2013年銅陵市人民醫院細菌耐藥性監測

胡志軍， 朱娟娟， 潘曉龍， 張 盛， 陳 然， 潘 愷， 邢小平， 唐吉斌

·論著·

2013年銅陵市人民醫院細菌耐藥性監測

胡志軍， 朱娟娟， 潘曉龍， 張 盛， 陳 然， 潘 愷， 邢小平， 唐吉斌

目的 了解安徽省銅陵市人民醫院2013年臨床分離細菌對抗菌藥物的耐藥狀況。方法 共收集2013年臨床分離的2 281株非重復細菌，采用紙片擴散法（K-B）進行藥敏試驗，按C LSI 2012年版標準判讀藥敏試驗結果，采用 W H O N E T5.6軟件進行數據分析。結果 分離菌中革蘭陰性菌占76.5%，革蘭陽性菌占23.5%。居前5位的分離菌依次為：大腸埃希菌479株（21.0%）、肺炎克雷伯菌360株（15.8%）、鮑曼不動桿菌271株（11.9%）、銅綠假單胞菌240株（10.5%）、金黃色葡萄球菌（金葡菌）171株（7.5%）。耐甲氧西林金葡菌（M RS A）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（M R C N S）的檢出率分別占金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌的38.6%和73.1%。甲氧西林耐藥株對β內酰胺類抗生素和其他測試抗菌藥物的耐藥率顯著高于甲氧西林敏感株；未發現對萬古霉素和替考拉寧耐藥的葡萄球菌。糞腸球菌對青霉素、氨芐西林、呋喃妥因的耐藥率較低，屎腸球菌對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌。大腸埃希菌和克雷伯菌屬中產 ESBL的檢出率分別為50.5%和44.5%，產ESBL菌株對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產ESBL菌株。檢出對碳青霉烯類抗生素耐藥的克雷伯菌屬81株（21.8%，81/371）和大腸埃希菌8株（1.7%，8/479）。鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為75.0%和76.0%；銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為29.8%和23.4%，對阿米卡星的敏感率最高，為94.0%。結論該院臨床分離菌對抗菌藥物的耐藥性呈增長趨勢，尤其耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌的出現應引起高度關注，應加強抗菌藥物的合理使用和醫院感染控制措施。

細菌耐藥性監測； 抗菌藥物； 多重耐藥菌； 碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌

隨著抗菌藥物在臨床的廣泛應用，多重耐藥和泛耐藥菌株日益增多，已成為公共衛生領域的嚴重問題［1］，尤其是近年碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌的逐漸增多，臨床抗感染治療面臨著嚴峻的考驗。我院微生物室近些年定期開展細菌耐藥性監測工作，現將2013年監測結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 收集2013年1—12月我院臨床分離的2 281株細菌（剔除同一患者同一部位重復分離菌株）。

1.1.2 抗菌藥物紙片和E試驗條 抗菌藥物紙片為英國O X OID公司產品。青霉素、萬古霉素、亞胺培南E試驗條為法國生物梅里埃公司產品。

1.1.3 培 養 基 藥 敏 試 驗用 M ueller-Hinton（M H）培養基、血液培養基等選用合肥天達診斷試劑有限公司和法國生物梅里埃公司產品。

1.2.1 菌種鑒定和藥敏試驗 細菌培養嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版［2］操作程序進行，細菌鑒定采用法國生物梅里埃公司生產的 VIT E K-2型全自動微生物鑒定儀。藥敏試驗按C LSI推薦的 Kirby-Bauer紙片擴散法進行，結果判斷依據C LSI 2012年［3］推薦的標準。質控菌株為大腸埃希菌 A T C C 25922、金黃色葡萄球菌（金葡菌）A T C C 25923和銅綠假單胞菌A T C C 27853。

