陜西省榆林地區和商洛地區HPV感染及亞型分布對比研究*

原 榮，李 軍，王一羽，南 星，燕林青，慕玉東(陜西省腫瘤醫院，西安 710061)

宮頸癌是比較常見的婦女惡性腫瘤，高危型人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)持續性感染與宮頸癌前病變被認為是主要致病因素[1]。目前已發現的HPV有100多種亞型，其中40多種與生殖道疾病有關[2]。本文對1 646例分別在商洛及榆林地區醫院婦科就診婦女HPV-DNA的檢測結果進行了對比分析，以了解HPV感染的地域性分布并為宮頸癌防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2013年1月～2014年10月在榆林市第二人民醫院婦科就診的709例婦女和在商洛地區中心醫院婦科就診的937例婦女，采集她們的宮頸脫落細胞樣本。

1.2 儀器與試劑 美國ABI公司7500型熒光定量PCR儀；上海力康科學技術有限公司HFsafe-1200TE型生物安全柜；青島海爾有限醫用低溫科技有限公司DW-86L386型超低溫冰箱。廣州達安生物技術有限公司人乳頭瘤病毒分型檢測試劑盒(熒光定量PCR法)，可以一次性檢測高危型別18種和低危型別5種。所需試劑四基聯苯胺、檸檬酸鈉、十二烷基硫酸鈉等均為國產分析純。顯色液用時按所需比例加超純水新鮮配制。

1.3 方法

1.3.1 宮頸脫落細胞采集：利用專用宮頸刷置于宮頸口順時針旋轉5周，慢慢取出放入專用樣本搜集管內，擰緊管蓋，保持樣本管直立，做好樣本標識，實驗室保存在-20℃冰箱待測。

1.3.2 DNA分離提取：取有宮頸細胞的保存液離心，棄上清，加細胞裂解液提取DNA，整個操作過程嚴格按照DNA提取試劑盒操作步驟完成。

1.3.3 PCR擴增PCR反應條件：50℃15 min，95℃10 min，35次循環(94℃30 s，42℃90 s，72℃30 s)，72℃延伸5 min。擴增完后進行雜交和染色，各步驟嚴格按照試劑盒說明書擴增程序進行。

1.3.4 檢測結果判定：根據藍色圓點的有無和位置利用閱讀分析儀進行HPV是否感染以及感染的型別，顯示藍色圓點者為陽性，同時對照膜條陽性對照點顯示藍色斑點時表示實驗檢測結果準確可靠。

1.4 統計學分析 采用二項分布分別進行各組間感染率的比較。所用統計軟件為SPSS13.0，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV-DNA感染率 見表1。榆林地區女性受檢者中HPV-DNA陽性220例，陽性率31.02%，其中高危型感染者190例，低危型患者17例，混合型13例，分別占感染總數的86.36%，7.73%及5.91%。商洛地區HPV-DNA陽性566例，陽性率60.41%，其中高危型感染者318例，低危型感染者84例，混合型感染者164例，分別占感染總數的56.18%，14.84%及28.98%。商洛地區HPV總感染率明顯高于榆林地區(P<0.05)，同時商洛各年齡組婦女HPV感染率也都顯著高于榆林(P<0.05)。

表1 榆林和商洛兩地HPV-DNA感染率

2.2 HPV-DNA多重感染率 榆林地區和商洛地區多重感染以二重感染最為常見，榆林地區檢出單一型別感染174例，占總感染例數的79.09%，榆林地區未檢出四重以上感染，也未檢出二重和三重低危感染。商洛地區檢出單一型別感染286例，占總感染例數的50.53%，多重感染以二重感染最多，有158例，占總感染例數的27.91%，三重感染74例，占總感染例數的13.07%，四重及以上感染48例，占總感染例數的8.48%，最高檢出八重感染。

2.3 兩地HPV-DNA感染常見型別 見表2。

表2 榆林和商洛兩地HPV感染型別和分布(n)

被檢測的HPV-DNA的23種型別中，榆林地區婦女HPV單一感染中高危型最常見，依次為HPV16，52，58，51，33。商洛地區為HPV16，58，66，33，18。兩地共有高危型別為HPV16，58，33。榆林和商洛兩地常見低危型別分別為HPV6，11及HPV6和43型。

3 討論

我國每年新增約10萬例的宮頸癌患者[3]，HPV持續感染是引發宮頸癌的主要原因之一[4]。 HPV是一種雙鏈閉環小DNA病毒，屬于乳頭瘤病毒科，該病毒只侵犯人類，性傳播是其主要的感染途徑。HPV亞型眾多，已知20余種亞型與宮頸癌相關，其中HPV16，18，52，58為高發型別。榆林地區婦女HPV單一感染最常見高危型別為HPV16，52，58型；商洛地區為HPV16，58，66型。兩地高危型均以HPV16排首位，這與國內及國際報道的高危感染常見型別一致[5，6]。榆林地區高危型HPV52，58排2，3位，與國內感染率常見型別吻合[7，8]。榆林地區低危型最常見為HPV6和11型，商洛地區為HPV6和43型，兩地排首位的低危型別HPV6與我國低危第一型別一致。榆林地區和商洛地區多重感染以二重感染最為常見，符合國內的多地報道。榆林地區未檢出四重及以上感染，也未檢出二重以上低危多重感染。商洛地區檢出四重及四重以上感染，最多檢出8種型別的HPV感染。數據顯示商洛地區各年齡段HPV的感染率均顯著高于榆林地區。榆林地處陜西最北部，氣候干燥。 商洛地處陜西東南部，氣候濕潤，生活習慣近似南方。兩地均以漢族人口為主，占比超過99%。榆林地區城鎮及農村居民經濟收入均高于商洛。一些國內文獻表明不同區域HPV陽性率各有不同，且差別巨大。研究顯示新疆HPV陽性率達到90%[9]，北京地區陽性率超過60%[10]，河南地區陽性率14.23%[11]，大連地區陽性率為12.78%[12]，蘇州地區HPV陽性率58.20%[13]，遼寧地區陽性率45.6%[14]，武漢地區陽性率27.61%[15]，汕頭地區陽性率22%[16]， 廣西南寧14.23%[17]，以上不同地區HPV巨大的感染率差別，難以發現其規律性。婦女自身衛生習慣的不良是導致HPV高發的因素之一， 除此之外有作者提出HPV陽性率高與當地少數民族居多，經濟落后，受教育程度不同有關。本研究沒有收集到單個感染者對應的社會、經濟信息，不能判斷以上因素和兩地HPV感染率差別的相關性，這有待于進一步的研究和探討。

目前國內檢測HPV的方法很多，沒有一個確定的金標準，也是影響各地感染率高低不同的因素之一。但本文采用了相同的檢測方法，結果顯示榆林地區和商洛地區的感染率仍存在巨大差異，說明除了檢測方法的影響外，可能還有其它地域性的因素也是影響HPV感染的重要原因。了解各地HPV感染的差異性及可能的原因，可為我國HPV流行病學調查及其流行趨勢提供重要的資料，更為疾病防治及地方公共衛生政策的制定提供重要的參考依據。

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