半夏厚樸湯的機器煎煮工藝研究

陳愛娟 蔣斌 朱慧 王玳珠

半夏厚樸湯的機器煎煮工藝研究

陳愛娟 蔣斌 朱慧 王玳珠

目的 通過正交實驗設計，對YJD十功能自動煎藥機煎煮半夏厚樸湯的機器加壓煎煮工藝進行優化，以期為建立一般方劑的機器煎煮工藝的標準操作規程提供參考。方法 以和厚樸酚的含量及浸出物的含量為指標，通過單因素考察進行浸泡時間、煎煮時間、煎煮溫度三個因素水平的初選，再采用正交試驗優選半夏厚樸湯的機器加壓煎煮的最佳工藝。結果 最終確定半夏厚樸湯的機器煎煮最佳工藝為浸泡30min、煎煮溫度115℃、煎煮時間20min。結論 優化的機器煎煮工藝結果可靠，評價指標可控，對于規范機器煎煮工藝具有一定的意義。

煎藥機；半夏厚樸湯；煎煮工藝研究

中藥湯劑(又稱湯液)是中醫臨床治療疾病所用的主要劑型之一。傳統湯劑存在一些不足之處，如煎煮麻煩，服用、攜帶不便，易霉變、不能久貯等，因此在一定程度上制約了中藥湯劑的應用。中藥煎藥機的研制成功和推廣應用，給中藥湯劑專業煎煮的研究提供了一種新的思路。但中藥湯劑煎煮領域的國家標準缺失，評價中藥湯劑煎煮質量水平主要依據其口味、氣味、顏色等結合個人經驗進行評判，導致湯劑煎煮工藝不規范，煎煮質量的評價標準無法制定與實施[1-3]。半夏厚樸湯[4-6]出自張仲景《金匱要略》，由半夏、厚樸、茯苓、生姜、蘇葉組方，該方劑煎煮時不需要特殊處理，煎法簡單，實驗選擇厚樸中的有效成份和厚樸酚（新木脂素類）作為主要指標，再結合干浸膏的含量進行考察，篩選出半夏厚樸湯的機器煎煮的最佳工藝[7]，以期為中藥的機器煎煮工藝研究提供實驗基礎。

表1 飲片來源及批次

1 實驗器材

1．1 主要儀器設備 YJD-20GL型十功能自動煎藥機（北京東華原），Shimadzu LC-20AB高效液相色譜系統(日本島津公司，BS2242S電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司），RE-52旋轉蒸發儀（瑞士BUCHI公司），砂鍋，煤氣灶等。

1．2 藥材與試劑 和厚樸酚（730-8803，中國藥品生物制品檢定所），乙醇(南京化學試劑有限公司），磷酸(汕頭市西隴化工廠有限公司），甲醇(分析級，南京化學試劑有限公司），甲醇（色譜級，美國天地公司）。

處方所用的中藥飲片，均由蘇州天靈中藥飲片有限公司提供，飲片符合2010年版《中國藥典》各藥項下標準。飲片來源及批次見表1。

2 方法與結果[8-10]

2．1 半夏厚樸湯中和厚樸酚含量及浸出物測定方法的建立

2．1．1 色譜條件與系統適用性試驗 色譜柱：YMC-Pack c4 (250mm×4．6mm，5μm)(YMC Co．Ltd，Japan)；流動相：甲醇-0．1%磷酸水溶液(70∶30)；流速：1mL/min；檢測波長：254nm；柱溫：35℃；進樣量：10μL。

2．1．2 對照品溶液的制備 精密稱量干燥至恒定質量的和厚樸酚對照品0．6304mg，加甲醇適量溶解，分別定容至10mL容量瓶中，配置成濃度為0．06304mg/mL和厚樸酚對照品溶液，4℃存放備用。

2．1．3 機器煎煮樣品溶液的制備 稱量半夏180g，厚樸135g，茯苓180g，蘇葉90g，生姜135g，加水3500mL，于高壓煎煮機器中，按實驗所需的各浸泡時間、煎煮時間、煎煮溫度進行煎煮，趁熱濾出藥液，待藥液冷卻后加水定容至2000mL容量瓶中，搖勻，即得湯劑溶液。精密移取湯劑溶液100mL，加入乙醇60mL，混合均勻，于4℃冰箱靜置24h，濾過，濾液用旋轉蒸發儀蒸干，殘渣用甲醇超聲溶解，定容至100mL容量瓶中，作為供試品溶液，4℃存放備用。

