血清CA125，HE4及ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌診斷價(jià)值的臨床研究*

邢瑞青，吳永昌，陳慧昱，張小寧，房 艷，秦 爽，彭道榮

(第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)研究所，西安 710032)

卵巢癌是女性較為常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率居?jì)D科惡性腫瘤第三位，病死率居首位。由于本病發(fā)病隱匿，患者早期多無(wú)特異性臨床表現(xiàn)，約75%的患者確診時(shí)已屬晚期[1]。晚期卵巢癌不僅預(yù)后差，且5年生存率僅有20%～25%[2]，因此對(duì)卵巢癌的早期診斷至關(guān)重要。糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)是目前臨床廣泛應(yīng)用于卵巢癌的臨床診斷，療效評(píng)估及病情監(jiān)測(cè)的血清腫瘤標(biāo)志物之一，但其診斷敏感度和特異度低。人附睪蛋白4(human epididymis protein 4，HE4)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種新型血清腫瘤標(biāo)志物，與傳統(tǒng)卵巢癌腫瘤標(biāo)志物CA125比較，其敏感度與特異度均有了較大程度的提升，尤其與CA125聯(lián)合檢測(cè)，能大大提高早期卵巢癌的檢出率[3]。但是，由于HE4水平受到諸多因素的干擾，臨床上提出了卵巢惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)算法(ROMA)這一概念，通過(guò)納入HE4，CA125等綜合評(píng)估早期卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)性[4，5]。本文通過(guò)檢測(cè)患者血清HE4，CA125水平及計(jì)算ROMA指數(shù)，旨在探討血清CA125，HE4及ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌的臨床診斷價(jià)值，提高絕經(jīng)前、后卵巢癌診斷的準(zhǔn)確率。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 選擇2015年6月～2016年6月由第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治入院并經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)確診為卵巢癌的患者307例，平均年齡44.01±16.41歲；卵巢囊腫患者271例，平均年齡42.03±12.81歲。健康對(duì)照組均來(lái)自本院健康體檢女性，隨機(jī)抽取289例，平均年齡42.13±13.82歲，納入者均無(wú)心、肝、肺等重要器官疾病，肝、腎功能均正常，無(wú)腫瘤家族史。患病組與健康對(duì)照組年齡經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，資料具可比性。

1.1.2 受檢者均于入院后第2天清晨空腹靜脈采血3～4 ml，3 000 r/min離心10 min，分離血清于-70℃凍存待測(cè)。對(duì)照組采集清晨空腹靜脈血3～4 ml，同樣按上述方法處理。所有標(biāo)本均無(wú)乳糜及溶血。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑：CA125，HE4檢測(cè)試劑由瑞士羅氏公司提供。室內(nèi)質(zhì)控由伯樂(lè)公司提供。

1.2.2 主要儀器：瑞士羅氏Cobas E602 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.3 方法

1.3.1 應(yīng)用瑞士羅氏E602電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑對(duì)室內(nèi)質(zhì)控及樣本進(jìn)行CA125，HE4的檢測(cè)。待質(zhì)控在控后方進(jìn)行患者樣本的檢測(cè)；所有操作，嚴(yán)格按照儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。

樣本檢測(cè)后，儀器可根據(jù)血清CA125和HE4值，并通過(guò)攜帶的卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型(ROMA)分析軟件，自動(dòng)計(jì)算輸出相應(yīng)ROMA指數(shù)。ROMA指數(shù)計(jì)算公式：絕經(jīng)前預(yù)測(cè)指數(shù)(PI)=-12.0+2.38×LN(HE4)+0.0626×LN(CA125)，絕經(jīng)后預(yù)測(cè)指數(shù)(PI)=-8.09+1.04×LN(HE4)+0.732×LN(CA125)，LN表示自然對(duì)數(shù)，ROMA(%)=exp(PI)/[1+exp(PI)]×100%。

1.3.2 判定標(biāo)準(zhǔn)：CUTOFF值分別為：CA125>35.0 U/ml，HE4>82.9 pmol/L，Pre-ROMA>11.40%，Post-ROMA>29.9%為陽(yáng)性。所有單項(xiàng)指標(biāo)以超過(guò)正常參考值范圍上限為升高(即陽(yáng)性)。

