糖尿病腎病患者血清胱抑素C與尿8-羥基脫氧鳥苷的變化及相關性

糖尿病腎病患者血清胱抑素C與尿8-羥基脫氧鳥苷的變化及相關性

徐美榮

(湖北科技學院附屬第二醫院，湖北 咸寧 437100)

摘要：目的 探討糖尿病腎病患者血清胱抑素C(CysC)與尿8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的關系。方法 共選取研究對象50例，分為健康對照組15例，糖尿病腎病組35例。其中微量白蛋白尿組(20μg/min≤UAER<200μg/min)18例、大量蛋白尿組(UAER≥200μg/min)17例。收集和記錄患者的一般資料(年齡、身高、體重、家族史等)，采用免疫比濁法測定血清CysC水平，酶聯免疫吸附法測定尿8-OHdG，全自動生化儀測定血尿肌酐、血脂和空腹血糖(FPG)等生化指標，高壓液相法測定糖化血紅蛋白(HbA1c)，分析CysC與尿8-OHdG的相關關系。結果 與健康對照組相比，微量白蛋白尿組CysC、尿微量白蛋白排泄率(UAER)、尿8-OHdG顯著升高，有統計學差異(P<0.05)；與微量白蛋白尿組相比，大量蛋白尿組CysC、UAER、尿8-OHdG顯著升高，有統計學差異(P<0.05)；微量白蛋白尿組胱抑素C與尿8-OHdG呈正相關(P<0.05)；大量蛋白尿組胱抑素C與尿8-OHdG沒有相關性。結論 尿8-OHdG和血清CysC水平可作為監測糖尿病腎病進程的指標。早期糖尿病腎病體內氧化應激的產生可能導致胱抑素C水平增加。

關鍵詞：糖尿病腎病；胱抑素C；8-羥基脫氧鳥苷

中圖分類號：R587.1

文獻標識碼：A

文章編號：2095-4646(2015)04-0284-03

ABSTRACT：Objective To investigate the relationship between serum Cys C and urine 8-OHdG. Methods 50 subjects were selected，15 controls and 35 diabetes.The general data(age，height，weight and family history)were collected.The levelof serum CysC was determined by immuno-turbidimetry.Urine 8-OHdG was detected by ELISA.Serum creatinine，uric creatinine，lipid and fast plasm glucose(FPG)were determined by automatic biochemical analazer.HbA1c was measured by HPLC.The relationship between serum Cys C and oxidative stress was analyzed.Results The levels of CysC、UAER and 8-OHdG in microalbuminuria group were significantly higher than those of control group，but lower than those of macroalbuminuria group(P<0.05).In microalbuminuria group serum CysC was positively correlated with Ccr，urinary albumin and MDA(P<0.05)，and was negatively correlated with 8-OHdG(P<0.05).In macroalbuminuria group serum CysC was not correlated with 8-OHdG.Conclusion The levels of Urine 8-OHdG and serum cysC can be used as predictors for monitoring the development of diabetic nephropathy.Oxidative stress state in patients with early-stage diabetic nephropathy may increase the level of Cysc.

收稿日期：(2015-01-24)

Study on the Relationship between Serum CysC and

Urine 8-OHdG in Diabetic Nephropathy

XU Mei-rong

(TheSecondAffiliatedHospitalofHubeiUniversityofScienceandTechnology，XianningHubei437100，China)

KEY WORDS：Diabetic nephropathy;CysC;8-OHdG

糖尿病腎病是糖尿病嚴重的慢性微血管并發癥，也是糖尿病患者的主要死因之一，發病初期主要表現為微量白蛋白尿，若不及時控制易發展為終末期腎臟疾病需要透析治療。因此，采用反映糖尿病腎病的敏感指標及時評價腎病嚴重程度具有重要的意義。胱抑素C(cystatinC，CysC)是反映腎小球濾過率變化的敏感內源性標記物，而氧化應激水平的升高與糖尿病腎病的發生發展密切相關[1]，因此本研究旨在分析CysC與氧化應激敏感指標尿8-OHdG的相關關系，明確其在糖尿病腎病病情評估中的意義。

