子宮內膜異位癥不同中醫證型與胰島素樣生長因子-Ⅰ的關系

子宮內膜異位癥不同中醫證型與胰島素樣生長因子-Ⅰ的關系

熊婕，朱詠梅*

(仙桃市中醫醫院，湖北 仙桃 433000)

摘要：目的探討子宮內膜異位癥不同中醫證型與胰島素樣生長因子-Ⅰ的關系。方法選取因子宮內膜異位癥需行腹腔鏡手術的患者242例，另22例因不孕或者盆腔良性疾病需行腹腔鏡手術患者為對照組,采用ELISA檢測血清中胰島素樣生長因子-Ⅰ,免疫組化檢測內膜組織中胰島素樣生長因子-Ⅰ的表達情況。結果242例子宮內膜異位癥患者中氣滯血瘀型患者87例(36.0%),痰濕瘀阻型36例(14.9%)，寒凝血瘀型33例(13.6%),熱郁血瘀型24例(9.9%)，腎虛血瘀型43例(17.8%)，氣虛血瘀型19例(7.8%)。ELISA檢測結果顯示，氣虛血瘀組患者血清中IGF-Ⅰ含量與正常對照組無差異外，其他各組均高于正常對照組(P<0.05)；氣滯血瘀組、腎虛血瘀組患者血清中IGF-Ⅰ含量明顯高于其他組別(P<0.05)；免疫組化檢測結果顯示，不同中醫證型患者組織IGF-Ⅰ陽性表達率相對于正常對照組具有統計學意義(P<0.05,P<0.01)，氣滯血瘀型組IGF-Ⅰ陽性表達率高于痰濕瘀阻組、熱郁血瘀組(P<0.05)，氣滯血瘀組在9～12評分(+++)項中表達高于其他各組(P<0.05)。結論子宮內膜異位癥患者中醫證型中氣滯血瘀、腎虛血瘀以及寒凝血瘀型與IGF-1的高表達有關。

關鍵詞：子宮內膜異位癥；胰島素樣生長因子-Ⅰ；氣滯血瘀；腎虛血瘀；寒凝血瘀

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.11.012

中圖分類號：R711.71文獻標志碼： A

基金項目:湖北省自然科學基金資助項目(2010CDB09403)。

作者簡介:熊婕，女，大學本科，主要從事婦科腫瘤、不孕癥等研究。

收稿日期:(責任編輯：張曄2015-03-10)

*通信作者:朱詠梅，電話-13872976198，電子信箱-554993047@qq.com

Relationship of endometriosis syndrome type and insulin-like growth factor -Ⅰ

XIONG Jie,ZHU Yongmei*

(Xiantao Chinese Medicine Hospital,Xiantao 433000,Hubei Province,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship of endometriosis syndrome type and insulin-like growth factor-Ⅰ.MethodsTo select 242 cases as for TCM gynecology gynecology or endometriosis patients and 22 cases of laparoscopic surgery because of infertility or pelvic laparoscopic surgery for benign disease need patients in the control group,using ELISA serum insulin-like growth factor-Ⅰ,immunohistochemical detection of endometrial tissue expression of insulin-like growth factor-Ⅰ.ResultsThe 242 patients with endometriosis in patients with blood stasis type 87 (36.0%),phlegm stasis type 36 cases (14.9%),Hanning Blood type 33 cases (13.6%),hot Yu blood stasis 24 cases (9.9%),43 cases of kidney and blood stasis (17.8%) and 19 cases of Qi and Blood (7.8%).ELISA test results showed no difference in serum QDBS content of IGF-Ⅰ group and the normal control group,the other groups were higher than the normal control group (P<0.05);blood stasis group,Kidney Blood patients serum IGF-Ⅰ were significantly higher than the other groups (P<0.05).Immunohistochemistry showed,IGF-Ⅰ in patients with positive expression of tissue syndrome type relative to the control group with statistical significance (P<0.05，P<0.01);blood stasis type group IGF-Ⅰ expression rate higher than phlegm stasis group,heat and blood stasis group (P<0.05);blood stasis group was higher than the other groups (P<0.05) in the 9-12 score (+++) entry.ConclusionEndometriosis patients with TCM syndrome type of qi and blood stasis,kidney and blood stasis and blood stasis type haemorrheological nature related to the high expression of IGF-1.