2 結(jié)果

2.1 卵巢癌、卵巢囊腫及健康對(duì)照組血清CA125，HE4水平和ROMA指數(shù) 見(jiàn)表1。

表1 卵巢癌、卵巢囊腫及健康對(duì)照組血清CA125，HE4水平和ROMA指數(shù)

卵巢癌分別與卵巢囊腫及健康對(duì)照組比較，血清CA125，HE4水平及ROMA指數(shù)各指標(biāo)均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

2.2 血清CA125，HE4和ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌診斷的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值比較 見(jiàn)表2。對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷效能的比較中，Pre-ROMA指數(shù)的敏感度最高，達(dá)100%，與CA125，HE4相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.69，P<0.05)。HE4的特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高，均為100%，與CA125，Pre-ROMA相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.74，11.05，P<0.05)。Pre-ROMA指數(shù)的陰性預(yù)測(cè)值最高，達(dá)100%，與HE4相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.50，P<0.05)。

對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌診斷效能的比較中，CA125的敏感度和陰性預(yù)測(cè)值最高，分別為92.77%和93.62%，與HE4相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.48，6.28，P<0.05)。HE4的特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高，分別為92.78%和90.41%，與Post-ROMA相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.34，6.05，P<0.05)。

表2 血清CA125，HE4和ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)前、后卵巢癌診斷敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值(%)

2.3 血清CA125，HE4和ROMA指數(shù)對(duì)卵巢癌診斷的ROC曲線分析 見(jiàn)圖1，2和表3，4。

表3 ROC曲線參數(shù)評(píng)價(jià)各指標(biāo)

圖1 血清CA125，HE4和ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷的ROC曲線分析

圖1與表3結(jié)果顯示，以卵巢囊腫和正常對(duì)照組為參照時(shí)，HE4和Pre-ROMA診斷卵巢癌的AUC分別為0.574，0.573，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而CA125則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表4 ROC曲線參數(shù)評(píng)價(jià)各指標(biāo)對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌的診斷價(jià)值

圖2 血清CA125，HE4和ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌診斷的ROC曲線分析

圖2與表4結(jié)果顯示，以卵巢囊腫和正常對(duì)照組為參照時(shí)，HE4，Post-ROMA和CA125診斷卵巢癌的AUC由大到小分別為0.677，0.665及0.641，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

卵巢癌是發(fā)生于卵巢表面體腔上皮和其下方卵巢間質(zhì)的惡性腫瘤。其中以黏液性囊腺癌、漿液性腺癌、粒層細(xì)胞癌、惡性葉胎瘤、未分化癌等為多見(jiàn)。其特點(diǎn)是早期無(wú)自覺(jué)癥狀，發(fā)現(xiàn)晚，擴(kuò)散快，療效差。目前，臨床對(duì)于卵巢癌的主要診斷手段包括血清腫瘤標(biāo)志物及超聲檢查等。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)因其無(wú)創(chuàng)、方便且提示作用強(qiáng)而客觀等優(yōu)勢(shì)，在腫瘤的診斷和療效監(jiān)測(cè)中發(fā)揮重要的輔助作用。

CA125是臨床最常用的卵巢癌血清標(biāo)志物，被認(rèn)為是卵巢上皮癌尤其是漿液性腺癌的首選腫瘤標(biāo)志物，其表達(dá)與卵巢癌的放生發(fā)展及消退密切相關(guān)[6]。本研究結(jié)果顯示，卵巢癌患者血清CA125水平顯著高于卵巢囊腫及正常對(duì)照組(P<0.05)。在臨床診斷價(jià)值方面，由于其他惡性腫瘤如胰腺癌、肺癌、乳腺癌等以及卵巢的良性病變、妊娠早期、子宮內(nèi)膜異位癥時(shí)亦可出現(xiàn)CA125的異常升高，導(dǎo)致其在卵巢癌診斷中的特異度較差[7]。而本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相較與HE4和ROMA，CA125雖然對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷的敏感度(68%)和特異度(81.37%)不高，但對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌的診斷CA125的敏感度和陰性預(yù)測(cè)值最高，分別為92.77%和93.62%，與HE4相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步的ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，以卵巢囊腫和正常對(duì)照組為參考，CA125對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷的ROC AUC最小，為0.541，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌的診斷的ROC AUC為0.641，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由此可見(jiàn)，血清CA125對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌患者具有更高的敏感度和臨床診斷價(jià)值。