1對象與方法

1.1研究對象健康對照組15例來自于我院體檢中心的健康體檢者，無糖尿病家族史，尿常規檢查尿蛋白陰性。糖尿病組：選擇2012年1月至2014年1月在我院內科住院的糖尿病腎病患者35例，根據24h UAER分為2組，其中微量白蛋白尿組(20μg/min≤UAER<200μg/min)18例，大量蛋白尿組(UAER≥200μg/min)17例。所有入選者年齡范圍30～80歲，排除近期嚴重的心、肝、腎、腦及肺功能不全者、感染、出血、惡性腫瘤和其他內分泌疾病，無原發性腎病史，無糖皮質激素服用史。

1.2檢測方法以上所有入選者均需隔夜空腹10h后采集靜脈血，2h內常規分離出血清，采用顆粒增強散射免疫比濁法檢測血清CysC水平，酶聯免疫吸附法檢測尿8-OHdG(試劑盒由北京利德曼生化技術有限公司提供)。8-OHdG結果用尿肌酐校正(即每毫克肌酐中8-OHdG含量)。全自動生化分析儀測定血尿肌酐、血脂、空腹血糖等生化指標；高壓液相法測定糖化血紅蛋白(HbA1c)；留取晨尿10ml，取上清液檢測UAER(試劑由羅氏診斷有限公司提供的多功能試紙條)。同時記錄入選者的年齡、性別、身高、體重及家族史等一般資料。

2結果

2.1兩組一般資料比較兩組間年齡(平均44.63±7.24)歲、血壓[平均(133.52±1.41)mmHg]及BMI[(22.16±1.28)kg/m2]無統計學差異(P>0.05)。血脂水平(T-ch、TG、HDL-C、LDL-C)兩組相比，均有顯著性差異(P均<0.05)，見表1。

2.2CysC水平、UAER與尿8-OHdG比較CysC水平與尿8-OHdG在糖尿病腎病組明顯增高，與對照組比較有統計學差異(P均<0.05)，與微量白蛋白尿組相比，大量蛋白尿組CysC、UAER與尿8-OHdG顯著升高，有統計學差異(P均<0.05)。見表1。

表1　各組間變量比較( ± s)

表1　各組間變量比較( ± s)

變量對照組(15例)糖尿病腎病微量白蛋白尿組(18例)大量蛋白尿組(17例)FPG(mmol/L)4.41±0.349.44±1.90*9.98±1.97*HbA1c(%)5.06±0.188.31±1.63*8.58±1.71*T-ch(mmol/L)5.08±0.545.98±0.54*6.22±0.56*TG(mmol/L)1.39±0.452.99±0.65*2.96±0.84*HDL-C(mmol/L)1.21±0.350.71±0.34*0.69±0.42*LDL-C(mmol/L)2.23±0.613.68±1.01*3.98±1.24*Ccr(ml/min)124.25±0.5774.53±0.38*52.36±0.41*△UAER(μg/min)6.05±0.34166.56±1.38*248.95±1.47*△8-OHdG(ng/mgCr)7.21±1.1613.76±4.29*23.61±6.78*△CysC(mg/L)0.20±0.048.04±0.21*10.18±0.74*△

與對照組相比，*P<0.05；與微量白蛋白尿組相比，△P<0.05

注：Ccr(ml/min)=[24h尿Cr(mg/dl)×24h尿量(ml)]/[血Cr(mg/dl)×24×60]

2.3Spearman相關性分析Spearman相關分析結果顯示：微量白蛋白尿組CysC與尿8-OHdG呈正相關(r=0.6435，P<0.05)。大量蛋白尿組CysC與尿8-OHdG沒有相關性(r=0.1423，P>0.05)。

