HBV病毒復制機制及慢性乙型肝炎藥物靶點

赫曉林, 黃建煒, 許瑞安, 崔秀靈

(1.廈門市海洋與基因工程藥物重點實驗室，華僑大學生物醫學學院、分子藥物研究院 分子藥物教育部工程研究中心；2.廈門市疾病預防與控制中心， 福建 廈門　361021)

HBV病毒復制機制及慢性乙型肝炎藥物靶點

赫曉林1, 黃建煒2, 許瑞安1, 崔秀靈1

(1.廈門市海洋與基因工程藥物重點實驗室，華僑大學生物醫學學院、分子藥物研究院 分子藥物教育部工程研究中心；2.廈門市疾病預防與控制中心， 福建 廈門361021)

中國圖書分類號：R-05；R373.21；R512.62；R978.7

摘要：乙型肝炎病毒 (HBV) 感染是一種嚴重影響公共衛生與人體健康的全球性流行性疾病，盡管乙肝防治已有很大提高，但仍缺乏高效的藥物與手段。研究表明，肝損傷、肝衰竭程度與HBV及宿主免疫系統相互作用存在復雜關系。因而詳細地探明HBV生命周期和感染過程，為研究HBV藥物靶點和制定新的抗病毒策略提供前期堅實的基礎，意義重大。該文詳細介紹HBV病毒復制機制，并系統地闡述近年來新發現的和潛在的藥物靶點，為制備新型的抗HBV藥物提供參考。

關鍵詞：乙型肝炎病毒；病毒復制；作用靶點；裝配；NTPC；核心蛋白

乙肝病毒 (HBV) 是迄今所有已知可感染人體并具有獨立復制能力的雙鏈DNA病毒中最小且最有效的病毒，僅含3.2 kb，屬于嗜肝DNA病毒科。HBV可以引發急性和慢性肝炎，后者又可發展為肝硬化乃至肝癌。HBV感染呈全球性，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5多億人為慢性HBV感染患者，每年約有786 000人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發性肝細胞癌 (HCC)[1]。美國食品藥品監督管理局已批準兩個Ⅰ型干擾素和5個核苷逆轉錄酶抑制劑用于乙肝的治療，但臨床效果仍然十分有限。雖然預防乙型肝炎的疫苗在很大程度上減少了慢性乙肝的發生，但疫苗接種覆蓋率存在巨大的地域差異性，美國高達90%，而南亞僅占56%[1]。防治指南先后強調了抗病毒是治療乙肝的重中之重，因而詳細闡明HBV的復制機制，并以此為基礎，尋找高效低毒的抗病毒作用靶點已成為防治工作者的研究重心，并可為新藥研究發現奠定堅實的前期基礎。

