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補中益氣湯對運動疲勞后大鼠腸道影響的實驗研究

2015-08-20 09:06:09王蓓蓓王雪梅
云南中醫(yī)中藥雜志 2015年2期
關(guān)鍵詞:血漿劑量實驗

王蓓蓓 王雪梅

關(guān)鍵詞:補中益氣湯;胃動素;離體腸管中圖分類號:R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1007 - 2349( 2015) 02 - 0066 - 02補中益氣湯出自金代李東垣的《脾胃論》,目前被公認(rèn)為是治療脾胃病及甘溫除大熱的代表方。主要藥物組成為黃芪、人參、陳皮、柴胡、白術(shù)、升麻、當(dāng)歸、甘草(炙)。運動性疲勞是指在競技運動過程中發(fā)生的一種疲勞癥狀,具有特殊的運動特色。中醫(yī)把苦力、勞役、強力舉重、持重運行、疾走等勞動或運動都稱為“勞”,而競技運動可視為一種比勞動強度更大的劇烈活動,由于活動強度大,對筋骨肌肉和臟腑功能的影響很大,精氣和能量的耗損更大,更易引起疲勞。由于大負(fù)荷量運動能損耗機(jī)體精氣血津液和能量物質(zhì),累及心肝脾腎等臟腑,導(dǎo)致運動能力下降,此與中醫(yī)的“虛證”十分相似,故應(yīng)將運動性疲勞歸屬于中醫(yī)“勞倦”范疇。中醫(yī)認(rèn)為脾為后天之本,氣血生化之源,脾主四肢肌肉,與運動關(guān)系密切。故補脾益氣法是防治運動性疲勞的主要治法之一。而補中益氣湯為代表方劑。本實驗旨在說明不同劑量的補中益氣湯對運動疲勞后大鼠腸道影響情況。1 實驗材料1.1試驗藥物補中益氣湯劑量參考:《方劑學(xué)》[1]。將8味藥材洗凈,第一次加8倍量水浸泡30 min,提取30 min,濾過;第2次加6倍水提取,濾過;合并兩次濾液,靜置沉淀,取上清液;繼續(xù)煎熬濃縮,得浸膏,4℃冰儲備用。使用時取補中益氣湯浸膏,按照出膏率折算出生藥量并稱取相應(yīng)重量。高、中、低劑量分別為每10 g體重0.102,0.034,0.011 g生藥。1.2試劑 胃動素由北京華英生物技術(shù)研究所提供并進(jìn)行放免檢測。1.3實驗動物成熟清潔級SD大鼠,體重200 - 250g,雌性,50只,標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng),飼料及墊料由購自昆明醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。實驗動物許可證號SCXK(滇)2011 - 004。1.4實驗主要設(shè)備 Powerlab八通道生理信號記錄系統(tǒng),生產(chǎn)廠家:澳大利亞,ADlnstrument;型號:ML 118;名稱:QuadBridge,Chart5分析軟件;臺式高速冷凍離心機(jī),生產(chǎn)廠家:長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司,型號:TGL - 20M。2實驗方法2.1實驗分組取大鼠50只,雌性,按體重隨機(jī)分為5組,每組10只。具體如下:第1組為空白對照組(以下簡稱空白組),第2組為運動組(以下簡稱運動組),第3組為先服用補中益氣湯低劑量后運動組(以下簡稱低劑量組),第4組為先服用補中益氣湯中劑量后運動組(以下簡稱中劑量組),第5組為先服用補中益氣湯高劑量后運動組(以下簡稱高劑量組)。2.2實驗方法5組大鼠實驗前禁食12h,自由飲水。將第3、4、5組大鼠分別灌入補中益氣湯低、中、高劑量。灌胃后將第2、3、4、5組大鼠分別在胸前掛一個約大鼠體重12%的重物后,置于長100 cm,寬50 cm,高50 cm的泳槽中游泳,當(dāng)大鼠游至水從耳下淹到耳上,其身體下沉?xí)r,處于疲勞階段后,將五組大鼠摘眼球取血,后處死,迅速剖腹,分離腸系膜。由十二指腸處輕輕剪取腸段,將腸段處理后放入臺氏液中,并連接Powerlab八通道生物信號記錄系統(tǒng),待腸管收縮平穩(wěn)后,觀察腸管平滑肌活動曲線情況。對照觀察結(jié)果的差異,使用sPss軟件作出統(tǒng)計學(xué)處理。并將所取血液放置肝素抗凝試管中搖勻,4℃低溫高速離心15min( 2000r/min),取上層血漿,于一20℃冰箱凍存,按放免規(guī)定進(jìn)行操作。3實驗結(jié)果3.1血漿胃動素(MTL)情況見表1。與空白組相比,運動組大鼠血漿MTL顯著提高(P<0.05);與運動組比較,低、中劑量組大鼠血漿MTL均有不同程度的降低,其中中劑量組血漿MTL降低最明顯,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);與運動組比較,高劑量組大鼠的血漿MTL有所增加,但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。3.2大鼠離體腸道平滑肌活動情況實驗數(shù)據(jù)以平滑肌肌條標(biāo)本收縮的振幅(g)、頻率(Hz)表示。3.2.1 大鼠離體腸道平滑肌平均頻率見表2。與空白組相比,運動組大鼠離體腸道平滑肌的平均頻率明顯提高(P<0.05);與運動組比較,低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率均有不同程度的降低,其中中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率顯著降低(P<0.01);與運動組比較,高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率有增加趨勢,但統(tǒng)計無顯著意義(P>0.05)。但與中劑量組比較,高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率顯著增加(P<0.01)。3. 2.2大鼠離體腸道平滑肌平均振幅見表3。與空門組相比,運動組大鼠離體腸道平滑肌的平均振幅顯著提高(P<0.05);與運動組比較,低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅顯著降低(JD<0.05,,)<0.01);與運動組比較,高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅顯著增加(P<0.05)。4討論