2．1．4 方法學考察

(1)標準曲線的繪制。精密量取濃度為0．06304mg/mL和厚樸酚對照品溶液1．6mL、0．4mL、0．2mL、0．1mL、0．05mL分別置于25mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得。每次進樣10μL，按上述色譜條件進行測定。以和厚樸酚的含量(X)為橫坐標，其峰面積吸收度積分值(Y)為縱坐標，繪制標準曲線，計算得回歸方程，結果見圖1，和厚樸酚標準品的色譜圖見圖2。

(2)樣品含量測定。將樣品分別按供試品制備方法制備供試液，依法測定，每批樣品各進三針，每次進樣10μL，并隨行大黃素對照品進樣10μL，計算各樣品中和厚樸酚的含量。樣品的HPLC色譜圖見圖3。

(3)精密度試驗。精密吸取和厚樸酚標準品溶液10μL，重復進樣5次，計算樣品中和厚樸酚含量的RSD為0．21%，表明儀器精密度良好。

圖1 和厚樸酚標準曲線圖

圖2 和厚樸酚標準品溶液的HPLC色譜圖

圖3 樣品中和厚樸酚的HPLC色譜圖

(4)穩定性試驗。精密吸取和厚樸酚標準品溶液10μL，分別于0、3、6、9、16、24h進樣測定，計算樣品中和厚樸酚含量的RSD為0．97%，結果表明，樣品溶液在24h內穩定。

(5)重復性試驗。取同一批號樣品5份，精密稱定5g，照供試品溶液的制備方法制備5份供試液，分別進樣10μL，測定并計算重復性。計算樣品中和厚樸酚含量的RSD為1．22%。

(6)加樣回收率試驗。稱取和厚樸酚處方量一半的組方飲片煎煮，分別加入相當于半夏厚樸湯處方一半的和厚樸酚對照品溶液，按照樣品制備方法制備和厚樸酚湯樣品溶液6份，精密吸取各樣品溶液10μL進樣測定，計算和厚樸酚的平均回收率為96．31%，RSD為1．62%。

2．1．7 浸出物含量測定的方法 按照《中華人民共和國藥典》（2010年版）一部附錄Χ項下浸出物測定法，精密量取煎液25mL至蒸發皿中，并將其置于水浴鍋上濃縮成稠浸膏，然后放入烘箱中于105℃干燥3h，取出后放入干燥器干燥10min，稱量，用減量法計算干浸膏得率。

2．2 機器煎煮工藝的單因素考察

2．2．1 對和厚樸酚及浸出物的影響 為考察優選半夏厚樸湯最佳機器煎煮工藝，在查閱中藥煎煮相關文獻的基礎上，進行單因素考察，以水煎液中和厚樸酚含量為主要指標；同時測定水煎液的浸出物含量。

2．2．2 浸泡時間的單因素考察 取半夏180g，厚樸135g，茯苓180g，蘇葉90g，生姜135g，加水3500mL，分別浸泡0、10、20、30、40min，溫度110℃，煎煮15min。測量各合煎液中和厚樸酚及干浸膏得率。結果見圖4、圖5。

圖4 不同浸泡時間對半夏厚樸湯水煎液中和厚樸酚含量的影響

圖5 不同浸泡時間對半夏厚樸湯水煎液浸出物含量的影響

從圖4、圖5不同浸泡時間對半夏厚樸湯水煎液指標成分的影響來看，隨著浸泡時間的增加，指標性成份及浸出物均呈先下降后上升再下降的趨勢，且在30min是達到最大，因此本試驗選取浸泡20 min、30 min、40 min這三個水平進行正交試驗考察。

2．3．3 煎煮時間的單因素考察 在其他煎煮條件固定的情況下，分別考察煎煮10、15、20、25、30 min時水煎液中和厚樸酚及浸出物含量，結果如圖6、圖7所示。

圖6 不同煎煮時間對半夏厚樸湯水煎液中和厚樸酚含量的影響

圖7 不同煎煮時間對半夏厚樸湯水煎液浸出物含量的影響

圖6、圖7表明隨著煎煮時間的增加，水煎液中指標成分含量與浸出物含量基本呈先上升后降低再上升的趨勢，且在煎煮15min時含量達到最高。因此本試驗選取煎煮10min、15min、20min這三個水平進行正交試驗考察。

2．3．4 煎煮溫度的單因素考察 在其他煎煮條件固定的情況下，分別考察煎煮溫度為105、110、115、120℃時水煎液中和厚樸酚及浸出物含量，結果如圖8、圖9所示。