Keywords:endometriosis;insulin-like growth factor-Ⅰ;qi-stagnation and blood stasis;renal deficiency and blood stasis;congealing cold and blood stasis

子宮內膜異位癥是目前臨床較為常見的婦科疾病，其臨床主要表現為痛經、不孕，異常內膜增厚，常與婦科惡性病變有關[1]。關于子宮內膜異位癥的病因病機的現代研究存在多種爭議[2]。目前對于子宮內膜異位癥的中醫治療具有一定的優勢，但是仍有其局限性，這可能與其中醫證型的不同有關[3]。胰島素樣生長因子-Ⅰ與子宮內膜異常增生有關，不同中醫證型與胰島素樣生長因子-Ⅰ有著怎樣的關系，現將研究結果報告如下。

1研究對象與方法

1.1臨床資料選取2012年3月—2014年6月在我院婦科因子宮內膜異位癥需行腹腔鏡手術的患者242例，其平均年齡為(35.2±4.6)歲(25～39歲)。根據美國生殖醫學協會提出的美國生育協會修正分期法對子宮內膜異位癥分Ⅰ～Ⅳ期：Ⅰ期49例，Ⅱ期57例，Ⅲ例78例，Ⅳ期58例。患者在手術時切除子宮內膜異位病灶組織留存，術后經病理檢測確系為子宮內膜異位癥。另選取同期22例因不孕或者盆腔良性疾病需行腹腔鏡手術患者為對照組，經病理檢測顯示患者無子宮內膜病變。所有患者均簽訂知情同意書，并醫院倫理委員同意批準執行。

1.2納入或排除標準[4]納入或者排除的標準為：1)患者在接受手術前6個月內無使用激素類藥物或者免疫抑制劑；2)年齡在42歲以下，23歲以上；3)患者無其他合并嚴重疾病，如肝膽疾病、代謝綜合征、惡性腫瘤、盆腔結核等。

1.3診斷標準[5]西醫的診斷標準主要有患者出現繼發性痛經且呈進行性加重、不孕或者出現盆腔慢性疼痛，盆腔檢查顯示，其與子宮相連處囊性包塊或者結節性疼痛，腹腔鏡證實上述結果。中醫診斷標準則按照《中藥新藥臨床研究指導原則》《中醫婦科學》以及《中醫婦科病證診斷療效標準》制定子宮內膜異位癥的中醫標準及其分型，主要為氣滯血瘀型、痰濕瘀阻型、寒凝血瘀型、熱郁血瘀型、腎虛血瘀型以及氣虛血瘀型。

1.4觀察指標

1.4.1樣本制備所有患者在進入研究后第二天早上空腹抽取肘靜脈血5 mL，靜置后以3 000 r/min離心15 min，分離獲取血清，分裝于EP管中保存在-80 ℃冰箱中待測。

1.4.2血清中胰島素樣生長因子Ⅰ采用ELISA法檢測血清中胰島素樣生長因子Ⅰ(美國R&D公司提供),嚴格按照試劑盒操作進行。

1.4.3免疫組化檢測內膜組織胰島素樣生長因子Ⅰ收集的組織標本浸泡于10%甲醛中固定,經不同濃度乙醇梯度脫水，石蠟包埋、切片，采用SP法檢測組織中IGF-Ⅰ的表達情況，嚴格執行說明書操作。其中兔抗IGF-Ⅰ、DAB顯色劑以及山羊抗兔二抗均購于北京中杉生物有限公司。用乳腺癌患者陽性切片作為對照，磷酸緩沖鹽代替一抗作陰性對照。其結果判定為[6-7]:IGF-Ⅰ陽性染色均出現在細胞漿或者細胞膜中且呈淡黃色至棕褐色。在每張玻片上選擇5個視野，觀察300個子宮異位內膜上皮細胞，采用半定量判斷結果。即：陽性細胞數在5%以內記0分,6%～25%以內記1分，26%～50%以內記2分，51%～75%以內記3分，76%～100%記4分；陽性細胞以顯色為準，其中出現淡黃色記1分，黃棕色記2分,棕褐色記3分，兩者乘積，0分記為(-)，1～4分記為(+)，5～8分記為(++)，9～12分記為(+++)。

2結果

2.1子宮內膜異位癥中醫證型分布情況242例子宮內膜異位癥患者中氣滯血瘀型患者87例(36.0%),痰濕瘀阻型36例(14.9%),寒凝血瘀型33例(13.6%)，熱郁血瘀型24例(9.9%),腎虛血瘀型43例(17.8%)以及氣虛血瘀型19例(7.8%)。后續檢測根據中醫證型進行分組。

2.2不同中醫證型患者血清中IGF-Ⅰ含量不同證型組患者血清中IGF-Ⅰ含量表達不同，除氣虛血瘀組患者血清中IGF-Ⅰ含量與正常對照組無差異外,其他各組均高于正常對照組(P<0.05)；氣滯血瘀組、腎虛血瘀組患者血清中IGF-Ⅰ含量明顯高于其他組(P<0.05)。見表1。

2.3免疫組化檢測內膜組織中IGF-Ⅰ表達免疫組化檢測結果顯示,不同中醫證型患者組織IGF-Ⅰ陽性表達率相對于正常對照組具有統計學意義(P<0.05,P<0.01)；氣滯血瘀型組IGF-Ⅰ陽性表達率高于痰濕瘀阻組、熱郁血瘀組(P<0.05)；此外，氣滯血瘀組在9～12分(+++)項中表達高于其他各組(P<0.05)。見表2和圖1。