1乙型肝炎病毒復制機制

HBV一旦進入人體，病毒包膜表面上抗原大蛋白 (LHBs) N端27~46位氨基酸就與肝細胞膜上的鈉離子-牛磺膽酸協同轉運蛋白 (NTPC)[2]結合，病毒顆粒通過受體介導的細胞內吞作用進入細胞，再由細胞微管系統轉運至核孔復合物。HBV病毒是240個由兩個核心蛋白(core protein, CP)以一定的夾角形成的二聚體亞單位，以一定的空間順序結合形成的對稱的20面體。病毒的CP經未知磷酸化機制暴露核內定位信號，與核孔復合物結合而脫去衣殼，HBV DNA進入核內，病毒顆粒由內吞到入核這一過程需要細胞內GTP激酶信號通路的參與。HBV DNA再經目前機制未明的修復正鏈缺口轉變成超共價閉合環狀DNA (cccDNA)。有研究在穩定轉染HBV DNA和DHBV DNA的細胞株中分離到去蛋白rcDNA (protein free-rcDNA, PF-RC)，并證明PF-RC是rcDNA到cccDNA轉變過程的中間體，可能是在胞質核衣殼內，通過某種具有絲氨酸蛋白酶活性的物質切斷P蛋白酪氨酸殘基與負鏈5′ 端磷酸基團間的磷酸二酯鍵形成的，rcDNA去蛋白化激發部分核衣殼解聚，暴露核定位信號，通過核孔復合體介導PF-RC轉運到核內，然后由宿主細胞相關酶把PF-RC轉化成cccDNA。用siRNA抑制核轉運蛋白β1表達或表達功能缺陷的轉運蛋白β1，均導致胞質PF-RC積聚，而胞核內PF-RC及cccDNA減少。細胞RNA多聚酶Ⅱ以cccDNA為模板，轉錄產生mRNA。病毒DNA聚合酶 (即P蛋白) 結合于pgRNA (前基因組RNA，也是3.5kb mRNA) 5′ 端的莖環結構，促使pgRNA包裹入核心顆粒中，P蛋白TP區第63位酪氨酸殘基上的羥基與GTP共價結合引發合成5′-GAAT-3′ 的四聚DNA引物，P蛋白與該引物轉位到pgRNA3′ 端DR1區，以pgRNA為模板轉錄合成互補性負鏈DNA，同時DNA聚合酶的RNAse H (核糖核酸酶H) 切割模板pgRNA，僅保留5′ 端完整的DR1片段，與該片段互補的短小RNA脫離并附著在負鏈5′ 端，引導正鏈合成。當合成延伸到負鏈5′ 端時，DNA聚合酶模板切換至負鏈3′ 端繼續合成正鏈DNA，形成松弛環狀DNA (rcDNA)，再移去共價結合在負鏈5′ 端的病毒聚合酶和正鏈5′ 端的短鏈RNA低聚物 (用于啟動)，就形成了cccDNA。正鏈合成啟動時，核心顆粒結構改變，成為成熟的核心顆粒，可與表面抗原相互識別，以芽生的方式形成完整病毒顆粒。包裹著衣殼的HBV-DNA再由膜包裹后分泌到細胞外，也可以重新脫去衣殼進入細胞核內，以維持細胞核內cccDNA的數量(Fig 1)[3]。

2藥物作用靶點及抗HBV策略

就理論而言，病毒復制的各個階段都有可能成為藥物靶點。故針對病毒的吸附、穿入、脫殼、生物合成及裝配分泌各階段特點，選擇相應的有效藥物去阻斷其生命周期，從而實現抑制乙肝病毒繁殖、擴散。

2.1病毒復制藥物靶點

2.1.1吸附吸附 (adsorption) 是指病毒附著于易感細胞的表面，它是感染的起始期。細胞與病毒相互作用最初是偶然碰撞和靜電作用，這是可逆的聯結，隨后的特異性吸附是非常重要的。Yan等[2]對乙肝病毒結合受體的肽段 (Pre-S1的2至48氨基酸)[4-5]進行結構修飾，并將其作為探針，用中國科學家1980年發現的樹鼩為肝細胞來源，得到原代培養的樹鼩肝細胞 (PTH)，應用強有力的現代生物化學技術，尋找結合Pre-S1肽段的蛋白質，發現了鈉離子-?；悄懰釁f同轉運多肽 (NTCP)。NTCP在肝臟內起著轉運膽酸和鈉離子的作用，膽汁鹽及其衍生物就有可能發展成為潛在藥物[6]，乙型肝炎和丁型肝炎病毒正是利用這一正常蛋白，與之結合并發揮作用。我們可以設計可溶性受體結合物，以防止病毒與受體的結合，有文獻報道環胞霉素及其衍生物可以阻斷HBV與NTCP的相互作用[7]。亦有文獻報道HBV易感細胞表面表達NTCP受體，而非易感細胞不表達。此外，HSPGs作為共受體在人體內普遍存在，非特異性與HBV病毒作用[3]。與此同時,HepG2-hNTCP-C4細胞株的構建有助于探索抑制HBV進入宿主細胞的新型抗HBV藥物[8]。

2.1.2穿入和脫殼穿入 (penetration) 是指病毒核酸或感染性核衣殼穿過細胞膜進入胞質。HBV是包膜病毒，以融合形成內吞體的方式進入細胞，隨著內吞體pH的降低，包膜蛋白構象發生變化，病毒包膜與內吞體膜融合，釋放到細胞質中。內吞作用、內吞體與HBV病毒包膜的融合已被提議作為潛在的用藥途徑[9]。脫殼的具體過程不得而知，但病毒進入細胞質后，發生衣殼蛋白磷酸化，可以針對這一點通過抑制衣殼蛋白磷酸化來阻斷感染。

