從×線影像學觀測布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折模型的作用

王羿 何先游

摘要：目的從X線影像學的改變來觀察布依藥“鹿角壯骨煎液”對大鼠骨折模型修復的作用。方法 手術造成SD大鼠脛骨中下段骨折模型60只，隨機分成治療組30和對照組30，治療組以布依藥鹿角壯骨煎液灌胃，對照組給予等量0.9%生理鹽水灌胃。在造模后的第15、21、30、42d分別取兩組大鼠行骨折處X線攝片并評分。結果 治療組與對照組相比較，在造模第15天及以后治療組X線影像學與對照組有明顯差異（P<0.05）。結論布依藥鹿角壯骨煎液可促進骨痂生長，提高影像學評分，對骨折愈合有修復作用。

關鍵詞：骨折；布依藥；大鼠骨折模型；影像學

中圖分類號：R285.5

文獻標志碼：A

文章編號：1007 - 2349（ 2015） 02 - 0059 - 02骨折是機械性超負荷，致使骨結構遭到破壞，骨失去支撐及杠桿作用的一種表現。很多骨折都源于高能量外傷，導致骨小連及延緩愈合發生率較高，是臨床需要解決的問題。祖國醫學和民族醫藥在骨折治療上有悠久的歷史，能夠使骨骼延緩愈合和不愈合重新獲得較迅速的愈合[1]。本課題組在臨床觀察中發現“鹿角壯骨煎液”在骨折的治療中療效確切，本文從動態觀察骨折愈合過程中骨折端的影像學變化來驗證“鹿角牝骨煎液”對骨折大鼠模型的修復作用，從而為臨床治療提供理論依據和實驗支撐。1 材料和方法1.1 動物 本課題實驗動物是清潔級健康Sprague Dawley（ SD）雄性大鼠60只，6月齡，體重280～320g，重慶滕鑫比爾實驗動物銷售有限公司提供，動物合格證號：SCXK（渝）2012- 0004、1.2藥物及制備本實驗布依藥鹿角壯骨煎液由黔南州中醫院藥劑科提供。將告獨六、蘿卜難、印乃岜、龍自然、戈難鞏、專雄等（各100g）放入鋁鍋中，加入6000ml，蒸餾水，常溫下浸泡24h后加熱沸騰，紗布過濾后得到3000ml.含生藥量為lg/mL的濃縮液，裝瓶冷藏備用.1.3主要試劑與儀器1.3.1 主要試劑，蘇木素伊紅染色試劑盒（HE試劑盒），產品編號：AR1180，在博士德生物工程有限公州購買1.3.2主要儀器，C型臂電視X光機（德國西門子公司），Im-agePro Plus5.0圖像分析軟件（美國Media Cyberneties公ngk ），數碼照像機（E-500型，日本Olymupus公司）。1.4方法1.4.1模型建立[2]適應性喂養3d后進行造模，方法如下：以10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔麻醉大鼠，麻醉顯效后將大鼠以仰臥位固定于操作臺上，左下肢剝毛、消毒，無菌操作下取內側縱行切口約1.5cm，逐層切開皮膚及皮下，顯露脛骨，在脛骨中下1/3交界處，用手術刀片切開3 mm寬的骨膜，顯露骨膜下骨質，以骨刀造成橫斷骨折，左膝關節髕韌帶處剝毛、消毒，無菌操作下取前側縱行切口約1.5 cm，分開髕韌帶于止點處進針，順行穿直徑為1.1mm克氏針，通過斷端并至脛骨遠端有阻力后回抽，折彎、剪斷埋于軟骨面下，然后逐層縫合。術后進行3d抗感染治療，肌肉注射青霉素8萬U/100 g，1次/d。1.4.2動物分組及給藥方法造模成功后的大鼠隨機分為治療組30，對照組30分籠喂養，在室溫22～ 270C、相對濕度80%的清潔環境中飼養，使用標準飼料，自由攝食和攝水。治療組給予布依藥鹿角壯骨煎液按劑量5g/（kg·d）灌胃，根據大鼠對人等效劑量的2倍[3]，每日早晚2次。對照組給予等量0. 9%生理鹽水灌胃，方法同治療組。所有實驗動物均在造模后12h給藥。1.4.3影像學觀察2組大鼠均在術后第7、15、21、30、42d隨機選取大鼠行腹腔麻醉后進行X線攝片，觀察骨痂生長及骨折愈合情況并進行評分。評分標準[4]：1分，骨折斷端邊緣趨向性模糊，骨膜輕度反應，無骨痂可見；2分，斷端邊緣模糊，骨膜反應淺淡，骨痂少量，密度較淡，邊緣不整齊；3分，斷端邊緣仍可見，但接近消失，骨膜反應較深，骨痂量增多，但未填滿缺損，密度增深，邊緣較清；4分，斷端邊緣完全消失，骨膜反應密度近似骨影，骨痂填滿缺損，與骨皮質密度相同并相互連接。2結果2.1 布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折后X線影像學的作用 在造模的第15、21、30、42 d分別隨機取2組大鼠予以X線攝片觀察？在第15d時，治療組骨折斷端周同大量軟組織增高影；而對照組骨折線較清晰；第21天時，治療組骨折斷端骨密度有所增加，骨膜反應漸深，生成較多骨痂，斷端邊緣仍可見，對照組僅有少量骨痂生長。第30天時，治療組大量骨痂已包繞骨折斷端，骨折線模糊，對照組出現較多骨痂。第42天時，治療組骨折線基本消失，骨小梁力學結構漸為合理，對照組骨折處大量骨痂生長，骨折線可見.2.2布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折后X線影像評分影響 根據造模后第15、21、30、42d大鼠骨折處X線影像，對其骨折愈合及骨痂生成情況進行評分（表1）。表l示，在第15d、21d、30d、42d差異均顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大，但在3周后差異更加明顯，治療組較對照組提高影像學評分更為顯著。3討論

