類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-3水平和致動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)的變化

周 凌，丁 茹，宋 婧，徐滬濟(jì)（第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)征醫(yī)院，.風(fēng)濕免疫科；.心內(nèi)科，上海 00003）

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-3水平和致動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)的變化

周 凌1，丁 茹2，宋 婧1，徐滬濟(jì)1
（第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)征醫(yī)院，1.風(fēng)濕免疫科；2.心內(nèi)科，上海 200003）

目的 通過(guò)比較類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者不同疾病活動(dòng)性的血清金屬蛋白酶-3（Matrix Metalloproteinase-3，MMP-3）和致動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（Atherogenic Index of Plasma AIP）的水平，研究RA患者中血清MMP-3和AIP的關(guān)系。方法 選取2015年1～10月我院風(fēng)濕免疫科收治的RA患者133例作為研究對(duì)象，選取同期正常人100名作為健康組。測(cè)定不同活動(dòng)性的RA患者中血清MMP-3水平和AIP，比較血、健康調(diào)查評(píng)估（HAQ）、同疾病活動(dòng)指數(shù)（DAS28）等指標(biāo)，分析各指標(biāo)間的相關(guān)性。以DAS28為標(biāo)準(zhǔn)，分析不同活動(dòng)組MMP-3水平。結(jié)果 （1）處于中、重度疾病活動(dòng)度RA患者的MMP-3水平分別為281.1（61.70-172.7）、363.1（161.5-475.9），較健康組的35.20（25.90-48.90）和穩(wěn)定期RA患者組33.40（22.60-188.4）有顯著性升高（P＜0.05）。（2）血脂水平：RA的血清總膽固醇（5.62±1.61）mmol/L高于健康組的（5.14±1.15）mmol/L，甘油三脂（1.46±0.76）mmol/L高于健康組的（1.06±0.57），高密度脂蛋白水平（1.24±0.11）mmol/L低于健康組的（1.32±0.74）mmol/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。RA患者的AIP值（0.83±0.31）明顯高于健康組的（0.21±0.18），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（3）MMP-3水平與AIP（r=0.456，P＜0.05）、DAS28（r=0.757，P＜0.05）、HAQ（r=0.570，P＜0.05）、血沉（r=0.576，P＜0.05）呈正相關(guān)。結(jié)論 MMP-3是有效而簡(jiǎn)單方便的RA活動(dòng)性評(píng)價(jià)指標(biāo)，MMP-3與AIP相關(guān)，提示MMP-3可能參與RA患者的心血管疾病的發(fā)生。

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；金屬蛋白酶；致動(dòng)脈粥樣硬化

RA是一種與重大發(fā)病率和死亡率有關(guān)的慢性全身性炎癥性疾病，這種疾病的特征表現(xiàn)為可導(dǎo)致疼痛、腫脹以及關(guān)節(jié)損傷的多關(guān)節(jié)炎癥。近年來(lái)，心血管疾病已經(jīng)成為其主要的死亡原因之一，已逐漸受到人們的注意。研究顯示RA患者平均預(yù)期壽命縮短了5～10年，而并發(fā)心血管疾病的危險(xiǎn)性增加了2～5倍。目前，國(guó)內(nèi)外的研究者認(rèn)為，慢性炎性疾病需作為心血管事件發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，應(yīng)足夠引起重視。

大部分的RA患者在心血管系統(tǒng)的改變是以動(dòng)脈粥樣硬化為主，血脂代謝紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化的一個(gè)重要發(fā)病機(jī)制。研究顯示，RA患者與對(duì)照健康組相比存在血脂代謝紊亂，其血脂變化更會(huì)引起致動(dòng)脈粥樣硬化。研究認(rèn)為，RA患者中載脂蛋白和脂蛋白類型均有不同程度的變化，與RA的疾病活動(dòng)性有關(guān)。

MMP-3是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）家族中基質(zhì)溶解素的一種。MMP-3可降解彈性蛋白、膠原蛋白等多種成分，使纖維帽穩(wěn)定性降低，并且易于破裂。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中常富含大量炎癥細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、MMP-3、IL-6等，巨噬細(xì)胞可分泌MMP-3，MMP-3又可以反饋性的促使巨噬細(xì)胞增殖。這些均提示動(dòng)脈粥樣硬化的形成與MMPs之間有著密切的關(guān)系。

目前，對(duì)于RA患者是否伴有傳統(tǒng)意義上的致動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素的研究結(jié)果并不一致，活動(dòng)性RA患者升高的MMP-3是否對(duì)心血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能產(chǎn)生影響，缺乏進(jìn)一步的相關(guān)性研究。本研究主要觀察活動(dòng)期RA患者的MMP-3及AIP水平的改變情況，初步探討了在RA患者中MMP-3與AIP之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1～10月我院風(fēng)濕免疫科收治的RA患者133例作為研究對(duì)象。其中女122例，男11例；年齡21～72歲，平均年齡（41.18±11.01）歲。選取同期正常人100名作為健康組。其中女78名，男22名；年齡24～66歲，平均年齡（40.28±19.12）歲。