Fig 1　Model of hepatitis B virus life cycle in hepatocytes

2.1.3生物合成生物合成 (biosynthesis) 是指病毒核酸復制和病毒蛋白質合成的過程，酶在該過程起著關鍵性作用，因而針對病毒酶的抗病毒藥物也一直是防治研究的重點之一，通過競爭性地與酶結合來抑制病毒復制。目前，臨床應用和正在開發階段的抗HBV藥物多是DNA聚合酶抑制劑，因其對cccDNA無明顯影響，停藥后多出現反彈，可能是cccDNA異常穩定或者DNA聚合酶抑制劑效能低，這就需要尋求高效DNA聚合酶抑制劑，并深入研究cccDNA合成的生化機制，尋找可行的分子靶點。cccDNA是HBV復制的中間體，是HBV mRNA和pgRNA的合成模板，也是HBV持續感染的關鍵因素，是病毒活躍復制狀態的重要指標，是HBV生活周期的核心部分。在乙肝相關性HCC中，cccDNA與X蛋白相互作用、相互影響，cccDNA可能通過增加X蛋白的表達并通過其作用而致癌，X蛋白也調控著cccDNA的轉錄，使得HBV的復制處于活躍狀態[10]。X蛋白的作用越來越受到重視，但迄今仍缺少突破性的發現。最近對非編碼RNA的研究十分活躍，研究顯示非編碼RNA在細胞周期發揮的作用遠遠超乎人類以前的認知， 或許為探索cccDNA調控提供新的思路[11]。

2.1.4裝配(或組裝)新合成的病毒核酸和病毒核心蛋白在感染細胞內組合成病毒顆粒的過程稱為裝配或組裝 (assembly)。病毒顆粒的裝配是由病毒和細胞的蛋白，以及病毒pgRNA參與的復雜的多分子相互作用的過程，而核心蛋白的作用尤為突出。核心蛋白C末端魚精蛋白樣區150~183位高精氨酸區域，核心蛋白第5螺旋區的113和117位氨基酸的負電荷和C端155、162和170位絲氨酸的磷酸化在病毒pgRNA的殼體化和病毒復制過程中起著重要作用[12]。HBV包膜蛋白的前S1區、胞質側SLOOP區與核心蛋白亞單位的釘突之間可以相互作用，有研究表明，表面刺突根部環樣凹槽處和核衣殼表面的小孔附近，可能是病毒核衣殼同包膜蛋白的結合位點[13]。為以包膜過程為作用靶點的抗病毒藥物設計提供強有力的證據。

研究發現，小分子bis-ANS可以和一個自由核心蛋白二聚體結合，改變核心蛋白的幾何形狀，進而影響衣殼裝配，這類小分子可能代表一類新型抗病毒劑[14]。與改變構成二聚物兩個核心蛋白夾角的bis-ANS原理不同，Stray等[15]發現的二氫嘧啶類(HAP)化合物可誘導活化核衣殼的裝配，裝配成異常的不穩定的非核衣殼顆粒，并加速正常核衣殼顆粒的降解，例如Bay41-4109和Bay39-5493，研究表明它們并沒有影響二聚物的形成，只是改變了二聚物之間的夾角。亞氨糖類化合物N-DNJ、N-DGJ也可使病毒核衣殼的數量大大減少，但其分子作用機制尚不清楚，推測該類化合物可能同HAP、bis-ANS具有相似的作用機制。苯丙烯酰胺類化合物AT-61和AT-130可能是通過加快HBV核心顆粒的裝配速度，抑制了前基因組pgRNA裝配入殼[16]。Yang等[17]發現一種非核苷類化合物可以抑制pgRNA與乙肝核心抗原(HBcAg)的結合，從而抑制pgRNA裝配入殼。此外，HBV是自組裝，不需要支架蛋白(包括分子伴侶)輔助裝配，但有研究表明，分子伴侶熱激蛋白90可通過與HBV核心蛋白二聚體結合促進HBV病毒顆粒的產生[18](Fig 2)。

