姚瑞英
血液儲存時間對紅細胞免疫功能的影響
姚瑞英
目的 探討血液儲存時間對紅細胞免疫功能的影響。方法 選擇無償獻血者標本60份作為研究對象,把該組標本與CPD(枸櫞酸鹽—磷酸鹽—萄葡糖血液保養液,Citrate Phosphate Dextrose)保養液進行充分混合,然后把混合液逐步封閉成3段,分別標記為A、B、C組,A組在采集后第1天、B組在第15天、C組在第30天,分析血液標本中RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8指標情況。結果 B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD 2個指標明顯低于A組,2組患者RBC-IC、IL-8這2個指標均明顯高于A組,差異有統計學意義(P<0.05)。C組患者的RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標低于B組,RBC-IC、IL-8這2個指標高于B組,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 血液儲存時間對紅細胞免疫功能有一定影響,時間延長,免疫功能下降,但是在臨床輸血治療過程中,需要注意的是臨床醫生應根據不同的輸血目的為患者選擇最佳血液,更能有效提高血站血液的利用價值。
血液儲存時間;紅細胞免疫功能;影響
輸血在臨床上已經成為一種對患者進行救治的常規手段,越來越多人也開始關注其安全性。通過不斷努力研究,經血液傳播的相關疾病已經得到很好的控制[1]。但是近些年來,有些研究結果表明,在給病危的患者輸注采集時間在2周以上的血液時,患者的死亡率會顯著增加,對于出現該現象的具體原因還沒有定論[2]。本文探討不同的血液儲存時間對紅細胞免疫功能的影響,分析兩者之間的關系,提高臨床用血的安全性,讓患者能夠輸注到更加安全的血液。在整個過程中,該研究采用的是隨機抽取本站采集的健康無償獻血者血液標本共60份,留取小樣,將其分為A、B、C 3組,A組在采集后第1天、B組在第15天、C組在第30天對血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8指標情況進行檢測,然后對檢測結果進行對比分析,總結不同的血液儲存時間對紅細胞免疫功能的影響,現報道如下。
1.1 一般資料 按照完全隨機的方法,選擇南陽市中心血站在2014年3月~2014年4月采集的無償獻血者血液標本60份作為研究對象,所有獻血者均符合相關獻血要求。把該組標本與CPD保養液進行充分混合,然后把混合液逐步封閉成3段,分別標記為A、B、C組。60例獻血對象中男41名,女19名;年齡19~36歲,平均年齡(28.0±1.4)歲;獻血對象的所有自然資料差異無統計學意義,具有可比性。
1.2 治療方法 所有標本均采用全自動生化儀(貝克曼庫爾特AU5800)進行分析。紅細胞C3b受體花環率實驗步驟:首先取0.1mL清滌紅細胞配制成1.5×107/mL濃度的紅細胞懸液。然后再用0.9%的生理鹽水把補體致敏酵母菌進行1次洗滌離心,配制呈l×108/mL濃度的懸液。兩種懸液配好以后,分別取50μL紅細胞懸液和50μl補體致敏酵母菌懸液,在試管內進行充分的混合,放置在水溫為37℃的恒溫水箱中,共30min。然后加100mL的生理鹽水進行稀釋。稀釋完成后加50mL0.25%戊二醛進行固定,做瑞氏染色。在高倍鏡下進行計數,一般計數200個紅細胞。在1個紅細胞上結合有2個或2個以上酵母菌的細胞為花環紅細胞。最后把RBC-C3b受體活性轉換算成結合百分率。RBC-SOD、RBC-IC的測定方法與RBC-C3b酵母花環實驗相同,僅僅需要用未致酵母菌替換致酵母菌。IL-8仿真實驗步驟:第1管內加0.2mL全血和0.2mL生理鹽水溶液,在第2管中進行充分混合,然后放置在37.2℃的恒溫水浴箱中60min,以2500轉/min進行離心,取出0.1mL的上清液,滴入放射免疫試劑盒中來測定IL-8。
1.3 觀察指標 觀察A、B、C 3組血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8情況。
