/[g（FW）·min] which was 1.54 times of CK； the contents of SOD treated by B. berengeriana as well as B. berengeriana and biocontrol bacteria reached high peak in 24 h， were 122.10 and 135.32 U/[g（FW）·min] which were 1.48 and 1.65 times of CK respectively； the contents of POD on biocontrol bacteria treatment， B. berengeriana treatment as well as B. berengeriana and biocontrol bacteria treatment reached high peak in 24 h， were 385.34， 342.50 and 290.00 U/[g（FW）·min] which were 1.83， 1.62 and 1.38 times of CK respectively. The contents of CAT on biocontrol bacteria treatment， B. berengeriana treatment as well as B. berengeriana and biocontrol bacteria treatment reached high peak in 6 h， were 133.33， 114.17 and 113.35 U/[g（FW）·min] which were 1.33， 1.14 and 1.13 times of CK respectively. The biocontrol bacteria had little difference in CK； the content of PPO of B. berengeriana treatment reached high peak in 12 h， was 81.86 U/[g（FW）·min] which was 1.86 times of CK； B. berengeriana and biocontrol bacteria treatment reached high peak in 24 h， was 70.00 U/[g（FW）·min] which was 1.50 times of CK. [Conclusion] B. berengeriana and biocontrol bacteria had more effect on MDA； both B. berengeriana and biocontrol bacteria could increase the excitation of SOD enzyme activity； both B. berengeriana and biocontrol bacteria could increase the excitation of POD enzyme activity； both B. berengeriana and biocontrol bacteria could increase the excitation of CAT enzyme activity； using biocontrol bacteria alone had more effect on PPO， B. berengeriana could increase the excitation of PPO enzyme activity.

由圖4可知，4個處理的CAT酶活曲線基本上呈先上升后下降的趨勢，在6 h時均達到酶活高峰值，其中S處理酶活值最高為133.33 U/[g（FW）·min]，為對照處理的1.33倍，但隨后CAT的酶活迅速下降，到24 h達到最低點，此后酶活值又再次上升。L與L+S處理則基本上無明顯差異，6 h時的CAT酶活性峰值分別為114.17和113.35 U/[g（FW）·min]，分別為對照處理的1.14和1.13倍。綜合表明，S、L、L+S處理對CAT酶活值的影響高于對照處理，說明輪紋菌及生防菌都能激發CAT酶活的升高，但與對照處理相比較，3個處理對CAT的酶活影響幅度相對較小。

圖2梨果實不同處理后SOD活性的變化

圖3梨果實不同處理后POD活性的變化

圖4梨果實不同處理后CAT活性的變化

2.3PPO活性變化

PPO是酚類物質物質氧化的主要酶，參與植物體內酚類物質氧化產生醌類和參與木質素的合成，以殺死和抑制病原菌的繁殖而起到抗病作用[9]。

由圖5可知，4個處理的PPO酶活曲線基本呈先上升后下降趨勢，CK、S、L+S處理的PPO酶活曲線高峰出現在24 h，而L處理的酶活曲線高峰出現在12 h。CK和S處理之間的差異水平不明顯，到48 h時酶活值與對照處理基本趨于同一水平。L處理的酶活高峰值為81.86 U/[g（FW）·min]，為對照處理的1.76倍，此后下降，到48 h時和L+S處理趨于同一水平，L+S處理的酶活高峰值為70.00 U/[g（FW）·min]，為對照處理的1.50倍。綜合看來，S處理對PPO酶活影響效果不很明顯，L、L+S處理對PPO酶活值的影響高于對照處理，說明接種輪紋菌更能激發PPO酶活性的升高。

圖5梨果實不同處理后PPO活性的變化

3討論

植物受病原菌侵染或誘導處理后，與抗病反應密切相關的保護性酶活性升高是誘導抗性產生的重要機制之一，其中PPO、SOD、POD和CAT是存在于植物體內與抵抗病原微生物侵染有關的重要酶[10]。在MDA含量測定中，生防菌處理與對照差異不大，而接種輪紋菌和輪紋菌+生防菌處理對MDA含量變化明顯，說明輪紋菌對MDA含量影響較大，從另一角度也說明生防菌對植物組織未起到破壞性作用，而接種輪紋菌對細胞結構的破壞較大，活性氧積累較多。此外，輪紋菌處理到48 h MDA含量上升到最高，可能是因為輪紋菌仍在擴展直至完全破壞。在SOD酶活測定中，輪紋菌+生防菌處理的SOD酶活性表現最高，說明輪紋菌和生防菌共同作用對SOD酶活影響最大，而生防菌處理SOD酶活值到48 h達最高點，分析原因可能為生防菌對SOD酶活誘導較慢，而之后是否繼續呈上升趨勢有待進一步研究驗證。在POD酶活測定中，輪紋菌+生防菌處理24 h 時低于輪紋菌和生防菌處理，分析原因可能為生防菌對輪紋菌的擴展起到了抑制作用。在CAT酶活測定中，CAT酶活變化趨勢與張林青等[10]得出的結論不一致，張林青等研究得出白腐病菌侵染2個大蒜品種后CAT酶活低于對照組，具體原因有待研究。

該研究得出單獨噴施生防菌后對梨果實的抗氧化酶體系會有不同程度的影響，可能是因為生防菌可以誘導抗氧化酶活性的升高，使得梨果實提前啟動防御系統來抵御進一步的侵害。而接種輪紋菌后噴施生防菌對抗氧化酶也產生了相應的影響，但從酶活變化角度與單獨使用生防菌及輪紋菌的比較來看，并不能完全說明生防菌對輪紋病原菌的抑制作用。事實上，生防細菌對植物病原物的抑制通常并非某一機制的單獨發揮，而更多的是2種或2種以上抑菌機制協同作用的結果[11]。

安徽農業科學2015年

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