2.1.5分泌從HBV病毒內產生病毒顆粒和其它物質的過程叫分泌(secretion)。有研究發現的苯并咪唑類衍生物BM601在不影響乙肝e抗原(HBeAg)、宿主蛋白分泌和細胞應激反應的情況下，干擾表面抗原在高爾基體的聚集來抑制病毒顆粒和乙肝表面抗原(HBsAg)的分泌[19]。

Fig 2Representative HBV capsid assembly inhibitors

鑒于HBV為迄今已知所有可感染人體并具有獨立復制能力的雙鏈DNA病毒中最小且最有效的病毒，人類經過長期的奮斗，人們逐漸開拓治療的新方略，其中包括：

(1) 用小分子作用于病毒的變構效應以實現衣殼蛋白、糖蛋白錯配不失為抗病毒良策之一，而且在已發表的HBV的文章得到佐證。

(2) 在HBV組裝時，分為兩個不同領域應對， 把自組裝和組裝調控分開， 各個擊破。調控是在變構水平上進行，即調控分子構象的變化，細胞周期一般是蛋白改變其活動，這些蛋白是由效應分子誘導的；調控過程還需要病毒和宿主因子參與。阻隔調控是一個理想的抗病毒治療的目標，而目前直接實現對病毒組裝物理化學性質的調控仍處于初始探索階段。

(3) 成核過程是成核單元先形成成核核心，在足夠成核單元存在下裝配成功；如果成核單元形成成核核心的過程過快，導致余下的成核單元裝配不順利；也有可能在成核過程中，成核單元結合不牢固[20]。

(4) 研究發現，陽離子細胞穿透肽 (CPP) 及其脂肪共軛域 (CatLip) 可以攜帶不帶電荷的生物活性分子進入細胞內。使用感染和轉染實驗，發現CatLip肽能引起包膜蛋白的積累，導致PreS/S結構域發生嚴重變化，從而抑制鴨乙型肝炎病毒復制，變性的CPP也為抗病毒治療提供了新靶點[21]。

2.2宿主抗病毒靶點HBV病毒本身沒有細胞毒性，通過多種機制降低機體免疫應答，以致不能有效清除病毒，使機體長期處于較弱的免疫應答，造成肝損傷，肝功能下降，故我們也可以以宿主免疫應答過程中的功能蛋白為作用靶點尋找治療方法。

2.2.1纖連蛋白纖連蛋白[22]在HepG2.2.15細胞中表達上調，同時纖連蛋白可以和HBV以一種物種限制的方式結合，在用纖連蛋白反義寡核苷酸、纖連蛋白抗體、原兒茶醛 (PA) 抑制纖連蛋白表達的實驗中，發現HBV的數量隨著纖連蛋白表達量的減少而降低。此外，還發現抑制纖連蛋白的表達可以提高HBV病毒對抗HBV藥物的敏感性，這樣纖連蛋白可能成為乙肝治療的潛在靶點。

2.2.2蛋白激酶SRPK1和SRPK2研究發現，蛋白激酶SRPK1和SRPK2是絲氨酸磷酸化的關鍵激酶，磷酸化過程對pgRNA的裝配是非常重要的[23]，推測可能是通過磷酸化核心蛋白來實現對HBV復制的控制。但有研究發現SRPK1和SRPK2是通過非磷酸化的途徑抑制病毒復制[24]，而不是磷酸化過程，具體機制還需深入研究。

2.2.3分子伴侶分子伴侶在細胞內促進折疊、成熟、裝配、轉運，這些過程都要消耗ATP。在一定濃度的熱休克蛋白抑制劑的作用下，病毒的活力不受影響，但病毒復制對此很敏感，因為伴侶調節許多細胞功能，包括信號網絡、細胞周期和凋亡，病毒可操縱細胞的分子伴侶，以此利于病毒復制。熱休克蛋白受到抑制后，可導致病毒聚合酶的降解，減少病毒基因表達，其作用對象可以是結構蛋白，也可以是非結構蛋白，例如Hsp90[25]。