1.2.2 ESB L及耐甲氧西林葡萄球菌（M R S）檢測

采用C LSI推薦的方法檢測ESB L，用頭孢西丁檢測甲氧西林耐藥金葡菌（M R S A）和凝固酶陰性葡萄球菌（M R C N S）。

1.2.3 耐萬古霉素腸球菌（V R E）檢測 萬古霉素紙片法測定為非敏感菌株者，用萬古霉素和替考拉寧E試驗條測定 M IC值確認。

1.2.4 統 計學處理 細菌藥 敏試驗結果采用W H O N E T 5.6軟件統計分析。

2 結果

2.1 菌種構成及來源

2.1.1 菌種構成 2 281株細菌中革蘭陰性菌占76.5%，革蘭陽性菌占23.5%。居前5位的細菌依次為：大腸埃希菌479株（21.0%）、肺炎克雷伯菌360株（15.8%）、鮑曼不動桿菌271株（11.9%）、銅綠假單胞 菌 240 株 （10.5%）、金 葡菌171 株（7.5%）。見表1。2 281株細菌中，954株（41.8%）分離自呼吸道標本，506株（22.2%）分離自傷口膿液標本，457株（20.0%）分離自尿液標本，170株（7.5%）分離自無菌體液標本，141株（6.2%）分離自血液標本，43株（1.9%）分離自糞便標本，10株（0.4%）分離自其他標本。在呼吸道標本中列前4位的細菌分別是肺炎克雷伯菌（25.7%）、鮑曼不動桿菌（23.5%）、銅綠假單胞菌（16.7%）和金葡菌（8.6%）；傷口膿液標本中列前3位的細菌分別是大腸埃希菌（30.2%）、金葡菌（12.8%）和肺炎克雷伯菌（9.5%）；尿液標本中列前3位的細菌分別是大腸埃希菌（43.1%）、屎腸球菌（8.8%）和肺炎克雷伯菌（7.7%）；血液標本中列前3位的細菌分別是表皮葡萄球菌（22.0%）、大腸埃希菌（15.6%）和肺炎克雷伯菌（9.9%）。104株凝固酶陰性葡萄球菌（C N S）全部分離自血液、腦脊液等無菌體液標本。

2.1.2 標本來源 本組分離菌來自于重癥監護病房（IC U）348株（15.3%）、普外科278株（12.2%）、呼吸科223株（9.8%）、泌尿外科201株（8.8%）、腎內科131株（5.7%）、急診科129株（5.7%）、腫瘤科125株（5.5%）、骨科124株（5.4%）、干部內科111株（4.9%）、腦外科77株（3.4%）、燒傷科74株（3.2%）、感染 科 69 株（3.0%）、消 化 科 65 株（2.8%）、中醫風濕科49株（2.1%）、心血管科48株（2.1%）、內分泌科48株（2.1%）、神經內科46株（2.0%）、兒科34株（1.5%）、胸外科32株（1.4%）、婦產科29株（1.3%）和其他科室40株（1.8%）。

552 Attentional bias towards emotional information in test-anxiety individuals: evidence from eye movement

表1 細菌菌種構成Table 1 Distribution of bacterial species in 2013

2.2 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的敏感率和耐藥率

2.2.1 葡萄球菌屬 金葡菌中M R S A占38.6%（66/171），C N S中 M R C N S占73.1%（76/104）。M R S A和M R C N S對β內酰胺類、氨基糖苷類、喹諾酮類和大環內酯類等抗菌藥物的耐藥率明顯高于甲氧西林敏感金葡菌（M SS A）和甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（M SC N S）。M R C N S對甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑的耐藥率明顯高于 M R S A（69.7%對33.8%），但對利福平的耐藥率則顯著低于 M R S A（12.2%對55.6%）。M R S A 中分別有66.2%和44.4%菌株對甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑和利福平敏感，M R C N S中分別有87.8%和61.4%的菌株對利福平和四環素敏感，未發現對萬古霉素和替考拉寧耐藥的菌株。見表2。

2.2.2 腸球菌屬 177株腸球菌屬細菌中，糞腸球菌 占49.7% （88/177），屎 腸球菌 占47.5%（84/177），其他腸球菌占2.8%（5/177）。糞腸球菌對氨芐西林、青霉素和呋喃妥因的敏感率較高，分別為96.6%、96.6%和93.2%，屎腸球菌對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于糞腸球菌，未發現對萬古霉素和替考拉寧耐藥的糞腸球菌和屎腸球菌。見表3。