3討論

血清CysC完全由腎小球濾過，并且十分穩定，因此可作為反映腎小球濾過率的理想內源性指標[2]。既往研究表明[3]，在糖尿病微量白蛋白尿患者中，CysC的敏感性和準確性較血肌酐和尿素氮更高，這在糖尿病腎病研究中極有價值。本研究顯示糖尿病腎病組隨著蛋白尿排泄的增加CysC水平亦逐漸升高，說明CysC可較為敏感地判斷腎功能，有助于判斷糖尿病早期腎損害。結果與Ogawa Y等的研究一致[4]。

氧化應激在糖尿病的發病過程中作為一原發且獨立的參與因素，其水平的升高與糖尿病微血管并發癥密切相關[5]。高血糖誘導糖尿病患者發生氧化應激，而腎臟是氧自由基產生的主要部位。氧自由基產生增多，通過直接破壞蛋白質、脂肪和糖類并活化炎癥細胞、啟動凋亡機制等損傷腎臟，同時激活多種細胞內信號轉導系統，表達相應的活性產物，使細胞外基質增多，促進糖尿病腎病的發生發展。8-OHdG是DNA氧化損傷的特異性生物標志物，血、尿8-OHdG的水平是目前國際上公認的評價機體氧化應激狀態的新型可靠指標。研究認為監測8-OHdG水平的變化可作為評價糖尿病腎病病變程度的獨立因素。Pan HZ等的研究結果表明糖尿病腎病患者血清中8-OHdG含量較單純糖尿病患者有顯著增加[6]。Lee SH等發現糖尿病腎病患者尿8-OHdG的含量明顯高于正常白蛋白尿組[7]。本研究顯示微量和大量蛋白尿組較對照組相比，尿8-OHdG水平隨著糖尿病腎病的病程進展逐漸升高，證實了腎臟局部氧化和抗氧化平衡狀態被破壞可能在糖尿病腎病的發生、發展中起著重要作用。

但目前CysC與氧化應激指標之間的相關關系少有研究。我們的相關分析結果顯示，微量蛋白尿組CysC與尿8-OHdG的水平呈正相關，說明糖尿病腎病早期氧化應激的產生可能導致胱抑素C水平增加，亦有可能胱抑素C與氧化應激互為因果。我們分析CysC與氧化應激指標的相關性可能是多種因素綜合作用的結果。高氧化應激狀態可以導致血清同型半胱氨酸的增加，Cys C 作為一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，伴隨同型半胱氨酸的增高而增高。另外氧化應激過程中反應氧產物ROS增加胞質內鈣離子濃度，并增加許多縮血管活性物質血栓素A2(TxA2)，內皮素1(ETl)，腺苷、前列腺素2α等的產生，降低擴血管物質如內皮型一氧化氮合酶(eNOS)的產生[8]；ROS還可增加腎小球入球動脈和出球動脈阻力，且入球>出球，因而降低了腎小球超濾系數；并且氧化應激是血管內皮損傷的核心因素[9]，可增加內皮細胞的促凝能力，導致腎毛細血管微血栓的形成，血流調節受損等等。本研究結果發現在大量蛋白尿組，CysC水平與尿8-OHdG變化沒有相關性，我們分析產生上述現象的原因可能是當患者出現大量蛋白尿時，已是糖尿病腎病晚期，腎組織已嚴重受損，損害腎臟的因素不僅僅和氧化應激有關，還和腎臟固有細胞凋亡、表型轉化、纖維化等多種機制有關。

總之，本研究結果發現，在糖尿病腎病微量白蛋白期CysC水平與氧化應激指標水平具有明顯相關性，提示早期抗氧化治療可能改善腎小球濾過功能，延緩糖尿病腎病進展。但是抗氧化治療是否確切改善腎小球濾過功能還需要進一步研究，CysC和氧化應激相關性的具體機制也有待進一步研究。

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