2.2.4SBP蛋白從病人體內分離的表面抗原在人肝臟cDNA庫中篩選，發現一個新的表面抗原結合蛋白 (SBP) 和人的IgG重鏈結構相似，其N端結構域和表面抗原結合，帶負電荷的SBP N端和帶正電荷的HBsAg結合，SBP上的Fc片段更容易和酰基載體蛋白 (ACP) 上的Fc受體結合，促進ACP攝取HBsAg。實驗也證實SBP可以促進樹突細胞有效攝取表面抗原，并提高乙肝疫苗的免疫性[26]。

2.3新辟蹊徑Soulis和Boeke首次提出一種新的抗病毒策略：即核衣殼導向的病毒滅活 (capsid targeted viral inactivation，CATI)，并將其用于逆轉錄病毒的實驗治療。CATI的基本原理是構建一種逆轉錄病毒衣殼蛋白，將其與某種對病毒具有破壞作用的蛋白融合，利用衣殼蛋白自組裝的特性，將該融合蛋白裝配于逆轉錄病毒的核衣殼中，發揮其抗病毒作用。由于乙肝病毒的復制過程類似于逆轉錄病毒，利用CATI原理制備融合蛋白用于治療乙肝病毒的感染，在理論上具有高特異性、高效性、不易出現抗性株以及可采取常規給藥方法等優點，具有誘人的應用前景。

新研究發現一種新的抑制HBV轉錄的方法，即將非共軛高親和力的LNA-TFO轉運入細胞核，這種方法是最有效且最持久的，該發現強調了LNA寡核酸 (鎖核苷酸) 介導的特定序列基因沉默作為抑制病毒的一種新型的潛在的強大工具。

英國《每日郵報》網站7月22日報道：科學家采用基因剪輯技術，將一種被稱為核酸酶的DNA剪切酶與一種被稱為向導核糖核酸(gDNA)的RNA結合在一起瞄準病毒的基因組，實現首次從人類DNA中“刪除”艾滋病毒，可以考慮將該方法用于HBV DNA的刪除。

3結語

盡管HBV感染會引起嚴重的肝組織病理改變和肝功能損傷，但其本身是沒有細胞毒作用的。肝組織病理改變和肝功能損傷實際上是宿主免疫系統與受感染的肝細胞相互作用的結果，而這又取決于病毒復制水平高低和宿主免疫力強弱[27]。這就要求我們既要研究病毒復制的具體機制，又要了解病毒進入人體后引發的免疫反應，詳細了解機體免疫應答可幫助我們詳細了解乙肝的慢性化機制，抑制乙肝惡化。

綜上所述，人們在對慢型HBV感染的治療研究已取得了很大的進展，但目前應用于臨床的抗病毒藥物和治療方案尚需要進一步提高[27-28]。相信隨著人們對HBV復制機制、機體免疫應答機制的深入了解，將會發現更多的藥物作用靶點，為開發高效低毒的新型藥物指明方向。

參考文獻:

[1]Trépo C, Chan H L, Lok A. Hepatitis B virus infection [J].Lancet, 2014,pii:S0140-6736(14)60220-8.

[2]Yan H, Zhong G, Xu G, et al. Sodium taurocholate cotransporting polypeptide is a functional receptor for human hepatitis B and D virus [J].Elife, 2012, 1: e00049.

[3]Ezzikouri S, Ozawa M, Kohara M, et al. Recent insights into hepatitis B virus-host interactions [J].JMedVirol, 2014, 86(6):925-32.

[4]Barrera A, Guerra B, Notvall L, Lanford R E. Mapping of the hepatitis B virus pre-S1 domain involved in receptor recognition [J].JVirol, 2005, 79(15): 9786-98.

[5]Engelke M, Mills K, Seitz S, et al. Characterization of a hepatitis B and hepatitis delta virus receptor binding site [J].Hepatology, 2006, 43(4): 750-60.

[6]Yan H, Peng B, Liu Y, et al. Viral entry of hepatitis B and d viruses and bile salts transportation share common molecular determinants on sodium taurocholate cotransporting polypeptide [J].JVirol, 2014, 88(6): 3273-84.