表2 葡萄球菌屬細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility ofStaphylococcusstrains to antimicrobial agents in terms of resistance to methicillin（%）

表3 糞腸球菌和屎腸球菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility ofE.faecalisand E.faeciu mto antimicrobial agents（%）

2.2.3 鏈球菌屬 54株鏈球菌屬細菌中，β溶血鏈球菌（A、B、C、G群分別為9、8、1、3株）占38.9%（21/ 54），分離自無菌體液標本中的草綠色鏈球菌占37.0%（20/54），肺炎鏈球菌占24.1%（13/54）。β溶血鏈球菌和肺炎鏈球菌對青霉素敏感率100%，15.0%草綠色鏈球菌對其耐藥；β溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌對紅霉素耐藥率分別為47.6%、92.3%和45.0%，對左氧氟沙星耐藥率分別為4.8%、7.7%和15.0%；未發現對萬古霉素耐藥株。

2.3 主要革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的敏感率和耐藥率

2.3.1 腸桿菌科細菌 腸桿菌科細菌（除克雷伯菌屬外）對阿米卡星和碳青霉烯類抗生素（亞胺培南和美羅培南）最敏感（敏感率＞90%），對頭孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的敏感性較高；克雷伯菌屬對亞胺培南和美羅培南的耐藥率（21.8%和20.5%）較高；大腸埃希菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為1.7%和1.5%；其他腸桿菌科細菌未檢出對碳青霉烯類耐藥的菌株。見表4。33株沙門菌屬中，31株分離自糞便標本，各有1株分離自血液和引流液標本；沙門菌屬對氨芐西林、甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑和環丙沙星的耐藥率分別為69.7%、35.5%和6.1%，敏感率分別為30.3%、51.6%和75.8%；7株志賀菌屬全部分離自糞便標本，福氏志賀菌4株，痢疾、鮑氏和宋內志賀菌各1株，7株志賀菌屬有6株對氨芐西林耐藥，4株對甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑耐藥；5株對環丙沙星敏感。

表4 腸桿菌科細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility ofEnterobacteriaceaespecies to antimicrobial agents（%）

2.3.2 大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌中產ESB L株 大腸埃希菌、克雷伯菌屬和奇異變形桿菌中產 ESB L株分別占50.5%（242/479）、44. 5%（165/371）和21.4%（3/14）。大腸埃希菌和克雷伯菌屬中產ESB L菌株對青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類和氨基糖苷類等抗菌藥物的耐藥率均顯著高于非產ESB L菌株，產ESB L克雷伯菌屬細菌對大多數抗菌藥物的耐藥率均高于大腸埃希菌。見表5。

2.3.3 不發酵糖革蘭陰性桿菌 不動桿菌屬中以鮑曼不動桿菌為主（94.4%，271/287），該菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率≥75%，對頭孢哌酮-舒巴坦的耐藥率最低（48.3%），對阿米卡星的敏感率最高（43.4%），對大多數監測抗菌藥物的耐藥率均＞70%；銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為29.8%和23.4%；對阿米卡星的敏感率最高，為94.0%，對哌拉西林-他唑巴坦、環丙沙星、頭孢吡肟和頭孢哌酮-舒巴坦的耐藥率均＜20%。嗜麥芽窄食單胞菌對米諾環素和左氧氟沙星的敏感率均＞90%。見表6。

2.3.4 腸桿菌科細菌中碳青霉烯類抗生素耐藥株

我院2011年首次監測到碳青霉烯類抗生素耐藥腸桿菌科細菌（C R E），近2年來此類耐藥株顯著增多。2011年監測到4.7%（8/171）的耐碳青霉烯類克雷伯菌屬細菌和1株耐碳青霉烯類弗勞地枸櫞酸桿菌；2012年監測到21.2%（54/255）耐碳青霉烯類克雷伯菌屬細菌和0.8%（3/379）耐碳青霉烯類大腸埃希菌；2013年監測到21.8%（81/371）耐碳青霉烯類克雷伯菌屬細菌和1.7%（8/479）耐碳青霉烯類大腸埃希菌。

