幽門螺桿菌感染、p53和VEGF表達水平與胃癌的關系

幽門螺桿菌感染、p53和VEGF表達水平與胃癌的關系

穆桂芳穆雪峰1畢海靜曲玲譚悅菊孫光喜白厚橋高才華周利克陳文軍董崇海

(青島醫學院附屬威海醫院威海市立二院消化內科，山東威海264200)

摘要〔〕目的探討幽門螺桿菌感染、p53和血管內皮生長因子(VEGF)表達水平與胃癌發生、發展的關系；方法收集120例威海市立二院消化科行胃鏡檢查的門診及住院患者的胃組織樣本和血液樣本，其中胃癌組78例，不典型黏膜組25例、正常黏膜組17例；分別采用病理Warrthin-Starry銀染和ELISA方法觀察不同黏膜組織中幽門螺桿菌感染情況，免疫組化方法觀察組織中p53 和VEGF的表達情況；結果胃癌組、不典型黏膜組幽門螺桿菌感染、p53和VEGF陽性表達率均明顯高于陰性患者(P<0.05)，各組幽門螺桿菌感染陽性患者p53和VEGF陽性表達率明顯高于陰性患者(P<0.05)；結論胃癌與幽門螺桿菌感染存在一定相關性，p53和VEGF可調控細胞凋亡，對胃癌的發生、發展可能起到一定的促進作用。

關鍵詞〔〕幽門螺桿菌；p53；血管內皮生長因子； 胃癌

中圖分類號〔〕R573.9〔文獻標識碼〕A〔

基金項目：威海市科技局科研基金資助(No.2012GNS042-1)

通訊作者：董崇海(1968-)，男，主任醫師，主要從事消化系統腫瘤相關研究。

1吉林大學白求恩第一醫院肝膽胰內科

第一作者：穆桂芳(1967-)，女，主治醫師，主要從事消化系統腫瘤相關研究。

胃癌早期癥狀不典型，致使多數患者錯過了治療的最佳治療時期，選擇特異性高、靈敏度高的胃癌腫瘤標志物成為其臨床診斷的一個研究熱點。幽門螺桿菌(Hp)I型與胃腸道疾病關系密切，隨著研究的不斷深入，人們發現突變型p53、血管內皮生長因子(VEGF)也具有一定的致癌性〔1，2〕。本研究擬探討Hp感染、p53和VEGF的表達情況與胃癌發生發展的關系，為胃癌的早期診斷提供新思路。

1材料與方法

1.1研究對象和樣本收集選擇2013年 6月至 2014 年 6月在威海市立二院門診及住院部行胃鏡檢查的患者120例為研究對象，其中胃癌組78例、不典型黏膜組25例、正常黏膜組17例。各組人群的性別和年齡差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。收集所有研究對象的胃組織樣本和血液樣本。石蠟包埋胃組織樣本備用。

1.2Hp檢測幽門螺桿菌檢測取適量組織行切片檢查，Warrthin-Starry銀染后觀察切片顏色，呈黑色或者棕黑色判定為陽性。采集研究對象非抗凝靜脈血5 ml，1 500 r/min離心5 min后取血清，于-20℃冰箱中保存。統一對血清標本采用ELISA法測定Hp IgG抗體。兩者均為陽性判定該樣本為Hp感染樣本。

1.3p53、VEGF檢測采用免疫組化SP法，選擇p53、VEGF專用試劑盒 (武漢博士德科技有限公司產品) 檢測其表達情況，嚴格按說明書操作。顯微鏡下觀察，細胞核內出現棕黃色或黃褐色顆粒判定為p53基因表達陽性；細胞質出現棕黃色顆粒判定為VEGF表達陽性。

1.4統計學分析采用SPSS17.0軟件，三組正態分布計量資料之間比較采用方差分析，計數資料采用χ2檢驗。

2結果

胃癌組、不典型黏膜組Hp感染、p53和VEGF陽性表達率均明顯高于陰性患者(P<0.05)，各組Hp感染陽性患者p53和VEGF陽性表達率明顯高于陰性患者(P<0.05)，見表1。

表1各組受試者的Hp感染情況和p53和VEGF的表達情況〔n(%)〕

組組Hp感染n p53 VEGF +-+-胃癌組+5238(73.1)1)14(26.9)29(55.8)1)23(44.2)-2615(57.7)11(42.3)16(61.5)10(38.5)不典型黏膜組+1710(58.8)1)7(41.2)9(52.9)1)8(47.1)-85(63.5)3(37.5)6(75.0)2(25.0)正常粘黏組+157(46.7)8(53.3)4(26.7)11(73.4)-202(100.0)02(100.0)

與同組Hp陰性比較:1)P<0.05

3討論

目前的研究認為，Hp長期感染與其他因素共同作用可增加罹患胃癌的可能，Hp感染具有一定的胃癌誘導作用〔3〕。本研究結果表明Hp感染可能是胃癌發生的危險因素。但是目前 Hp主要的致癌機制尚未完全明確，已有的研究多表明Hp具有多種細胞毒素，目前被廣泛認可的與胃癌發生發展有關的細胞毒素是細胞空泡毒素以及細胞毒素相關蛋白。細胞空泡毒素可致胃黏膜上皮壞死，細胞毒素相關蛋白可致胃黏膜發生炎癥反應〔4,5〕。同時，Hp可以分泌一些促進胃癌發生的致癌物質，如亞硝酸鹽等。正常黏膜上皮細胞的增殖與凋亡間的動態平衡決定了胃黏膜組織的結構和功能，一旦兩者失衡就很有可能導致病變甚至是癌變的發生。VEGF是一類可致血管生長特異分裂的誘導因子，可增加血管通透性，導致腫瘤侵襲、轉移，同時，腫瘤快速生長又會導致機體生成更多VEGF〔6〕。本研究結果表明VEGF陽性表達可能與胃癌有關。p53基因一般可分為野生型與突變型兩類。野生型p53屬抑癌基因，可操控細胞增殖及凋亡，但由于野生型p53蛋白半衰期短，免疫組化較難測得，因此均以突變型p53基因作為研究對象。大量研究證實，突變型p53基因可致DNA喪失對p53蛋白序列編碼的調控作用，繼而使突變細胞進入細胞周期后進一步增殖、癌變，也是腫瘤細胞易轉移的特點。p53缺失或突變均可導致細胞向惡性轉化〔7〕。本研究結果表明突變型p53可能與胃癌有關。感染Hp的胃癌組織中，p53及VEGF陽性率明顯高于正常胃黏膜組織，其可能機制是機體感染Hp后，破壞了細胞的生長周期，促進人體某些基因異常表達，導致調控胃腸黏膜上皮細胞周期性的基因、蛋白分化異常，進一步促進細胞增殖和凋亡〔8,9〕。Hp感染造成淋巴細胞浸潤，淋巴細胞又可釋放某些細胞因子，促進組織癌變〔10〕。

綜上，控制Hp感染，進行及時、有效地干預，可有效預防胃癌。

4參考文獻

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10王旭光，張忠，孫麗萍，等.谷胱甘肽轉移酶P1基因多態性和幽門螺桿菌感染的交互作用與胃黏膜腸上皮化生的風險〔J〕.中華流行病學雜志，2010;31(8)：920-4.

〔2013-12-17修回〕

(編輯徐杰)