1.4 統計學方法 本次實驗數據采用SPSS13.0軟件進行統計學分析,計量資料結果用“±s”表示,其中組間數據對比采用t檢驗;計數資料對比采用χ2檢驗;以P<0.05為差異有統計學意義。
3組血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8情況對比結果。B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標均明顯低于A組,2組患者RBC-IC、IL-8這2個指標均明顯高于A組,差異有統計學意義(P<0.05)。C組患者的RBC-C3b、RBCSOD這2個指標低于B組,RBC-IC、IL-8這2個指標高于B組,比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。
表1 第1、15、30天3組血液的4個指標情況(±s)

表1 第1、15、30天3組血液的4個指標情況(±s)
注:與A組比較,aP<0.05;與B組比較,aP<0.05
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紅細胞膜上粘附C3b分子能與未致敏的酵母菌形成RBC-IC花環。紅細胞膜上的C3b受體能與補體致敏的酵母菌形成RBC-C3bR花環。這兩種的花環率可以作為紅細胞免疫粘附功能的指標。如果RBC-IC花環率增高,而RBC-C3b受體花環率降低,則為繼發性免疫功能下降,是由于紅細胞粘附IC過多引起的。如這兩項指標都降低,則為原發性免疫功能低下,為紅細胞膜C3b受體受到破壞的。在臨床上,這兩項試驗可作為免疫性疾病療效和預后的檢測指標。隨儲存時間延長,RBC-IC水平不斷增加,這表明RBC的清除能力正在逐漸的減弱[3-5]。隨著儲存時間延長,C3b水平降低的現象表明紅細胞的CRI數量已經開始減少,導致其對病理循環免疫復合物的清除能力明顯減弱,且會導致補體過度活化的現象。SOD水平是反映機體內自由基含量的重要指標之一,其水平與自由基含量呈明顯負相關。對機體中的自由基清除干預對策、自由基代謝紊亂以及對判斷患者病程轉歸和動態監測具有重要參考價值。在血液中,IL-8是對紅細胞免疫反應程度進行評加的重要指標,主要是由于紅細胞膜上具有的許多廣譜趨化因子受體的配體;同時IL-8也是一種非常重要的白細胞趨化因子,可以引起一系列的炎癥反應[6-7]。本研究探討血液儲存時間對紅細胞免疫功能的影響中,B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標均明顯低于A組,RBC-IC、IL-8這2個指標均明顯高于A組,C組患者的RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標低于B組,RBC-IC、IL-8這2個指標高于B組相比有差異,與王怡涵[8]等人結論一致。說明儲存血的時間長短對紅細胞的免疫功能有一定影響。從傳統輸血發展至成分輸血,臨床醫生的輸血觀念也應該走出傳統輸血時代認識的誤區,個別醫生會認為凡有輸血指征者輸注“新鮮血”效果好。其實,所謂“新鮮血”只是一個相對的概念,它的含義應該隨輸血目的的不同而不同。例如,若輸血目的是糾正貧血特別是慢性貧血,解決患者的運氧力的不足,用保存期內任何一天的全血即可。單純糾正貧血使患者血紅蛋白升高,氧狀態改變,21天的為最好;若輸血目的是為了補充凝血因子,由于IL-8不穩定容易喪失活性,則應輸當天全血。因此,在臨床輸血過程中,需要注意的是臨床醫生應根據不同的輸血目的為患者選擇最佳血液。這樣不僅能達到最佳的治療效果,同時也能有效提高血站血液的利用率。
綜上所述,血液儲存時間對紅細胞免疫功能有一定影響,時間延長,免疫功能下降,但是在臨床輸血過程中,醫生應根據不同的輸血目的為患者選擇最佳血液,不僅有利于患者病情的緩解和治愈,也能有效提高血站血液的利用價值。
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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.11.044
河南 473000 南陽市中心血站檢驗科(姚瑞英)