貴州省是布依族、苗族群居地，民族醫藥是特色，老百姓對于民族醫藥信任程度高，得到廣大群眾的歡迎。布依藥“鹿角壯骨煎液”是貴州省黔南州中醫院名老中醫經數十年悉心研究和改進布依族民間藥方（院內制劑），采用告獨六（鹿角霜）、蘿卜難（續斷）、印乃岜（骨碎補）、龍自然（自然銅）、戈難鞏（黨參）、專雄（川芎）等10多種布依藥為原料加工而成，補益肝腎、強筋壯骨的功效確切。我們在大量臨床治療中并結合“經皮微創內同定系統（LISS鋼板）配合布依藥鹿角壯骨膠囊治療脛骨中下段骨折的臨床療效”課題進行研究，運用手術內固定治療骨折的同時，配合口服布依藥“鹿角壯骨煎液”治療，可縮短骨折愈合時間，促進骨折愈合。

通過本課題觀察，在第15、21、30、42 d2組大鼠X線影像評分結果差異顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大。根據結果分析，布依藥鹿角壯骨煎液促進骨折愈合，可能是通過促進成骨細胞的增值與分化而促進成骨，使軟骨骨痂向骨性骨痂轉換，提高了骨的強度，從而加速了骨折愈合[5]臨床和實驗都已證明中醫藥（民族醫藥）在治療骨折方面具有獨特的優勢和潛力，中醫藥（民族醫藥）已經成為廣泛采用的治療骨折的重要手段[6]。布依藥“鹿角壯骨煎液”已廣泛運用于臨床，在促進骨折愈合上療效確切，符合臨床用藥特點，無不良反應。本課題從動物實驗和影像學觀測的角度進一步驗證了布依藥“鹿角壯骨煎液”的療效，為臨床進一步推廣該藥提供了理論依據。參考文獻：[1]鄭培永，陳繹志，趙光復，中藥促進骨折愈合的實驗研究進展[M].中醫止骨，1999，11 （1）：53.[2]沈霖，林燕萍，王擁軍.骨傷科實驗研究[M].北京：北京科學技術出版社，2005：384.[3]孫永生，溫建民，吳林生，等.骨折三期治療對骨生長因子FCF-2表達影響的實驗研究[J].中國骨傷，2004，17（4）：222-226.[4]上海市骨傷科研究所傷科論文匯編[M].第3輯.上海：上海科技出版社，1964，226.[5]潘貴超，王輝奇，張治國.補腎健脾活血方對大鼠骨質疏松骨折愈合的作用及其機理探討[J].中日中醫基礎醫學雜志，2011，17（2）：156-157.[6]崔永鋒，王琦，張毅，等.杜仲對兔骨折愈合影響的x線影像學研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：163-165（收稿日期：2014-11-07）