感染患兒銅綠假單胞菌的檢測及耐藥性分析

劉昱

感染患兒銅綠假單胞菌的檢測及耐藥性分析

劉昱

目的 觀察分析感染患兒銅綠假單胞菌的分布及對常用抗生素的耐藥性，為臨床預防和治療銅綠假單胞菌感染提供依據(jù)。方法 2014年1月至12月臨床標本中分離出的銅綠假單胞菌1115株，對其分布情況以及14種常用抗生素的耐藥結(jié)果進行回顧性統(tǒng)計分析。結(jié)果 檢出率最高的是呼吸道感染（30.4%）和創(chuàng)傷并發(fā)感染（24.2%）；感染部位以呼吸道（64.4%）和傷口創(chuàng)面標本為主（25.4%）；銅綠假單胞菌對氨基糖苷類、喹諾酮類、四代頭孢、含酶抑制劑的β-內(nèi)酰胺類、亞胺培南具有較高的敏感性，對頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥性較高。結(jié)論 銅綠假單胞菌對大部分常用抗生素耐藥率較高，多重耐藥菌株的出現(xiàn)應引起臨床高度重視。

銅綠假單胞菌 醫(yī)院感染 耐藥性

銅綠假單胞菌（PAE），屬于不發(fā)酵糖類的革蘭陰性細菌，是呼吸道、創(chuàng)面感染的重要致病菌。PAE引起醫(yī)院群體性感染的危害性已被臨床廣泛重視。隨著碳烯青霉素類抗菌藥物的廣泛應用，導致耐碳烯青霉素類藥物的菌株逐年上升，多重耐藥及泛耐藥的銅綠假單胞菌菌株隨之出現(xiàn)，給臨床治療感染類患者帶來較大的困難［1～4］。作者回顧性分析本院銅綠假單胞菌培養(yǎng)陽性的樣本，以期為臨床醫(yī)師在預防和治療銅綠假單菌感染中合理使用抗生素提供依據(jù)。

1　臨床資料

1.1菌株來源 115株P(guān)AE來自本院2014年1月至12月住院患兒的痰液或咽拭子、血液、尿液、創(chuàng)面分泌物等標本，剔除同一患者相同部位的重復株菌，患兒年齡2.5～10.5歲，平均年齡4.5歲。

1.2檢測方法 標本嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行相應程序劃線分離于37℃培養(yǎng)24～48h獲得純培養(yǎng)菌株，所有培養(yǎng)陽性標本經(jīng)過革蘭染色、鏡檢，再轉(zhuǎn)種至相應生化反應試紙條，做生化試驗及藥敏試驗。對PAE培養(yǎng)陽性樣本進行相應分布討論及藥敏結(jié)果分析。室內(nèi)質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌25922，均來自四川省臨床檢驗中心。

1.3產(chǎn)ESBLs菌檢測試驗 由細菌檢定儀判讀為產(chǎn)ESBLs可疑菌株后，采用頭孢噻肟、頭孢噻肟+棒酸、頭孢他啶、頭孢他啶+棒酸片行KB法擴散試驗，兩組藥敏紙片中任一加棒酸組的抑菌環(huán)直徑與不加者相差5mm，即可確證該菌為產(chǎn)ESBLs細菌。全過程采用上述質(zhì)控菌株進行質(zhì)量控制。

1.4儀器與試劑 血瓊脂等培養(yǎng)基購自鄭州安圖試劑有限公司，細菌鑒定與藥敏試驗儀器及耗材采用法國梅里埃生物公司生產(chǎn)的全自動微生物鑒定分析儀。

1.5藥敏試驗 采用K-B紙片擴散法對培養(yǎng)出的PAE進行抗生素敏感試驗，藥敏紙片購自北京天壇藥品生物技術(shù)公司，判斷標準參照美國臨床實驗室標準化委員會（CLSI2009）標準判斷。

