豬圓環(huán)病毒2型感染對(duì)豬瘟疫苗免疫效果的影響

張敬峰　趙永前　孫華偉等

摘要：為探索在豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）陽(yáng)性豬場(chǎng)免疫豬圓環(huán)病毒疫苗對(duì)豬場(chǎng)實(shí)際臨床生產(chǎn)中豬瘟疫苗免疫效果的影響，遂將某規(guī)模化豬場(chǎng)的一棟存在PCV-2感染的150頭產(chǎn)房仔豬隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組75頭，試驗(yàn)組在14日齡免疫某進(jìn)口PCV-2桿狀病毒載體滅活疫苗，對(duì)照組不免疫，并分別在PCV-2疫苗免疫前和豬瘟疫苗二免后30天每組隨機(jī)采血18頭仔豬檢測(cè)豬瘟抗體。結(jié)果顯示：PCV-2疫苗免疫前兩組仔豬的豬瘟抗體水平無(wú)明顯差異，豬瘟疫苗二免后30天，試驗(yàn)組的豬瘟抗體平均值和豬瘟抗體離散度均顯著好于對(duì)照組。表明，PCV-2的感染會(huì)對(duì)豬的免疫系統(tǒng)造成損害從而抑制豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答，在PCV-2陽(yáng)性豬場(chǎng)免疫豬圓環(huán)病毒疫苗能夠顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果。

關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒2型；豬瘟抗體；跟蹤監(jiān)測(cè)；強(qiáng)化免疫；應(yīng)用

中圖分類號(hào)：S852.65+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2015）08-0086-03

Abstract In order to explore the influence of Porcine Circovirus Type 2 （PCV-2 ） vaccination on the immune effect of Classical Swine Fever （CSF） vaccine in the PCV-2 positive pig farms during practical clinical production， 150 piglets in a farrowing house of a large pig farm which had been confirmed to be PCV-2 positive were randomly divided into two groups， namely， test group and contrast group， and each 75 piglets. The piglets in the test group were immunized with the imported PCV-2 baculovirus vector inactivated vaccine when they were 14 days old. Then， 18 piglets were randomly selected from each group before PCV-2 vaccination and 30 days after CSF revaccination respectively. The detection results showed that： there was no difference between the two groups in CSF antibody level before PCV-2 vaccination； 30 days after CSF revaccination， the average value and dispersion of CSF antibody in the test group were significantly higher than those of the contrast group. It indicated that the immune system of pigs could be damaged by PCV-2 infection and the immune response of CSF vaccine was suppressed. In addition， the immune effect of CSF vaccine could be enhanced by immunizing with PCV-2 vaccine in the PCV-2 positive pig farms.

Key words Porcine Circovirus Types 2（PCV-2）；CSF antibody； Tracking monitoring； Supplementary immunization； Application

豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2，PCV-2）引起的豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病（Porcine circovirus type 2 associated diseases，PCVAD）是危害當(dāng)今全球養(yǎng)豬生產(chǎn)最主要的免疫抑制性疾病。目前PCV-2在各地豬場(chǎng)內(nèi)感染十分普遍，其感染率可高達(dá)96%以上[1]。研究表明，PCV-2感染可導(dǎo)致豬的免疫器官損傷、淋巴細(xì)胞增殖活性降低及淋巴細(xì)胞缺失，IgM+ B細(xì)胞總數(shù)顯著下降，巨噬細(xì)胞吞噬功能降低[2～4]。PCV-2引起的上述免疫病理?yè)p傷與當(dāng)前許多豬群生產(chǎn)性能低下、疫苗免疫失敗以及多種病原混合或繼發(fā)感染的頻繁發(fā)生有密切關(guān)系。司興奎等[5]通過(guò)建立PCV-2人工感染模型證實(shí)了PCV-2的感染會(huì)對(duì)豬瘟疫苗體液免疫應(yīng)答有一定程度的抑制作用。本研究旨在探索在豬場(chǎng)實(shí)際臨床生產(chǎn)中，PCV-2感染對(duì)豬瘟疫苗免疫應(yīng)答的影響，這對(duì)進(jìn)一步闡明豬瘟疫苗免疫失敗的原因、改善免疫效果具有重要的理論意義，為豬瘟的有效防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒（CSFV Ab），購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司；酶標(biāo)儀型號(hào)為寶特ExL 800，美國(guó)寶特公司生產(chǎn)；冷凍離心機(jī)型號(hào)為Centrifuge 5424R，產(chǎn)自德國(guó)；各種規(guī)格的移液器，購(gòu)自德國(guó)Eppendorf公司；恒溫箱、水浴鍋等。