胃腸運動主要受腸神經(jīng)系統(tǒng)支配和體液因素的影響。通過檢測血液、下丘腦和胃腸局部組織中的胃腸激素含量的變化可反映胃腸運動機(jī)能狀況。

胃動素( MTLilin MTL)是一種重要的胃腸激素,分布在大多數(shù)哺乳動物十二指腸近端,空腸粘膜隱窩中的上皮胃動素細(xì)胞,還存在于神經(jīng)組織及垂體、下丘腦、大腦皮層、小腦中,也屬于一種腦腸肽激素.MTL對消化道異型性收縮起重要作用,促進(jìn)胃腸運動,提高胃腸道、膽道、oddis括約肌收縮力和張力。從實驗結(jié)果看,大鼠負(fù)重游泳后,血漿胃動素水平平明顯增加,可能胃動素使小腸運動明顯加速 與運動組比較,低、中劑量組大鼠血漿MTL均有不同程度的降低,中劑量組血漿MTL降低最明顯,表明中劑量補中益氣湯可有效降低血漿中的MTL,可能胃動素會使小腸運動減緩,而補中益氣湯高劑量的大鼠血漿MTL與運動組比較,雖然沒有統(tǒng)汁學(xué)意義,但有增加趨勢,不知是否與該組樣本數(shù)量不夠十個有關(guān).這提示我們,補中益氣湯對腸管平滑肌的調(diào)節(jié)可能與胃動素有關(guān),并是否可進(jìn)一步推測,不同劑量的補中益氣湯對胃動素的釋放有雙向調(diào)節(jié)作用。

中藥對胃腸運動功能的調(diào)節(jié)有雙向調(diào)節(jié)作用[2]。補中益氣湯由黃芪、升麻、柴胡、當(dāng)歸、白術(shù)、人參、陳皮、甘草組成有補中益氣,升陽舉陷之功效。有實驗表明[3],補中益氣湯對小腸動力的影響比較復(fù)雜.當(dāng)小腸蠕動亢進(jìn)時呈現(xiàn)抑制作用,張力降低且蠕動減慢;當(dāng)小腸的運動處于抑制狀態(tài)時,則出現(xiàn)促進(jìn)腸管蠕動的作用。本實驗利用生物信號記錄系統(tǒng),記錄不同組別大鼠的離體腸管平滑肌收縮的振幅和頻率變化情況,實驗結(jié)果顯示,與運動組大鼠離體腸道平滑肌的平均振幅和頻率比空白組顯著提高,表明經(jīng)過負(fù)重游泳后形成疲勞的大鼠小腸運動明顯加速,出現(xiàn)飲食物的消化和排泄的過速現(xiàn)象,也表明造模成功;低、中劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅和頻率與運動組比較顯著降低,表明補中益氣湯中、低劑量均可顯著延緩運動后大鼠的加速的小腸運動,說明補中益氣湯中、低劑量對于疲勞運動后所造成的胃腸道損傷有治療作用;高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均頻率與運動組比較,有增加趨勢,高劑量組大鼠的離體腸道平滑肌平均振幅與運動組比較顯著增加,表明補中益氣湯高劑量使運動后本米就加速的小腸運動更加快,說明補中益氣湯高劑量對于疲勞運動后所造成的胃腸道損傷并無治療作用,反而有可能加速小腸運動。根據(jù)以上離體實驗結(jié)果,低、中劑量的補中益氣湯能夠延緩運動后大鼠的加速的小腸運動,而高劑量的補中益氣湯能夠使運動后大鼠的加速的小腸運動更加加快,是否可推測,不同劑量的補中益氣湯對疲勞大鼠的腸道具有雙向調(diào)節(jié)作用。參考文獻(xiàn):[1]段富津.方劑學(xué)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1995,ll6.[2]湯斌.補中益氣湯的實驗研究進(jìn)展[J].廣東醫(yī)院學(xué)報,1994,12(4):324-327.[3]李巖.補巾益氣湯對小鼠胃腸運動雙向調(diào)節(jié)作用和抗炎作用的研究[J].醫(yī)藥論壇雜志,2011,32( 22):l8-19(收稿日期:2014-10-07)

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