HE4由Kirchhoff等于1991年從人附睪遠(yuǎn)端上皮細(xì)胞中分離出來(lái)，為WFDC2基因編碼的小的單鏈信號(hào)肽。HE4屬乳清酸性蛋白家族，是一種蛋白酶抑制劑，其結(jié)構(gòu)特征為8個(gè)膀氨酸形成的四個(gè)二硫鍵橋。在人正常組織中，HE4主要在生殖道和近端氣管上皮中有表達(dá)，涎腺中也有較高表達(dá)，而正常卵巢組織中幾乎無(wú)表達(dá)；在惡性腫瘤組織中，卵巢惡性腫瘤常見(jiàn)高表達(dá)，而大多數(shù)非卵巢惡性腫瘤中不表達(dá)或低表達(dá)[8]。本研究中的血清檢測(cè)結(jié)果顯示，卵巢癌患者血清HE4水平顯著高于卵巢囊腫及正常對(duì)照組(P<0.05)。在臨床診斷價(jià)值方面，對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷效能的比較中，HE4的特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高，均為100%，與CA125，Pre-ROMA相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌診斷效能的比較中，HE4的特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值亦最高，分別為92.78%和90.41%，與Post-ROMA相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時(shí)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，以卵巢囊腫和正常對(duì)照組為參考，HE4對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌和絕經(jīng)后卵巢癌診斷的ROC AUC均最大，分別為0.574和0.677(P<0.05)。可見(jiàn)，血清HE4對(duì)絕經(jīng)前和絕經(jīng)后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能；與CA125相比，HE4對(duì)卵巢癌的診斷具有更高的特異度。

但近年來(lái)，隨著對(duì)HE4研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)HE4的臨床應(yīng)用存在一定的局限性。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)患者肝腎功能受損時(shí)，HE4的檢測(cè)結(jié)果容易受到較大的影響。此外，HE4的表達(dá)水平還受到女性經(jīng)期的影響[9]。因此為進(jìn)一步提高臨床診斷卵巢癌的準(zhǔn)確性，有學(xué)者提出卵巢惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)算法(ROMA)的概念。通過(guò)結(jié)合患者月經(jīng)情況，并依據(jù)血清CA125和HE4水平，建立Logistic回歸模型，可用于卵巢癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)。本研究結(jié)果顯示，絕經(jīng)前和絕經(jīng)后卵巢癌患者ROMA指數(shù)均顯著高于卵巢囊腫及正常對(duì)照組(P<0.05)。在臨床診斷價(jià)值方面，對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌診斷效能的比較中，Pre-ROMA指數(shù)的敏感度最高和陰性預(yù)測(cè)值最高，均達(dá)100%，與CA125，HE4相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌的診斷其敏感度高于HE4，而特異度低于HE4(P<0.05)。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，以卵巢囊腫和正常對(duì)照組為參考，ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌和絕經(jīng)后卵巢癌診斷的ROC AUC分別為0.573和0.665(P<0.05)。由此可見(jiàn)，HE4和CA125聯(lián)合檢測(cè)，并計(jì)算ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)前和絕經(jīng)后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能，尤其能大大提高單項(xiàng)HE4或CA125對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌的診斷敏感性和陰性預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，相較與絕經(jīng)前卵巢癌，血清CA125對(duì)絕經(jīng)后卵巢癌患者具有更高的敏感度；血清HE4對(duì)絕經(jīng)前和絕經(jīng)后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能；與CA125相比，HE4對(duì)卵巢癌的診斷具有更高的特異度；HE4和CA125聯(lián)合檢測(cè)，并計(jì)算ROMA指數(shù)對(duì)絕經(jīng)前和絕經(jīng)后卵巢癌患者均具有很好的臨床診斷效能，尤其大大提高單項(xiàng)HE4或CA125對(duì)絕經(jīng)前卵巢癌的診斷敏感度和陰性預(yù)測(cè)價(jià)值；三者聯(lián)合檢測(cè)有利于提高卵巢癌診斷的準(zhǔn)確度。

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