HPLC法測定舒心安神膠囊中梔子苷的含量

2015-09-06 01:03:40裴妙榮李慧峰

山西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報 2015年4期

王麗，裴妙榮，李慧峰

（山西中醫(yī)學(xué)院，山西太原030024）

舒心安神膠囊由梔子、生地黃、酸棗仁等10味中藥組成，按一定比例粉碎成細粉，混勻，裝膠囊，即得。本品為硬膠囊，內(nèi)容物為淺黃棕色粉末，氣微香，味微甘、稍苦。具有養(yǎng)心安神斂汗、瀉火除煩養(yǎng)陰、滋陰潤燥補血的作用，臨床上用于健忘失眠、心煩易躁等癥。本實驗在文獻［1-4］的基礎(chǔ)上制定了膠囊中梔子苷含量測定的方法，為藥品的生產(chǎn)和檢驗提供依據(jù)，保障臨床用藥的質(zhì)量可控。

1 實驗材料

Waters 2695（美國）高效液相色譜儀，色譜柱為Diamonsil C18柱（4.6 mm×150 mm）；2998紫外檢測器。梔子苷對照品（含量測定用，批號：110749-200714）購自中國藥品生物制品檢定所；流動相所用甲醇為色譜純，水為雙蒸水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm）；流動相：甲醇-水（19∶81）；流速：1 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：238 nm。在以上色譜條件下，梔子苷峰保留時間為20 min。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備精密稱取梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物0.8 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，超聲處理30 min，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，即得。

2.2.3 陰性對照溶液的制備取不含梔子的內(nèi)容物0.8 g，按供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.3 陰性對照試驗

按處方藥的比例取缺黃芪的陰性樣品，按工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制成空白溶液，測定。結(jié)果在梔子苷峰相應(yīng)的保留時間處未顯吸收峰，表明峰中其他成分對測定無干擾。

在上述條件下梔子苷與樣品中其他組分能基線分離，陰性對照無干擾。梔子苷對照品溶液、供試品溶液和陰性對照液色譜圖見圖1～圖3。

2.4 線性關(guān)系考察

精密稱取梔子苷對照品1.34 mg，置10 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；再分別精密吸取0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.2 mL、1.6 mL、2.0 mL至2 mL量瓶中，得不同濃度對照品溶液，分別進樣10 μL，測定峰面積積分值。以進樣量為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)作圖，得一直線回歸方程：Y=1567X-12685，r=0.9999，梔子苷進樣量在 67 ng～1340 ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性。

2.5 精密度試驗

在上述色譜條件下，精密吸取梔子苷對照品溶液，連續(xù)進樣 6次，進樣量 10 μL，平均含量 53.7 μg/mL，RSD為0.84%。表明儀器的精密度較好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

取同一供試品溶液（批號100526）在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h 分別進樣 10 μL，測得樣品中梔子苷峰面積積分值，RSD為1.41%。表明供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗

按擬定的含量測定方法，對同一批樣品（批號100526）分別制備6份供試品溶液，精密吸取10 μL，進樣，測定峰面積積分值并計算梔子苷含量，RSD＝1.82%。表明該實驗方法重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗

采用加樣回收法試驗，精密稱取已知含量的樣品（批號：100526，1.48 mg/g）6 份，分別精密加入梔子苷對照品溶液（0.122 mg/mL）5.0 mL，再加甲醇20 mL按樣品測定項下操作，平均回收率為99.42%，RSD為0.88%。結(jié)果見表1。實驗結(jié)果表明，本方法回收率好，方法可行。