膠體金免疫層析法在檢測乙肝表面抗原方面的臨床價值

龍 暉 劉永蘭

在臨床上，進(jìn)行乙肝病毒抗原抗體檢測是篩查乙肝的主要方法。乙肝表面抗原（Hepatitis B surface antigens,HBsAg）是篩查乙肝的重要指標(biāo)。酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent Assay ,ELISA） 在 檢 測HBsAg方面具有高度的靈敏度和特異性[1]。目前，此法是進(jìn)行HbsAg 檢測最準(zhǔn)確的方法。膠體金免疫層析法（Gold ImmunochromatographyAssay , GICA）在檢測HBsAg方面具有檢測時間短、不需使用特殊設(shè)備等優(yōu)勢，近年來在臨床上得到了推廣應(yīng)用。為了分析GICA法在檢測HBsAg方面的臨床價值，我院對186 例患者的血清標(biāo)本及HBsAg 定值血清分別采用GICA法、ELISA法進(jìn)行HBsAg 檢測，并對比分析其檢測結(jié)果，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 試劑與儀器

本研究所用的3種HBsAg 定值血清均購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心，其中HBsAg的含量分別為0.5ng/ml、1.0ng/ml和2.0 ng/ml。本研究中采用GICA 法檢測HBsAg所用的GICA試紙條由杭州艾博生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，采用ELISA法檢測HBsAg所用的ELISA 試劑盒由上海英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)。本研究選用美國伯樂公司生產(chǎn)的CODA型全自動酶免分析儀對患者進(jìn)行相關(guān)的檢驗(yàn)。

1.2 血清標(biāo)本

本研究中的患者均為2013年6 月-2014年12 月我院收治的186 例患者。在這些患者中，有男性98例，女性92例，其年齡為18 -72 歲，平均年齡為（50.38±9.16）歲。在早晨這些患者空腹時抽取其4ml的外周靜脈血，置于離心機(jī)中以3000r/min的速度進(jìn)行高速離心操作，在10min后分離出血清待測。

1.3 方法

分別采用GICA 法和ELISA 法檢測HBsAg 定值血清和本組患者的待測血清。在采用GICA 法進(jìn)行HBsAg檢測時將試紙條固定在操作卡上，用一次性微量吸管吸取20μl以上的待測血清，滴于試紙條的加樣區(qū)內(nèi)，在10 -30 分鐘內(nèi)判讀檢測結(jié)果。在采用ELISA 法進(jìn)行HBsAg檢測時，用CODA 型全自動酶免分析儀分別對定值血清與患者待測血清的標(biāo)本進(jìn)行檢測，并嚴(yán)格按照試劑盒的說明書進(jìn)行相關(guān)的操作。參照J(rèn)iang 等[2]的方法判讀檢測結(jié)果。采用GICA法進(jìn)行HBsAg檢測的陽性判定標(biāo)準(zhǔn)是：在完成檢測操作后，檢測帶呈紅色。采用ELISA 法進(jìn)行HBsAg檢測的陽性判定標(biāo)準(zhǔn)是：S/CO≥1.0。將為本組患者采用ELISA 法進(jìn)行HBsAg檢測獲得的結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析對其采用GICA法進(jìn)行檢測的靈敏度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件錄入數(shù)據(jù)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，用免疫層析法檢測HBsAg的符合率與靈敏度采用頻數(shù)和率（n%）表示，行卡方檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 采用GICA法與ELISA法對HBsAg定值血清進(jìn)行HBsAg檢測結(jié)果的分析

在用GICA法對HBsAg定值血清進(jìn)行HBsAg檢測時，最小的HBsAg檢出量為1.0ng/ml。 在用ELISA法對HBsAg定值血清進(jìn)行HBsAg檢測時，最小的HBsAg檢出量為0.5ng/ml。詳情見表1。

表1 采用GICA法與ELISA 法對HBsAg定值血清進(jìn)行HBsAg檢測的結(jié)果分析

2.2 對本組患者的血清標(biāo)本采用GICA法與ELISA法進(jìn)行HBsAg檢測的結(jié)果分析

對本組患者的待測血清采用GICA 法進(jìn)行HBsAg檢測的陽性率為20.43%，對其采用ELISA 法進(jìn)行檢測的陽性率為22.58%，二者相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.255,P＞0.05）。以對本組患者的血清采用ELISA 法進(jìn)行檢測的結(jié)果為準(zhǔn)，對本組患者采用GICA法進(jìn)行檢測的符合率為97.30%，敏感度為90.48%。詳情見表2。

表2 對本組患者的血清標(biāo)本采用GICA法與ELISA 法進(jìn)行HBsAg檢測結(jié)果的分析[n（%）]

3 討論

在臨床上，乙型肝炎病毒（HBV）血清標(biāo)志物的免疫學(xué)檢測法主要有ELISA法、化學(xué)發(fā)光法及時間分辨免疫熒光法。其中，ELISA 法在檢測HBV血清標(biāo)志物方面具有高度的特異性和靈敏性，是進(jìn)行HbsAg 檢測最準(zhǔn)確的方法[3]。但此法的操作程序復(fù)雜，獲得檢測結(jié)果的時間較長，不適合對急診患者進(jìn)行HbsAg 檢測。GICA法是一種操作快速簡易的免疫學(xué)標(biāo)記物檢測方法，在檢測HBsAg方面具有操作簡便快速、檢測時間短、對樣本的污染少、不需使用特殊設(shè)備、可進(jìn)行單份樣本測定等優(yōu)點(diǎn)[4]。

本研究的結(jié)果顯示，ELISA 法與GICA 法均是檢測HBsAg 的理想方法，但采用ELISA 法檢測HBsAg 的敏感度高于GICA 法。在用GICA 法對乙肝患者進(jìn)行HbsAg檢測時，其病情有可能被漏診。這一結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的研究結(jié)果相一致[5]。在臨床上，我們應(yīng)根據(jù)患者的具體情況為其合理地選擇ELISA 法與GICA 法進(jìn)行HbsAg 檢測[6]。對于急診患者及進(jìn)行乙肝初篩的患者，可為其首選GICA 法進(jìn)行HbsAg 檢測。在患者的條件允許時可為其首選敏感度高的ELISA酶免法進(jìn)行HbsAg檢測，以提高其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

[1] 張茂海，吳建業(yè)，陸玲娜，等. 膠體金與酶聯(lián)免疫法檢測乙肝表面抗原結(jié)果分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（14）:1625-1626.

[2] Jiang SF, Zhang XP, Li BL, et al. Evaluation of partially purified soluble egg antigens in colloidal gold immunoc hromatography assay card for rapid detection of anti-Schistosoma japonicum antibodies[J]. Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2014，45（3）：568-75

[3] 陳佑明, 黃敬, 劉京平,等. 兩種方法檢測乙型肝炎病毒表面抗原的比較[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6（7）：495-496.

[4] 孟峻，張保平，王永祥，等.膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原應(yīng)用評價[J].中國病案，2013，14（11）：1-2.

[5] 李伶俐，孫俊聰. 400 例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2011，8（28）:35-36.

[6] 簡敏華，張健，陳慧英，等. 乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物GICA檢測性能的比對分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，11：1040-1043.