[7]Watashi K, Sluder A, Daito T, et al. Cyclosporin A and its analogs inhibit hepatitis B virus entry into cultured hepatocytes through targeting a membrane transporter NTCP [J].Hepatology, 2014, 59(5): 1726-37.

[8]Iwamoto M, Watashi K, Tsukuda S, et al. Evaluation and identification of hepatitis B virus entry inhibitors using HepG2 cells overexpressing a membrane transporter NTCP [J].BiochemBiophysResCommun, 2014, 443(3): 808-13.

[9]Grimm D, Thimme R, Blum H E. HBV life cycle and novel drug targets [J].HepatolInt, 2011, 5(2): 644-53.

[10]潘愛萍, 黃古葉, 陳晶, 何燕玲. 乙型肝炎病毒cccDNA與HBx蛋白在肝細胞性肝癌中表達的關系及意義[J]. 世界華人消化雜志, 2009, 17(7): 712-5.

[10]Pan A P, Huang G Y, Chen J, He Y L. Relationship between hepatitis B virus covalently closed circular DNA and HBx protein expression in hepatocellular carcinoma and its signifi cance [J].WorldJGastroenterol, 2009, 17(7): 712-5.

[11]Kapranov P, Cawley S E, Drenkow J, et al. Large-scale transcriptional activity in chromosomes 21 and 22 [J].Science, 2002, 296(5569): 916-9.

[12]趙國明, 夏廣強, 朱學軍. 以核衣殼為靶點的抗乙型肝炎病毒藥物研究進展[J]. 國外醫學·藥學分冊, 2006, 33(6): 432-5.

[12]Zhao G M, Xia G Q, Zhu X J. Progress int the nucleocapsid targeting anti-hepatitis B virus drug research [J].SectPharmForeignMedSci, 2006, 33(6): 432-5.

[13]Ponsel D, Bruss V. Mapping of amino acid side chains on the surface of hepatitis B virus capsids required for envelopment and virion formation [J].JVirol, 2003, 77(1): 416-22.

[14]Zlotnick A, Ceres P, Singh S, Johnson J M. A small molecule inhibits and misdirects assembly of hepatitis B virus capsids [J].JVirol, 2002, 76(10): 4848-54.

[15]Stray S J, Bourne C R, Punna S, et al. A heteroaryldihydropyrimidine activates and can misdirect hepatitis B virus capsid assembly [J].ProcNatlAcadSciUSA, 2005, 102(23): 8138-43.

[16]Delaney WE 4th, Edwards R, Colledge D, et al. Phenylpropenamide derivatives AT-61 and AT-130 inhibit replicat ion of wild-type and lamivudine-resistant strains of hepatitis B virusinvitro[J].AntimicrobAgentsChemother, 2002, 46(9): 3057-60.

[17]Yang L, Shi L P, Chen H J, et al. Isothiafludine, a novel non-nucleoside compound, inhibits hepatitis B virus replication through blocking pregenomic RNA encapsidation [J].ActaPharmacolSin, 2014, 35(3): 410-8.

[18]Shim H Y, Quan X, Yi Y S, Jung G. Heat shock protein 90 facilitates formation of the HBV capsid via interacting with the HBV core protein dimers [J].Virology, 2011, 410(1): 161-9.

[19]Xu Y B, Yang L, Wang G F, et al. Benzimidazole derivative, BM601, a novel inhibitor of hepatitis B virus and HBsAg secretion [J].AntiviralRes, 2014, 107: 6-15.

[20]Zlotnick A, Mukhopadhyay S. Virus assembly, allostery and antivirals [J].TrendsMicrobiol, 2011, 19(1):14-23.

[21]Abdul F, Ndeboko B, Buronfosse T, et al. Potent inhibition of late stages of hepadnavirus replication by a modified cell penetrating peptide [J].PLoSOne, 2012, 7(11): e48721.

[22]Yang J, Ding X R, Zhang Y, et al. Fibronectin is essential for hepatitis B virus propagationinvitro: may be a potential cellular target [J].BiochemBiophysResCommun, 2006, 344(3): 757-64.