未用過(guò)抗風(fēng)濕（DMARD）藥物或激素治療，所有患者均除外有心血管危險(xiǎn)因素，如糖尿病、高血脂、吸煙、高血壓、Cushing's綜合癥、腎臟疾病等。所有患者均符合ACR/EULAR2009年修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集

采集患者及健康志愿者空腹靜脈血5 mL，2 h內(nèi)離心分離血清，于-20℃凍存，用于血清抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP）、MMP-3檢測(cè)?？笴CP抗體采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELELISA）方法，MMP-3采用免疫比濁法，試劑購(gòu)置上海華臣試劑有限公司，在全自動(dòng)生化儀上進(jìn)行檢測(cè)，完成質(zhì)控品和樣本檢測(cè)。

1.2.2 其他指標(biāo)

C反應(yīng)蛋白（CRP）用全自動(dòng)免疫速率散射比濁法，CRP以mg/L表示，血沉（ESR）用魏氏法，以mm/1 h表示，總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）用氧化酶法，高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、用抗體免疫分離法，結(jié)果均以mmol/L表示，血漿AIP，AIP=log（TG/HDL-C）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距描述，采用Wilcoxon test進(jìn)行組間比較。各臨床和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)之間的相互關(guān)系采用Spearman相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組MMP-3、血脂、致動(dòng)脈粥樣指數(shù)比較

RA組MMP-3指數(shù)為105.10低于健康組的35.20（P＜0.05）。血脂水平：RA的血清總膽固醇（5.62±1.61）mmol/L高于健康組的（5.14±1.15）mmol/L，甘油三脂（1.46±0.76）mmol/L高于健康組的（1.06±0.57），高密度脂蛋白水平（1.24±0.11）mmol/L低于健康組的（1.32±0.74）mmol/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。RA患者的AIP值（0.83±0.31）明顯高于健康組的（0.21±0.18），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1、圖1。

表1 兩組臨床資料比較

圖1 兩組MMP-3水平分析（ng/mL）健康組：35.20（25.90～48.90）；RA組：105.10（32.60～622.6）

2.2 不同疾病活動(dòng)性RA患者的MMP-3水平比較

所有患者按DAS28結(jié)果分為臨床緩解期（DAS28≤2.6）、輕度活動(dòng)期（2.6＜DAS≤3.2）、中度活動(dòng)期（3.2＜DAS≤5.1）、高度活動(dòng)期（DAS28＞5.1）四組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中、重度活動(dòng)度RA患者M(jìn)MP-3水平分別為281.1、33.40，較穩(wěn)定期的363.1和健康組的33.40明顯升高（P＜0.05）。輕度活動(dòng)期組的54.25與穩(wěn)定期組的33.40和健康組的35.20比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)圖2。

圖2 RA患者不同活動(dòng)度間MMP-3的水平分析（ng/mL）

健康組：35.20（25.90～48.90）；穩(wěn)定期RA組33.40（22.60～118.4）；輕度活動(dòng)性RA組54.25（33.23～81.60）；中度疾病活動(dòng)度RA患者281.1（61.70～172.7）；重度疾病活動(dòng)度RA患者363.1（161.5～475.9）

2.3 MMP-3和致動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)以及其他指標(biāo)之間的相關(guān)性分析

采用Spearman相關(guān)分析方法。結(jié)果顯示，MMP-3水平與AIP（r=0.456，P＜0.05）、DAS28（r=0.757，P＜0.05）、HAQ（r=0.570，P＜0.05）、血沉（r=0.576，P＜0.05）呈正相關(guān)。見(jiàn)表2。

表2 各項(xiàng)指標(biāo)間的相關(guān)性分析

3 討 論

目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于RA中的血清學(xué)MMP-3水平改變和AIP之間的關(guān)系研究甚少，本研究觀察了RA患者的MMP-3和AIP水平，探討它們之間的相互關(guān)系。