表5 大腸埃希菌和克雷伯菌屬產ESBL與非產ESBL株對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of ESBLs producers and non-ESBLs producers to antimicrobial agents（%）

表6 不發酵糖革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-fermentative gram negative bacilli to antimicrobial agents（%）

2.4 多重耐藥菌和泛耐藥革蘭陰性桿菌監測情況

多重耐藥菌株是指對檢測的3類或以上不同化學結構的抗菌藥物同時呈現耐藥的細菌。多重耐藥菌在鮑曼不動桿菌中占75.6%（205/271），大腸埃希菌中占50.5%（242/479），克雷伯菌屬中占46.4%（172/371），金葡菌中占38.6%（66/171），銅綠假單胞菌中占16.3%（39/240）。本文中泛耐藥革蘭陰性桿菌指革蘭陰性桿菌對除替加環素和黏菌素外全部測試抗菌藥物耐藥的細菌。泛耐藥鮑曼不動桿菌檢出率5.5%（15/271），泛耐藥克雷伯菌屬檢出率0.3%（1/371）。

3 討論

本次監測結果與本院2012年［4］相比，臨床分離的總菌株數增加13.9%。除志賀菌屬、變形桿菌屬和枸櫞酸桿菌屬有所減少外，大多數腸桿菌科細菌都有所增多，其中肺炎克雷伯菌所占比率上升至第2位，與近 2年中 國C HIN E T 監測［5-6］和上海地區監測數據［7-8］相一致，也與我院這2年碳青霉烯類抗生素耐藥肺炎克雷伯菌增多有關。

本次監測資料顯示，我院M RSA和 M RC NS的檢出率分別為38.6%和73.1%，低于近2年中國C HIN E T監測和上海地區監測數據［5-8］。金葡菌中M RSA的檢出率與2012年（47.6%）相比有明顯下降趨勢，這與相關報道的趨勢較一致［5-8］，并且金葡菌對大多數抗菌藥物的耐藥率均有所降低，仍未發現對萬古霉素和替考拉寧不敏感的菌株。腸球菌屬中仍以糞腸球菌（49.7%）多于屎腸球菌（47.5%），但屎腸球菌有明顯上升的趨勢，屎腸球菌對大多數抗菌藥物的耐藥率顯著高于糞腸球菌，但對四環素的耐藥率低于糞腸球菌；耐藥率與往年相比無明顯變化。

本次監測數據顯示，大腸埃希菌和克雷伯菌屬中ESB L的檢出率分別為50.5%和44.5%，與往年相比克雷伯菌屬增加明顯，并且高于近2年中國C HIN E T 監 測和上 海 地 區 監測數據［5-8］。 另 外，2013年監測到21.8%（81/371）的耐碳青霉烯類克雷伯菌屬細菌和1.7%（8/479）耐碳青霉烯類大腸埃希菌，與前2年相比，上升趨勢明顯，并且已經高于2012年中國 C HIN E T監測和上海地區監測數據［6，8］。耐碳青霉烯類克 雷伯菌屬 細菌的 科室分布仍以IC U為主（占60.5%），提示可能存在耐藥克隆株的傳播，需要嚴密監測，并對相關科室進行流行病學調查，查找感染源和傳播途徑，采取有效的感染控制措施。該類細菌常帶有多種耐藥基因，導致對多數或全部現有抗菌藥物耐藥，成為臨床治療的難題［9-11］。目前有資料顯示，多 黏菌素類、替 加環 素、磷霉素和阿米卡星對C R E菌株有良好的抗菌活性，且推薦上述抗菌藥物聯合療法，可采用的給藥方案如黏菌素或阿米卡星聯合碳青霉烯類，黏菌素聯合替加環素，阿米卡星聯合磷霉素等，但不推薦多黏菌素 與 阿米 卡 星聯 合［12-13］。