1.2 接種免疫

將江蘇省宿遷某規(guī)模化豬場(chǎng)一棟存在PCV-2感染的150頭產(chǎn)房仔豬隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組75頭，單獨(dú)飼養(yǎng)。試驗(yàn)組豬只在14日齡免疫某進(jìn)口PCV-2桿狀病毒載體滅活疫苗，對(duì)照組不免疫。仔豬豬瘟免疫某生物制品廠的豬瘟ST傳代細(xì)胞苗， 30日齡首免，60日齡二免，按1頭份/頭肌注免疫。endprint

1.3 檢測(cè)方法

分別在PCV-2疫苗免疫前和豬瘟疫苗二免后30天每組隨機(jī)采血18頭仔豬檢測(cè)豬瘟抗體。血清按常規(guī)方法進(jìn)行凝血處理。抗體檢測(cè)于2014年9月在江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)所動(dòng)物疫病診斷與檢測(cè)中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。嚴(yán)格按照IDEXX公司的試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行相關(guān)操作。結(jié)果判定：樣品阻斷率≥40%，判為豬瘟抗體陽(yáng)性，阻斷率≤30%判為豬瘟抗體陰性，介于兩者之間為可疑。

2 結(jié)果與分析

2.1 PCV-2疫苗免疫前血清樣品檢測(cè)結(jié)果

由圖1可知，檢測(cè)仔豬血清樣品在PCV-2疫苗免疫（14日齡）前的豬瘟抗體陽(yáng)性率、阻斷率平均值和離散度，試驗(yàn)組和對(duì)照組分別為：88.9%和88.9%，64.6%和63.3%，27.4%和28.0%。說(shuō)明試驗(yàn)組和對(duì)照組在PCV-2疫苗免疫前豬瘟抗體水平非常接近，二者差異不顯著（P>0.05），試驗(yàn)組和對(duì)照組的分組是科學(xué)的。同時(shí)，由于此階段仔豬的豬瘟抗體來(lái)自于母源抗體，說(shuō)明母豬群的豬瘟抗體水平和抗體整齊度均較好。

2.2 豬瘟疫苗二免后30天血清樣品檢測(cè)結(jié)果

由圖2可知，檢測(cè)仔豬血清樣品在豬瘟疫苗二免后30天（90日齡）的豬瘟抗體陽(yáng)性率、阻斷率和離散度，試驗(yàn)組和對(duì)照組分別為：83.3%和72.2%，58.8%和47.8%，30.2%和39.2%。試驗(yàn)組豬瘟抗體陽(yáng)性率比對(duì)照組高11.1個(gè)百分點(diǎn)，二者差異顯著（P<0.05），說(shuō)明PCV-2感染能顯著影響CSFV特異性抗體的產(chǎn)生，導(dǎo)致血清抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)率下降。在仔豬豬瘟疫苗二免后試驗(yàn)組豬瘟抗體平均值比對(duì)照組高11.0個(gè)百分點(diǎn)，抗體離散度比對(duì)照組低9.0個(gè)百分點(diǎn)，與對(duì)照組差異顯著（P<0.05），表明PCV-2感染確實(shí)可以在一定程度上抑制仔豬對(duì)豬瘟疫苗的體液免疫應(yīng)答，導(dǎo)致豬群豬瘟抗體水平和抗體整齊度的下降。