RA患者M(jìn)MP-3水平較健康組有顯著增高［1-5］，并且MMP-3與血沉、DAS28、HAQ呈正相關(guān)，相對(duì)于血沉，MMP-3水平與DAS28相關(guān)性最高，提示在評(píng)估RA疾病活動(dòng)性上，MMP-3優(yōu)于血沉。在RA患者的功能評(píng)估方面，MMP-3與HAQ呈正相關(guān)，因HAQ是功能性評(píng)分，故進(jìn)一步提示MMP-3能預(yù)測(cè)RA患者的日常生活功能水平。這與國(guó)外報(bào)道的MMP-3結(jié)果類似。日本學(xué)者分析了1265例RA患者的血清MMP-3水平，發(fā)現(xiàn)MMP-3值與DAS28，CRP，ESR，HAQ和患者的總體評(píng)價(jià)水平相關(guān)。并且MMP-3+/RF+的患者M(jìn)MP-3-/RF-的患者疾病進(jìn)展更快。本研究還發(fā)現(xiàn)MMP-3在RA患者中尤其是中、重度病情活動(dòng)度患者中明顯升高，提示MMP-3可以用來(lái)評(píng)估中重度RA的活動(dòng)性。但另一方面MMP-3在輕度，穩(wěn)定期和健康健康組之間無(wú)明顯差異，提示MMP-3并不能很好的區(qū)別輕度、穩(wěn)定期RA患者和健康人群，這可能與MMP-3的作用機(jī)制有關(guān)，輕度或穩(wěn)定期的RA患者滑膜處于少許炎癥階段，無(wú)大量的軟骨和骨質(zhì)的破壞，故關(guān)節(jié)中的成纖維細(xì)胞并未分泌出大量的MMP-3。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)MMP-1和MMP-3可受到炎性因子的誘導(dǎo)性分泌，作為降解軟骨和骨基質(zhì)的重要成分，參與RA的關(guān)節(jié)損傷。國(guó)內(nèi)外關(guān)于MMP-3的研究很少涉及到區(qū)分RA的活動(dòng)性，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，MMP-3是一個(gè)炎性指標(biāo)，與活動(dòng)性相關(guān)，但不能用來(lái)作為RA的診斷指標(biāo)。

RA患者血脂水平較健康組有顯著性增高［6-10］，RA患者AIP亦有明顯升高增高。Dobiasova等通過(guò)大樣本的研究，發(fā)現(xiàn)用log（TG/HDL-C）作為血漿的AIP，可直接反映受試者動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的危險(xiǎn)性。RA患者好發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制目前仍未得到明確的結(jié)果，但已有研究認(rèn)為包括炎癥反應(yīng)狀態(tài)，內(nèi)皮細(xì)胞損害、高半胱氨酸、高炎癥介質(zhì)等等都與之有關(guān)。

目前，有些觀點(diǎn)認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化亦是一種炎癥反應(yīng)，Sattar等研究顯示，滑膜組織產(chǎn)生如腫瘤壞死因子（TNF-α），白介素-1（IL-1）和白介素-6（IL-6）等促炎癥細(xì)胞因子，可以釋放到血液循壞系統(tǒng)，并且進(jìn)入到遠(yuǎn)處的脂肪組織，骨骼肌，肺部和血管內(nèi)皮組織等組織，促使動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。國(guó)外一項(xiàng)研究還證實(shí)了，RA患者中內(nèi)皮損害的存在，在這項(xiàng)研究中共有RA患者32例，均無(wú)心血管危險(xiǎn)因素存在的輕度活動(dòng)性及穩(wěn)定期患者。發(fā)現(xiàn)這批患者中動(dòng)脈血管的擴(kuò)張反應(yīng)有明顯改變，提示處于動(dòng)脈粥樣硬化的亞臨床狀態(tài)。另有研究顯示，RA患者致密LDL小顆粒、TNF-α、IFN-γ、分泌型磷脂酶A2-ⅡA、ICAM、CRP、纖維蛋白原（Fb）等致炎致粥樣硬化因子血清水平與健康組相比顯著增高，推測(cè)出致粥樣硬化因子與炎癥介質(zhì)具有協(xié)同作用，同時(shí)伴有HDL水平下降，這些均共同促進(jìn)RA心血管并發(fā)癥的發(fā)生。

本研究首次發(fā)現(xiàn)RA患者的MMP-3和AIP之間亦有相關(guān)性。目前，研究已發(fā)現(xiàn)基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖，促使其突破彈力層，向內(nèi)膜移行，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊的形成。不同的MMPs在斑塊的不同部位不同階段均發(fā)揮者不同的作用，近年國(guó)外的臨床試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在頸動(dòng)脈斑塊潰瘍處MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平顯著升高，而TIMP-3表達(dá)最高穩(wěn)定和最低易損斑塊，提示金屬蛋白酶家族與纖維帽形成及斑塊破裂出血有密切聯(lián)系。在國(guó)內(nèi)，馬巖萍等分析了131例原發(fā)性高血壓（EH）伴頸動(dòng)脈粥樣硬化（CAS）的患者，發(fā)現(xiàn)MMP-3-1171 5A/6A基因多態(tài)性可能與漢族EH患者伴CAS有關(guān)［11］，6A等位基因可能增加了EH患者伴發(fā)CAS的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，MMP-3與疾病的活動(dòng)性有關(guān)，臨床上可以用來(lái)評(píng)估RA的活動(dòng)性。MMP-3還與AIP有關(guān)，提示MMP-3有可能參與RA的心血管疾病的發(fā)生。

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本文編輯：孫春宇

·臨床護(hù)理·

R587.1

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ISSN.2095-6681.2015.032.126.04