不同類型鄉村井水中總大腸菌群的研究

郭華　李海燕　胡偉

摘要[目的] 掌握宜賓市翠屏區農村地區居民飲用水的水質狀況。[方法] 用多管發酵法測定田間井水、草叢井水、果林井水、魚塘井水以及山泉井水等5類井水中的總大腸菌群含量。[結果] 5類井水中總大腸菌群含量均不能達到國家飲用水標準（≤3個/L）；每類井水中總大腸菌群的含量差距較大；井水中總大腸菌群的含量從大到小排序為：田間井水 > 魚塘井水 > 果林井水 > 草叢井水 > 山泉井水。[結論] 該研究可為翠屏區鄉村群眾的飲用水安全提供指導。

關鍵詞井水；飲用水安全；總大腸菌群

中圖分類號X172；S273.4文獻標識碼A文章編號0517-6611（2015）07-220-02

Study on Total Coliforms in Different Kinds of Rural Well Water

GUO Hua1， LI Hai-yan1， HU Wei2*

（1. Yibin Environmental Monitoring Center， Yibin， Sichuan 644000； 2. Cuiping Region Environmental Station of Yibin City， Yibin， Sichuan 644000）

Abstract[Objective] To obtain drinking water quality status in villeges of Cuiping District. [Method] Total coliforms in 5 kinds of rural well water， such as field wells， brushwood well， orchard well， fishpond well and mountain spring well are detected with the multiple-tube fermentation technique to master the quality situation of the residents drinking water in rural areas of Cuiping District. [Result] None of the total coliforms in five kinds of well water reach the notional drinking water standard of no more than 3 per L.Large content of total coliforms in different kinds of well water are revealed. The content of total coliforms in well water ordered from lowest to highest revealed to be： field well water > ponds well water > orchard well water > brushwood well water > spring well water. [Conclusion] The study can provide guidance for drinking water safety of villages in Cuiping District.

Key wordsWell water； Safety of drinking water； Total coliforms

近年來，國家對環保不斷加強重視，更加關注人民的居住、生活環境，特別對散居的鄉村地區的生活用水也給予了高度重視。總大腸菌群對人體健康是有害的，它是用來間接反映水體污染狀況的一個重要指標。總大腸菌群是需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性的無芽孢桿菌，它能在37 ℃ 48 h內發酵乳糖產酸產氣，包括埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、腸桿菌屬以及克雷伯菌屬等細菌。總大腸菌群廣泛分布于天然水體環境中，不論是地表水或地下水，甚至雨水或雪水，都可能含有總大腸菌群。未經處理，直接飲用這樣的水會危害人們的身體健康。

當水體受到人畜糞便、生活污水或某些工業廢水污染時，水中的總大腸菌群會大量增加。因此，水的細菌學檢測，特別是總大腸菌群的檢測，在環境質量評價、環境衛生監督等方面具有重大的意義，例如了解農村居民飲用水的水質狀況[1-2]。翠屏區位于四川盆地南緣，地勢呈南北兩翼高而中部低，總體由西向東傾斜，由于特殊的地貌地勢，境內鄉村居民多為散居方式。由于集中供水成本高，境內鄉村居民多取用井水作為生活用水，水中有害微生物超標的現象較為普遍。鄉村居民常在田間、草叢中、果林中、魚塘附近以及山體低洼處等環境打井，也常忽略了井水的衛生狀況。為了掌握該區農村地區居民用水的水質狀況，筆者定期測定這5類井水中的總大腸菌群含量，以期為該區鄉村群眾的飲用水安全提供指導。

1材料與方法

1.1試驗儀器

冷藏柜（SC-308C型，河南新飛）、霉菌培養箱（MJ-250-II型，上海齊欣科學儀器有限公司）、高倍顯微鏡（DM500型，LEICA）。

1.2試驗藥品

乳糖蛋白胨：青島高科園海博生物技術有限公司；品紅亞硫酸鈉瓊脂培養基：北京三藥科技開發公司。

1.3培養基的制備

單倍乳糖蛋白胨培養基：將乳糖蛋白胨用蒸餾水配制成23 mg/ml濃度的溶液，然后取10 ml于試管中（內含倒管），最后于115 ℃高壓滅菌20 min，用于總大腸菌群的培養。

三倍乳糖蛋白胨培養基：稱取乳糖蛋白胨用蒸餾水配制成69 mg/ml濃度的溶液，然后取5 ml于試管中（內含倒管），最后于115 ℃高壓滅菌20 min，用于總大腸菌群的培養。

品紅亞硫酸鈉培養基：稱取42 g品紅亞硫酸鈉于1 L蒸餾水中，加熱溶解后于115 ℃高壓滅菌20 min，最后倒入無菌培養皿中待其凝固。

1.4試驗方法

1.4.1采樣。

分別從翠屏區具有代表性的代家村、方家溝、梨子坳、蒼水巖、塘彎等5個村社各選取4個采樣點（記為1#、2#、3#、4#）來代表田間井水、草叢井水、果園井水、山泉井水、魚塘井水，從井中采取水樣檢測總大腸菌群。

1.4.2總大腸菌群的測定。

將水樣稀釋10倍后取10 ml加入5個裝有5 ml三倍濃縮乳糖蛋白胨培養液的試管中（內有倒管），再取1 ml上述稀釋后的水樣加入5個裝有10 ml單倍乳糖蛋白胨培養液的試劑管中（內有倒管），最后將上述稀釋水樣再稀釋10倍，取1 ml加入5個裝有10 ml單倍

