丁溴東莨菪堿注射液有關物質的研究

丁溴東莨菪堿注射液有關物質的研究

陳青1，錢利民2，陳真1

(1.山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟南 250101；2.山東省千佛山醫院，山東 濟南250012)

摘要：目的建立高效液相色譜法測定丁溴東莨菪堿注射液的特定雜質托品酸。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，以0.004%磷酸溶液-乙腈(50∶50)配制的0.008 mol·L-1 十二烷基硫酸鈉溶液為流動相，柱溫為40 ℃，流速為1.2 mL·min-1,檢測波長為210 nm。結果高效液相色譜各雜質峰與主峰均分離良好；方法的精密度良好；雜質托品酸在2.38～14.31 μg·mL-1(r=0.999 9)內線性關系良好；雜質托品酸的檢出限為0.48 ng。結論該方法簡便，專屬性強，適用于有關物質的測定。

關鍵詞：高效液相色譜法；丁溴東莨菪堿注射液；有關物質；托品酸

作者簡介：陳青，女，副主任藥師，研究方向：藥物分析，E-mail:chenchenchenqing@sina.com

中圖分類號：R927.11文獻標識碼：A

Study on the related substances in Scopolamine Butylbromide Injection

CHENQing1,QIANLi-min2,CHENZhen1

(1.ShandongInstituteforFoodandDrugControl,Jinan250101,China；2.Shandong

QianfoshanHospital,Jinan250012,China)

Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of specified impurity in Scopolamine Butylbromide Injection.MethodsThe separation was carried out on a Kromasil C18 column(4.6 mm×250 mm,5 μm)，the mobile phase was 0.004% phosphoric acid solution-acetonitrile (50∶50),including 0.008 mol·L-1 sodium lauryl sulfate,the flow rate was 1.2 mL·min-1,the column temperature was 40 ℃ and the detection wavelength was 210 nm.Results Any impurity peak in the HPLC chromatogram was separated well from the main peak,the reproducibility and precision of the method were good,the linear range of tropic acid was 2.38～14.31 μg·mL-1(r=0.999 9),detection limit of tropic acid was 0.48 ng.ConclusionThe method was accurate,convenient and suitable for the quality control of related substance in Scopolamine Butylbromine Injection.

Key words:HPLC;Scopolamine Butylbromine Injection;Related substance;Tropic acid

丁溴東莨菪堿注射液屬抗膽堿藥,主要用于胃、十二指腸、結腸內窺鏡檢查的術前準備，內鏡逆行胰膽管造影[1～3]，和胃、十二指腸、結腸的氣鋇低張造影或腹部CT掃描的術前準備，可減少或抑制胃腸道蠕動； 用于各種病因引起的胃腸道痙攣、膽絞痛、腎絞痛或胃腸道蠕動亢進等[4～7]。該品種收載于《中國藥典》2010年版(二部)[8]，采用高效液相色譜法測定有關物質,國外藥典除《英國藥典》2015版外，其他藥典均未收載。檢驗過程中發現丁溴東莨菪堿注射液有2個比較明顯的雜質峰，現行標準中只對其中的一個峰，即氫溴酸東莨菪堿峰進行控制，經分析，另一雜質峰為丁溴東莨菪堿的降解產物托品酸，故有必要對另一雜質建立專屬性強的檢測方法。

1儀器與試藥

Agilent 1200高效液相色譜儀(美國Agilent公司)；丁溴東莨菪堿注射液(濰坊制藥廠,批號:20130101、20130102、20130103)；氫溴酸東莨菪堿對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:100049-201009)；托品酸(百靈威公司)；乙腈為色譜純，磷酸與十二烷基硫酸鈉為分析純,水為重蒸餾水。

2方法與結果

2.1色譜條件色譜柱：Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流動相：0.004%磷酸溶液-乙腈(50∶50)配制的0.008 mol·L-1十二烷基硫酸鈉溶液；柱溫：40 ℃；流速：1.2 mL·min-1；檢測波長：210 nm；進樣量：20 μL。

2.2溶液制備

2.2.1貯備溶液精密稱取托品酸9.54 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備溶液。

2.2.2供試品溶液精密量取本品適量，用水定量稀釋制成每1 mL中約含丁溴東莨菪堿2 mg的溶液，色譜圖見圖1。

2.2.3對照溶液取氫溴酸東莨菪堿對照品與托品酸適量，加水溶解并稀釋制成每1 mL中含氫溴酸東莨菪堿2 mg與托品酸1 mg的溶液，作為對照品溶液，精密量取供試品溶液2 mL和對照品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。

2.3檢出限取“2.2.1”項下貯備溶液適量，梯度稀釋，制備不同濃度的溶液，按“2.1”項下的色譜條件，注入液相色譜儀，按S/N=3計算檢出限，為0.48 ng。

2.4專屬性考察照生產企業處方配制空白陰性溶液，按“2.1”項下的色譜條件,注入液相色譜儀測定，結果顯示，輔料對樣品測定無干擾。色譜圖見圖1。

圖1　樣品HPLC圖 1.丁溴東莨菪堿；2.溴離子；3.托品酸；4.氫溴酸東莨菪堿

2.5線性關系精密量取“2.2.1”項下貯備液，用水定量稀釋成2.38、4.77、7.16、9.54、14.31 μg·mL-1的溶液，按“2.1”項下的色譜條件,注入液相色譜儀測定,記錄峰面積，以峰面積為縱坐標，溶液濃度為橫坐標繪制標準曲線，計算回歸方程：Y=21.07X+0.368(r=1.000)，線性范圍2.38～14.31 μg·mL-1。結果表明，托品酸在2.38～14.31 μg·mL-1濃度范圍內線性關系良好。

2.6精密度試驗取“2.2.1”項下貯備溶液，按“2.1”項下的色譜條件，注入液相色譜儀，連續進樣6次，RSD為0.2%。結果表明，儀器精密度良好。

2.7穩定性考察取“2.2.1”項下貯備溶液，分別于0、1、2、4、8 h，按“2.1”項下的色譜條件，注入液相色譜儀，峰面積的RSD為0.2%。結果表明，托品酸在8 h內穩定。

2.8耐用性試驗取“2.2.2”項下供試品溶液，分別考察流速、柱溫、流動相pH值有微小變化的條件下及不同液相色譜儀、不同型號色譜柱對方法的耐用性，結果表明，方法的耐用性良好。

2.9樣品測定取丁溴東莨菪堿注射液，按“2.2.2”和“2.2.3”配制供試品溶液和對照溶液，依法測定，結果見表1。

表1　雜質托品酸測定結果

3討論

3.1《中國藥典》2010年版僅將氫溴酸東莨菪堿進行了控制，其余雜質均按未知雜質處理，未能真實反映樣品中已知雜質的含量，新建立的方法使有關物質測定結果更接近于真實值。

3.2我們采用不同的色譜柱，測定托品酸的校正因子，不同色譜柱的校正因子在0.34～0.38之間，且不同色譜柱有一定的差異，因此有必要采用外標法對托品酸進行測定。

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