[23]Kann M, Sodeik B, Vlachou A, et al. Phosphorylation-dependent binding of hepatitis B virus core particles to the nuclear pore complex [J].JCellBiol, 1999, 145(1): 45-55.

[24]Zheng Y, Fu X D, Ou J H. Suppression of hepatitis B virus replication by SRPK1 and SRPK2 via a pathway independent of the phosphorylation of the viral core protein [J].Virology, 2005, 342(1): 150-8.

[25]Geller R, Taguwa S, Frydman J. Broad action of Hsp90 as a host chaperone required for viral replication [J].BiochimBiophysActa, 2012, 1823(3): 698-706.

[26]張恒輝, 郭芳, 費然, 等. CD4+ CD25+調節性T細胞在慢性乙型肝炎患者免疫發病機制中的作用[J]. 世界華人消化雜志, 2007, 15(20): 2225-30.

[26]Zhang H H, Guo F, Fei R, et al. Effects of regulatory T cells on anti-viral immune responses impaired by chronic hepatitis B [J].WorldJGastroenterol, 2007, 15( 20): 2225-30.

[27]李華, 許瑞安. 乙型肝炎的分子治療 [M]//許瑞安, 陳凌, 肖衛東, 主編. 分子基因藥物學. 北京: 北京大學出版社 & 北京大學醫學出版社聯合出版, 2008: 206-45.

[27]Li H,Xu R A. Molecular treatment of hepatitis B[M]//Xu R A,Chen L,Xiao W D.MolecularGeneMedicine. Beijing:Peking University Press & Peking University Medical Press, 2008: 206-45.

[28]李欣燕, 呂穎慧, 許瑞安. 肝硬化分子治療 [M]//許瑞安, 陳凌, 肖衛東, 主編. 分子基因藥物學. 北京: 北京大學出版社 & 北京大學醫學出版社聯合出版, 2008: 271-301.

[28]Li X Y,Lü Y H,Xu R A. Molecular treatment of liver cirrhosis[M]//Xu R A,Chen L,Xiao W D.MolecularGeneMedicine. Beijing:Peking University Press & Peking University Medical Press,2008:271-301.

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網絡出版時間：2015-1-9 13:37網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/doi/10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.002.html

Hepatitis B virus replication mechanisms and drug targets of chronic hepatitis B

HE Xiao-lin1，HUANG Jian-wei2，XU Rui-an1，CUI Xiu-ling1

(1.XiamenKeyLaboratoryofMarineandGeneticEngineeringDrugs，SchoolofBiomedicalScienceandInstituteof

MolecularMedicine,HuaqiaoUniversity&MolecularMedicineEngineeringResearchCenteroftheMinistryofEducation，

XiamenFujian361021,China; 2.XiamenCenterforDiseaseControlandPrevention,XiamenFujian361021,China)

Abstract：Hepatits B virus(HBV) infection is a global epidemic which seriously harms the public health. In spite of the great progress in hepatits B prevention and treatment, there is few effective medicine. Research findings show that liver damage and degree of liver failure are sophisticatedly related to the interaction between HBV and the immune response of host. All these make it important to know the replication mechanism and the contraction process, in order to lay a preliminary solid foundation for studying HBV drug targets and making a new ant-virus strategy. This article aims to summarize HBV viral replication process, while focusing on the latest research findings about drug targets, to find a new kind of anti-HBV drugs, and to explore the underlying mechanism of effective drugs.

Key words：hepatitis B virus；viral replication；drug targets；assembly；NTPC；core protein

通訊作者崔秀靈(1971-)，女，博士，教授，博士生導師，，Tel： 0592-6162996，E-mail：cuixl@hqu.edu.cn

作者簡介：赫曉林(1988-)，女，碩士，研究方向：海洋天然產物藥物，E-mail：hexiaolin88@126.com;

基金項目：福建省閩江學者支持計劃(No 10BS216)；廈門市科技計劃項目(No 350z20101014)；華僑大學基本科研業務費專項基金(No JB-GJ1008)；廈門南方海洋研究中心(No 13GYY003NF16)

收稿日期：2014-09-24，修回日期：2014-10-27

文獻標志碼：A

文章編號：1001-1978(2015)02-0152-05

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.002