乳糖蛋白胨培養液的試管中（內有倒管），將各管充分混勻，置于37 ℃恒溫箱培養24 h。

待培養24 h后，發酵試管顏色變黃為產酸，小玻璃倒管內有氣泡為產氣。將產酸產氣及只產酸發酵管，分別用接種環劃線接種于品紅亞硫酸鈉培養基，置37 ℃恒溫箱內培養18～24 h，挑選符合特征的菌群，取菌落的一小部分進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。若涂片鏡檢的菌落為革蘭氏陰性無芽胞的桿菌，則挑選該菌落的另一部分接種于普通濃度乳糖蛋白胨培養液中（內有倒管），每管可接種分離自同一初發酵管的最典型菌落1～3個，然后置于37 ℃恒溫箱中培養24 h，有產酸產氣者，即證實有大腸菌群菌存在。根據證實有大腸菌群存在的陽性管（瓶）數查表得到MPN值（公式（1）），報告每升水樣中的大腸菌群數[3]。

MPN值=MPN指數×10（ml）接種量最大的一管（ml）（1）

2結果與分析

2.1田間井水中總大腸菌群含量的測定

由于水田區域水量比較充足，田間空地成為挖井較好的選址。該類型井中的井水多由田水通過泥土滲透而來，由于泥土具有吸附、遲滯作用使得水中部分總大腸菌群被土壤過濾掉。同時農村散養的雞、鴨、鵝等禽畜排泄的糞便會進入田間，另外農業生產時所施的農家肥中也含有大量的總大腸菌群。因而測定田間井水中總大腸菌群的含量是十分必要的。田間井水中總大腸菌群含量的測定結果如圖1所示。

圖1田間井水中總大腸菌群的測定結果

由圖1可知，該地區田間井水中總大腸菌群的含量差異較大，從3 100～4 900個/L，雖然低于其他地區的16 000個/L[4]，但均嚴重超過國家飲用水標準的最大值3個/L[5]。通過對該地區生活用水現狀的調查，發現該地區禽畜養殖有一定規模，另外農家肥施用量較大，這些對田間井水中總大腸菌群含量的超標均有較大貢獻。

2.2草叢井水中總大腸菌群含量的測定

由于草叢根系比較發達，有松土作用，孔隙較多的土壤吸水作用較好，因此在草叢中挖井也是一種較好的選擇。由于衛生意識不強，多數村民沒有在井口加蓋，使得落葉雜草較易掉入井里。水中的落葉雜草等生物質腐爛后經過一系列的生物化學作用，在適當的溫度下，會滋生大量的總大腸菌群。草叢井水中總大腸菌群含量的測定結果如圖2所示。

圖2草叢井水中總大腸菌群的測定結果

與圖1田間井水中總大腸菌群含量的測定結果相比，可以看出草叢井水中總大腸菌群含量相對較低，總體在1 300～1 700 個/L之間，這是由于這類井水受農業生產活動影響較小，草叢對井水也具有一定的遮蔽作用。由圖2還可以看出，草叢井水中總大腸菌群含量比較均勻。

2.3果林水井中總大腸菌群的測定

果林間土壤含水量也較為豐沛，但同時受農業生產活動影響的機率也較高，例如定期給果木的施肥以及水果的腐爛，都會滋生大量的總大腸菌群。這類井水即便通過土壤的過濾，井水中的總大腸菌群含量也時常超標。果林水井中總大腸菌群含量的測定結果如圖3所示。

圖3果林井水中總大腸菌群的測定結果

由圖3可知，果林井水中總大腸菌群含量差異不大，維持在2 100～2 600 個/L之間。由于果林中的土壤較為緊實，果木間的間距相對均勻，土壤對總大腸菌群的過濾作用不大。

2.4魚塘水井中總大腸菌群的測定

在魚塘附近選址挖井，水井離魚塘有一段距離，然而魚類養殖過程中會產生大量的廢棄物，如魚類排泄物、未被利用的青草飼料經過一段時間后都可能帶有大量的總大腸菌群。魚塘井水中總大腸菌群的測定結果如圖4所示。

圖4魚塘水井中總大腸菌群的測定結果

由圖4可知，魚塘水井中總大腸菌群的含量在4 200～4 600個/L之間，略低于田間井水中的含量，這是由于這兩類水井所處的環境相似。

2.5山泉井水中總大腸菌群的測定

山泉井水是鄉村居民

生活用水最佳的選擇，這類山泉水主要從山體低洼處浸出。

山泉井水中總大腸菌群含量的測定結果如圖5所示。

圖5山泉井水中總大腸菌群的測定結果

由圖5可知，山泉井水中的總大腸菌群的含量是這5類井水中總大腸菌群含量中最低的，但仍高于500 個/L，這是因為這類水井大多未加蓋，雨水直接或經土壤過濾進入水井的過程中帶入了大量的總大腸菌群。

3結論

通過對田間井水、草叢井水、果林井水、魚塘井水以及山泉井水等5類井水中總大腸菌群進行測定，結果發現，這5類井水中總大腸菌群均不能達到國家飲用水總大腸菌群標

準（≤3個/L）；每類井水中總大腸菌群的含量差距較大；這5類井水中總大腸菌群的含量按從大到小的順序排序為：田間井水>魚塘井水>果林井水>草叢井水>山泉井水。

4 建議

鄉村居民對生活用水的重視程度不高，因此根據現實條件對鄉村居民生活用水提出一些參考性建議：在有條件的鄉村采用集中供水，在沒有條件集中供水的鄉村，選擇遠離農業生產活動的地方打井的環境，同時將井盡量挖深；取水后用干凈的水缸加蓋儲存，并在澄清后經煮沸再飲用。

參考文獻

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