表1　不同中醫證型患者血清中IGF-Ⅰ含量 ± s)　ng/mL

注：與正常對照組相比較，# P<0.05，## P<0.01；與氣滯血瘀組比較，△ P<0.05，△△ P<0.01；與痰濕瘀阻組比較，▲ P<0.05；與寒凝血瘀組比較，* P<0.05;與熱郁血瘀組比較，◆ P<0.05；與腎虛血瘀組比較，■■ P<0.01

注：與正常對照組相比較，#P<0.05，##P<0.01；與氣滯血瘀組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與痰濕瘀阻組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01;與寒凝血瘀組比較，**P<0.01；與熱郁血瘀組比較，◆◆P<0.01；與腎虛血瘀組比較，■■P<0.01

注：A圖為正常對照組；B圖為氣滯血瘀組；C圖為痰濕瘀阻組；D圖為寒凝血瘀組；E圖為熱郁血瘀組；F圖為腎虛血瘀組；G圖為氣虛血瘀組 圖1　免疫組化檢測內膜組織中IGF-Ⅰ表達

3討論

子宮內膜異位癥臨床主要表現為繼發性痛經進行性加重，腰骶疼痛、不孕以及月經失調等[8]。流行病學研究顯示[9]，育齡期是該病發病高峰。目前對于該病的病因病機尚未完全闡明，較為認可的是經血逆流種植學說。這一學說能夠解釋子宮內膜異位癥的臨床特點，但卻不能解釋正常婦女均出現經血逆流現象，而為什么只有少數婦女發生子宮內膜異位癥[10]。現代研究也證實痛經與子宮內膜異位癥的發生有著密切的關系。《針灸甲乙經》“女子無血、血不血在內不下”，指出了瘀血是導致女性不孕的原因。通過古代文獻以及現代研究證實，子宮內膜異位癥可能是由于痛經、勞累以及外感傷寒導致內膜異常增生，進而導致不孕、性交痛等惡性循環的產生。

歷代醫家均有子宮內膜異位癥的論述，其中《景岳全書·婦人規經期腹痛十一》[11]中指出子宮內膜異位癥的病因病機：“經行腹痛，證有實虛，其虛者或有因血虛，或因氣虛；其實者或因血滯，或因氣滯。”其他醫家對子宮內膜異位癥的病因病機的論述也基本認為是“氣滯血瘀、氣虛血虛、寒凝血滯”。因此本文根據相關文獻以及中醫對子宮內膜異位癥病因病機的論述，將該病分為本文闡述的6種中醫證型。研究顯示,子宮內膜異位癥患者中氣滯血瘀、腎虛血瘀型患者居多，且具有統計學意義(P<0.05),這一研究結果與中醫所闡述的病因病機基本一致。

胰島素樣生長因子(IGFs)對細胞的生長、分化以及代謝具有顯著的調節作用。現代研究[12]顯示，IGFs對于子宮內膜異位癥患者內膜的異常增生存在復雜的調節作用，目前其異常表達與子宮內膜異位癥的發生發展成為研究的熱點。IGFs主要包括IGF-Ⅰ、Ⅱ,其中IGF-Ⅰ與子宮內膜細胞的增殖、分化有著更為密切的關系。有研究顯示,雌激素能夠促進IGF-Ⅰ在子宮內膜中表達,其表達量水平基本可以評估子宮內膜分子水平雌孕激素反應[13-14]。以往研究[15-16]顯示,IGF-Ⅰ與子宮內膜異位癥發生密切相關，但是不同中醫證型與IGF-Ⅰ關系如何鮮為報道。通過本研究顯示,子宮內膜異位癥患者中氣滯血瘀型、腎虛血瘀型以及寒凝血瘀型患者IGF-Ⅰ含量相對于正常對照組以及其他證型組均顯示出統計學意義,這一結果提示上述中醫證型患者出現的臨床癥狀與IGF-Ⅰ的異常升高有著密切的關系。但是需要指出的是，氣虛血瘀型、熱郁血瘀型以及痰濕瘀阻型與哪些因素有關值得進一步探討。免疫組化研究結果顯示,異常內膜組織中各組IGF-Ⅰ陽性表達率均高于正常對照組，這一結果顯示異常內膜的出現與IGF-Ⅰ的表達仍有一定關系。此外,氣滯血瘀型患者組織中IGF-Ⅰ呈陽性強表達，與其他各組相比較，均顯示統計學意義(P<0.05,P<0.01)。但為何血清檢測不一致有待進一步研究。

總之,子宮內膜異位癥患者中醫證型中氣滯血瘀、腎虛血瘀以及寒凝血瘀型與IGF-Ⅰ的高表達有關。

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