3 討論與結(jié)論

豬圓環(huán)病毒2型陽(yáng)性豬場(chǎng)在不免疫豬圓環(huán)病毒疫苗的情況下，會(huì)造成豬免疫系統(tǒng)損害，抑制豬免疫應(yīng)答產(chǎn)生，導(dǎo)致在進(jìn)行豬瘟疫苗免疫時(shí)，無(wú)CSFV抗體產(chǎn)生或只產(chǎn)生低水平抗體，增加臨床上發(fā)生非典型豬瘟及豬瘟免疫失敗的風(fēng)險(xiǎn)。在養(yǎng)豬業(yè)蓬勃發(fā)展的中國(guó)，PCV-2感染情況相當(dāng)普遍，尤其是養(yǎng)豬比較密集的地區(qū)。但目前不少豬場(chǎng)在是否進(jìn)行豬圓環(huán)病毒疫苗免疫接種上存在一個(gè)誤區(qū)，即認(rèn)為圓環(huán)病毒發(fā)病只是造成豬只免疫力下降，不會(huì)造成豬只死亡，卻忽視了PCV-2感染可以增加機(jī)體發(fā)生繼發(fā)感染幾率，降低豬群整齊度和改善飼料報(bào)酬等。因此，對(duì)于PCV-2陽(yáng)性豬場(chǎng)及時(shí)進(jìn)行豬圓環(huán)病毒疫苗的免疫是必要的。部分豬場(chǎng)反映其免疫效果不盡人意的原因主要有以下幾種：

（1）只免疫一次滅活疫苗。從免疫學(xué)理論而言，滅活疫苗必須經(jīng)過(guò)基礎(chǔ)免疫和加強(qiáng)免疫才可以產(chǎn)生良好的免疫反應(yīng)和免疫保護(hù)，因此豬圓環(huán)病毒疫苗也需要間隔兩周的兩次免疫。

（2）免疫日齡不合理。仔豬吮初乳后10日齡時(shí)抗體水平高于其他檢測(cè)日齡，至30日齡時(shí)迅速下降，之后隨著日齡增長(zhǎng)母源抗體逐漸下降，仔豬14～20日齡時(shí)首免PCV-2疫苗最佳[6]。因此豬圓環(huán)病毒疫苗首免日齡太早和太晚都會(huì)影響免疫的效果。

（3）只免疫仔豬或只免疫母豬。母豬接種PCV-2疫苗能提高母豬的繁殖性能，并能降低所產(chǎn)仔豬的PCV-2感染，但母源抗體持續(xù)的時(shí)間有限，因此對(duì)母豬和仔豬都應(yīng)該進(jìn)行免疫接種。

（4）免疫接種的操作不規(guī)范。免疫接種是豬場(chǎng)一項(xiàng)重要工作，接種時(shí)用擋板將豬擋在一個(gè)相對(duì)固定的地方，禁忌打飛針，且應(yīng)該由熟練的技術(shù)人員來(lái)完成。

參 考 文 獻(xiàn)：

[1] 徐麗華，王一成，袁秀芳，等.規(guī)模豬場(chǎng)4大疫病的血清學(xué)檢測(cè)及免疫抑制病因分析[J].畜牧與獸醫(yī)，2009，41（10）：77-80.

[2] Straw B E， Zimmerman J J，DAllanre S. Diseases of Swine [M].9th Edition.BlackWell Publishing Professional，2008，313-314.

[3] Nielsen J，Vincent I E，Beeotr A，et al. Association of lymphopenia with porcine circovirus type 2 induced postweaning multisystemic wasting syndrome（PMWS） [J].Vet. Immunol. Immunopathol.，2003，92（314）：97-111.

[4] 劉祥義，陳立功，宋勤葉，等.豬圓環(huán)病毒2型與豬細(xì)小病毒共感染對(duì)豬肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能及其干擾素表達(dá)水平的影響[J].微生物學(xué)報(bào)，2011，51（1）：105-114.

[5] 司興奎，郭鑫，楊漢春.豬圓環(huán)病毒2型感染對(duì)豬瘟疫苗體液免疫應(yīng)答的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2009，29（7）：826-829.

[6] 張毅，李郁，劉文，等.豬圓環(huán)病毒2型疫苗免疫對(duì)母豬繁殖性能及仔豬母源抗體水平的影響[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，33（11）：27-30.endprint