高密度脂蛋白膽固醇兩種直接測定法試劑性能的評價

蔡惠萍

（上海市楊浦區中心醫院檢驗科，上海 200090）

高密度脂蛋白膽固醇兩種直接測定法試劑性能的評價

蔡惠萍

（上海市楊浦區中心醫院檢驗科，上海 200090）

目的對比評價高密度脂蛋白膽固醇免疫分離法和化學修飾法試劑性能。方法對兩種方法進行精密度、線性、干擾評價，并對二者進行相關性分析。結果兩種方法精密度，線性，抗干擾都符合要求，且具有較好的相關性，免疫分離法抗干擾優于化學修飾法。結論兩種測定方法皆適用于臨床自動化檢測。

高密度脂蛋白膽固醇；性能評價

高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）是常規血脂測定的重要項目之一，是解釋膽固醇測定結果的基礎。HDL-C對冠心病具有很高的預見性，可用于動脈粥樣硬化危險的檢測，還可用于降脂藥物治療的監測。目前，臨床生化已基本實現在全自動化分析儀上直接測定HDL-C。現對直接測定法中的免疫分離法（immuno-separation，IS）[1]和PEG修飾酶/硫酸α2環糊精法（ployethyleneglycolmodifiedenzyme/ α-cyclodextrin2sulfate，PEGME）[2]進行試劑性能評價。

1 材料與方法

1.1 儀器：美國BECKMAN COULTER AU5821全自動生化分析儀。

1.2 試劑：免疫分離法試劑為美國BECKMAN COULTER高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒?；瘜W修飾法為日本協和高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒。校準品與質控品皆為相應公司配套產品。

1.3 方法

1.3.1 精密度測定：取混合新鮮血清，2個濃度水平。樣本在一批內連續檢測20次，計算批內精密度。兩種濃度的混合血清每天分別用兩種方法測定1次，連續測定20 d，計算批間精密度。

1.3.2 線性分析：取高、低值患者標本各一份，按不同比例混合，每個混合濃度重復測定2次，記錄結果，統計數據，剔除離群值。采用線性回歸分析，以預期值為X，實測均值為Y，得線性方程Y=aX+b。

1.3.3 干擾試驗：取乳糜血清（三酰甘油＞10 mmol/L），黃疸血清（總膽紅素＞100 μmol/L），溶血血清（血紅蛋白濃度＞3 g/L），分別用兩種方法測回收率。

1.3.4 相關性分析：相關性分析采用Pearson相關分析。

1.4 統計學方法：采用SPSS10.0統計軟件，計量資料以（）表示，均數比較用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 精密度評價：免疫分離法和化學修飾法低、高兩種濃度的混合血清批內精密度CV分別為1.88和2.01，均＜1/4 CLIA'88（HDL-C CLIA'88質量要求CV為10%）要求，結果見表1。批間精密度CV分別為2.21和

2.45 ，均＜1/3 CLIA'88要求，結果見表2。

2.2 線性評價：免疫分離法回歸方程為Y=1.01X+0.85，r2=0.98(P＜0.05)；化學修飾法回歸方程為Y=1.02+1.2，r2=0.97(P＜0.05)。a值在(1±0.03)范圍內，相關系數r≥0.975，兩種測定方法在實驗所涉及的濃度范圍內成線性。

2.3 干擾試驗評價：加入乳糜血清，免疫分離法和化學修飾法回收率分別為97.22%、90.56%。加入黃疸血清，兩種方法回收率分別為98.15%、98.83%。加入溶血血清，兩種方法回收率分別為96.91%、97.05%。兩種測定方法都有一定的抗干擾能力，免疫分離法抗血脂干擾優于化學修飾法。

2.4 相關性分析：兩種方法回歸方程為：Y=1.21X+0.08，r2=0.96（P＜0.05），兩種方法顯著正相關。

表1 兩種方法批內精密度（）

表1 兩種方法批內精密度（）

方法 低濃度(mmol/L) 高濃度(mmol/L)免疫分離法 0.84±0.06 1.90±0.07化學修飾法 0.80±0.06 1.85±0.10

表2 兩種方法批間精密度（）

表2 兩種方法批間精密度（）

方法 低濃度(mmol/L) 高濃度(mmol/L)免疫分離法 0.80±0.05 1.8±0.09化學修飾法 0.81±0.06 1.75±0.12

3 討 論

研究表明高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）是冠狀心血管疾病“陰性”危險因素。HDL-C被認為是人體內具有抗動脈粥樣硬化的脂蛋白，不僅參與膽固醇的逆轉運過程，還可能具有抗炎、抗氧化和保護血管內皮功能[3]。由于所有脂蛋白都含有膽固醇（Chol），因此必須從其他脂蛋白中分離出高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）后再行測定。HDL-C直接測定法方法簡便、快速，能進行自動化分析，已在臨床實驗室廣泛應用。

隨著檢驗醫學的發展，檢測系統逐漸多樣化、規模化，對檢測質量的標準化的要求應運而生，所以不同檢測方法間分析結果的比對是當今檢驗工作者討論和關注的熱點[4]，免疫分離法利用抗脂蛋白抗體與乳糜微粒（CM）、低密度脂蛋白（LDL）和極低密度脂蛋白（VLDL）的特異性結合，膽固醇酶系與不被抗體結合的HDL發生反應，從而達到測定目的。化學修飾法首先使試劑中聚陰離子吸附到LDL與VLDL上形成穩定的復合物，然后用表面活性劑將游離HDL顆粒彌散、溶解，同時膽固醇酶系與之發生酶促反應來實現HDL-C測定的目的。目前臨床生化相對應用廣泛的是化學修飾法，國內研究亦大多局限于此法[5]。

本研究通過免疫分離法和化學修飾法兩種直接測定法的試劑性能評價，結果發現兩種方法精密度、線性、抗干擾能力都符合要求，且兩種方法顯著相關，兩種方法皆適于臨床實驗室檢測。相比較而言，免疫分離法比化學修飾法抗高三酰甘油干擾能力更強一些，更適合于檢測高血脂患者。

[1]Kakuyama T,Kimura S,Hashiguc H.HDL cholesterol from human serum with Hitachi911[J].Clin Chem,1994,40:1104.

[2]HarrisN,GalpchianV,ThomasJ,et al.Three generation sofhighdensity lipoprotein Cholesterol assays compared with ultracentrifugation/dextran sulfate Mg2+ method[J].Clin Chem,1997,43 (5):817.

[3]劉景惺,劉景程.兩種高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒的分析性能研究[J].中國中醫藥資訊,2011,3(18):15.

[4]秦先兵,黃蓋鵬.4種試劑檢測高密度脂蛋白膽固醇的方法比對[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(16):2165-2166.

[5]唐吉斌,趙鐵軍.高密度脂蛋白膽固醇直接測定法的研究進展[J].醫學綜述,2009,15(4):610-612.

Two High-density Lipoprotein Cholesterol Directly Performance Evaluation of Assay Reagents

CAI Hui-ping
(Department of Clinical Laboratory, Yangpu District Central Hospital, Shanghai 200090, China)

ObjectiveTo determine the comparative evaluation of high-density lipoprotein cholesterol, immune separation and chemical modification.MethodsThe evaluation of the precision of the two methods, linear evaluation, the evaluation of interference, and to analyze the correlation between the two.ResultsBoth methods precision, linearity, interference meet the requirements, and has a good correlation, interference immunity separation method is superior to chemical modification.ConclusionBoth measuring methods are suitable for clinical testing.

High-density lipoprotein cholesterol; Performance Evaluation

R446.11

B

1671-8194（2015）02-0047-02