1.6統(tǒng)計學方法 藥敏分析采用WHONET4.0軟件。計數(shù)資料用SPSS13.0軟件，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1115株P(guān)AE來源構(gòu)成比 見表1。

表1　115株P(guān)AE來源構(gòu)成比

2.2產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs銅綠假單胞菌耐藥率比較 見表2。

表2　產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs銅綠假單胞菌耐藥率比較（%）

3　討論

PAE屬于非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，為一種致病力較低但抗藥性強的桿菌。土壤、水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有該菌存在。該菌是一種條件致病菌，只在某種特定條件下才能致病；機體抵抗力降低、嚴重燒傷、患代謝性疾病、血液病、惡性腫瘤的患者常成為該菌的侵蝕對象，一些手術(shù)后或某些化療后的患者同樣容易感染該菌，是醫(yī)院感染的主要病原菌之一；由于其抗藥性較強，常導致治療無效。當機體免疫力降低時，該菌常可引起患者呼吸道感染、創(chuàng)面化膿性炎癥以及全身性感染［5，6］。本資料顯示，感染類患兒由于機體抵抗力較差，呼吸道炎癥、創(chuàng)面分泌物檢出銅綠假單胞菌幾率較高，提示臨床醫(yī)生在面對該類患者時需引起重視。

ESBLs是細菌質(zhì)粒介導的能水解氧亞基β-內(nèi)酰胺抗生素，并可被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制的一類酶，其產(chǎn)生很大程度上是由于β-內(nèi)酰胺抗生素尤其是第3代頭孢霉素的廣泛應用有關(guān)。本資料中檢出的銅綠假單胞菌中產(chǎn)酶菌株21株，占檢出PAE的18.3%，與文獻報道不盡相同［7，8］，可能與各地用藥習慣不同導致PAE對耐藥性出現(xiàn)改變。本資料中銅綠假單胞菌對頭孢曲松、頭孢噻肟等抗菌素呈較高耐藥狀態(tài)，而對氨曲南等大環(huán)內(nèi)酯類抗菌素呈高敏感狀態(tài)，提示臨床醫(yī)生可優(yōu)先選擇該類抗菌素治療，但產(chǎn)酶菌株的出現(xiàn)導致細菌的耐藥性出現(xiàn)不同程度的改變，選用抗菌素時，參照藥敏實驗結(jié)果顯得尤為重要。

PAE在臨床各類標本中的分離率呈現(xiàn)上升趨勢，對臨床常用抗生素顯示出不同的耐藥性［5，6］，本資料顯示分離的銅綠假單胞菌對氨基糖苷類的慶大霉素（11.9%）、阿米卡星（11.9%）、妥布霉素（11.0%）的耐藥率較低，可能與此類抗生素具有腎及耳毒性，臨床使用率較低有關(guān)；對第三代頭孢菌素中頭孢曲松63.6%、頭孢噻肟61.8%呈現(xiàn)出了較高的耐藥率，可能與第三代頭孢菌素作為抗銅綠假單胞菌的經(jīng)典藥物在臨床被廣泛應用甚至濫用，而導致銅綠假單胞菌對第三代頭孢菌素的耐藥性上升有關(guān)，但頭孢他啶對銅綠假單胞菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶具有高度穩(wěn)定性，故在臨床上仍顯示較高的抗菌活性［9，10］。

銅綠假單胞菌多重耐藥菌株的出現(xiàn)，已經(jīng)嚴重影響到臨床治療感染類疾病的效果，常見到藥敏結(jié)果為中介或耐藥的情況出現(xiàn)，使臨床醫(yī)生在面對此類患者時出現(xiàn)抗生素選擇性壓力［11，12］，其中可能的原因在于高耐藥菌株在院內(nèi)復制并垂直傳播有關(guān)，因此，注意防止院內(nèi)交叉感染、對高耐藥菌感染者選擇隔離治療、注重個人衛(wèi)生習慣及選擇敏感抗生素等措施。

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