圖8 不同煎煮溫度對半夏厚樸湯水煎液中和厚樸酚含量的影響

圖9 不同煎煮溫度對半夏厚樸湯水煎液浸出物含量的影響

圖8 、圖9表明隨著煎煮溫度的增加，水煎液中指標成分含量與浸出物含量先上升后下降的趨勢，且110℃時含量最高。因此選取煎煮溫度為105℃、110℃、115℃這三個水平進行正交試驗考察。

2．4 機器煎煮工藝正交試驗

2．4．1 正交試驗設計 根據浸泡時間、煎煮時間、煎煮溫度的單因素考察結果，以水煎液中和厚樸酚和浸出物的含量為指標，進行三因素三水平正交試驗，因素與水平安排見表2。

表2 因素與水平

2．4．2 正交試驗及其結果 根據2．1．3項下的樣品制備方法，分別按表3中的9組條件進行正交試驗，制備9組樣品，并在2．1．1項色譜條件下分別進樣分析，測定供試品溶液中和厚樸酚的含量；同時測定浸出物含量。正交試驗結果見表3。

本試驗以和厚樸酚含量為指標，結合浸出物測定結果考察，故選擇綜合加權評分法對實驗結果進行方差分析。設定滿分為100分，其中和厚樸酚和浸出物含量的權重系數各為50，在此基礎上進行總加權評分，將總分結果帶入正交實驗結果中，即得如表3所示結果。由直觀分析結果可見，在所選因素水平范圍內，影響半夏厚樸湯機器煎煮工藝的因素依次為C＞B＞A，即煎煮溫度＞煎煮時間＞浸泡時間。且各因素各水平影響大小順序為A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1。

根據以上結果用SPSS 15．0統計軟件進行方差分析，結果見表4。表4方差分析表明，煎煮時間因素F值為23．76，P值為0．0404；煎煮溫度因素F值為28．93，P值為0．0334，即差異有統計學意義（P＜0．05），因此煎煮時間及煎煮溫度均為半夏厚樸湯機器煎煮過程中的顯著性影響因素，而浸泡時間因素差異無統計學意義。

表3 半夏厚樸湯機器煎煮工藝正交試驗表及結果

表4 半夏厚樸湯機器煎煮工藝試驗方差分析表

根據正交試驗結果，綜合極差分析和方差分析，并考慮臨床煎藥的可行性，確定半夏厚樸湯的最佳機器煎煮工藝為A2B3C3，即將半夏厚樸湯飲片浸泡30min后，在機器煎煮溫度為115℃的條件下煎煮20min。

3 討論

半夏厚樸湯中君藥半夏為有毒藥材，雖然經炮制后毒性大大降低，但是毒性的影響仍在，而煎煮條件對有毒成分的影響又不可忽視，因此對此方的煎煮，既要注意有毒成分的影響，又要保證有效成分的煎出，在最大程度上發揮該方劑的藥效。

由于該方的君藥半夏的主成分研究比較復雜且不穩定，研究尚未透徹，因此本實驗選擇臣藥厚樸中的有效成份和厚樸酚（新木脂素類）作為主要指標，再結合干浸膏的含量進行考察。

本實驗最終確定半夏厚樸湯機器煎煮的最佳工藝為：浸泡30min后，在機器煎煮溫度為115℃的條件下煎煮20min。結果可靠，評價指標可控。該實驗結果不僅可以對本院的代煎藥的煎煮工藝及質量有一定的實驗基礎，而且對于規范以半夏厚樸湯以及這一類的方劑的機器煎煮工藝具有一定的指導意義。

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Objective To optimize YJD machine decoction process of Huanglian Jiedu decoction by orthogonal test, and make some references for the machine decoction process standard． Methods With composite score of honokiol as index，effects of soak time，decoction time and decoction temperature on machine decoction process were optimized by single factor tests and orthogonal test． Results Optimal machine decoction process was as following: Soaked 30 minutes，decoction time 20 minutes，decoction temperature 115℃． Conclusion Optimized machine decoction process was reasonable and feasible with controllable evaluation index，it could provide experimental basis for developing of machine decoction process of Chinese medicine decoctions．

Dug-decocting machine; Banxianhoupu decoction; Optimization of decoction process

10．3969/j．issn．1009-4393．2015．32．002

江蘇 215003 蘇州中醫醫院 （陳愛娟 蔣斌 朱慧 王玳珠）

王玳珠 E-mail：wangdz60@sina.com