2013年細菌耐藥性監測結果顯示，鮑曼不動桿菌已經由往年我院醫院感染第2位病原菌降為第3位［4］，該菌的耐藥現象依然非常嚴重，但對美羅培南（94.4%下降為76.0%）和亞胺培南（84.0%下降為75.0%）的耐藥率下降較為明顯。銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥率與往年相比無明顯變化，該菌對阿米卡星的敏感率達94.0%，對環丙沙星、頭孢吡肟、慶大霉素和頭孢他啶的敏感率＞70%，臨床治療該細菌感染時應注意其耐藥性變化。嗜麥芽窄食單胞菌的檢出率有增加趨勢，需要引起重視，該菌對C LSI推薦的左氧氟沙星、甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑和米諾環素的耐藥率均較低；對左氧氟沙星和米諾環素的敏感率均＞90%。

本次監測數據顯示我院多重耐藥革蘭陰性桿菌呈增多趨勢，且伴有少量泛耐藥的鮑曼不動桿菌和克雷伯菌屬，須引起高度重視。

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Surveillance of bacterial resistance in Tongling People′s Hospital during 2013

H U Zhijun，Z H UJuanjuan，P A NXiaolong，Z H A N GSheng，C H E NRan，P A N K ai，XI N G Xiaoping，T A N G Jibin. （Departmentof Laboratory M edicine，Tongling People′s H ospital，Tongling A nhui 244000，China）

Objective To investigate the antimicrobial resistance of clinicalisolates in Tongling People′s H ospital during 2013. M ethods A total of 2 281 nonduplicate clinicalisolates were collected.Kirby-Bauer disc diffusion method was em ployed to study the antimicrobial susceptibility.The data were analyzed with W H O N E T 5.6 software according to C LSI 2012 breakpoints. Results The top 5 m ost frequently isolated microorganisms wereE.coli（479，21.0%），K.pneu moniae（360，15.8%），A. bau m annii（271，11.9%），P.aeruginosa （240，10.5%），S.aureus （171，7.5%）.Gramnegative and grampositive microorganisms accounted for 76.5% and 23.5%，respectively.The prevalence of methicillin-resistant strains inS.aureus（M RS A）and coagulase negativeStaphylococcus（M R C N S）was 38.6%and 73.1%，respectively.The resistance rates of M R strains to beta-lactams and other antimicrobial agents were m uch higher than those of M S strains.No staphylococcal strain was found resistant to vanco m ycin or teicoplanin.E.faecalisshowed relatively lower resistance to penicillin，am picillin and nitrofurantoin.E.faeciu mstrains were m ore resistant thanE.faecalisto m ost of the antibiotics tested.A pproximately 50.5%ofE.coliand 44.5% ofKlebsiellaisolates produced extended-spectru mbeta-lactamases（ESBLs）.The ESBLsproducing strains were significantly m ore resistant to m ost of the antibiotics than the corresponding non-ESBLs-producing strains.The prevalence of carbapenem-resistant strains was 21.8% （81/371）inKlebsiellaspp.and 1.7%（8/479）inE. coli.The percentage ofA.bau m anniistrains resistant to imipenem and meropenem was 75.0% and 76.0%，respectively.A nd 29.8%and 23.4% of theP.aeruginosastrains were resistant to imipenem and meropenem.Nearly all（94.0%）P.aeruginosaisolates were susceptible to amikacin.Conclusions There appears a trend ofincreasing resistance in the clinical bacterialisolates in this hospital，especially the carbapenem-resistantEnterobacteriaceae，w hich is of great concern.It is mandatory to take effective antibiotic policy and infection control measures.

bacterial resistance surveillance；antimicrobial agent；m ulti-drug resistant bacteriu m；carbapenem-resistant Enterobacteriaceae

R378

A

1009-7708（2015）01-0017-07

2014-03-27

2014-05-22

安徽省銅陵市衛生局科研課題資助項目（衛科研［2013］14號）。

銅陵市人民醫院檢驗科，安徽銅陵 244000。

胡志軍（1982—），男，碩士，主管檢驗師，主要從事臨床微生物檢驗和細菌耐藥機制研究。

潘曉龍，E-mail：panxl1030@msn.co m。