膠體金免疫層析法在檢測乙肝表面抗原方面的臨床價值

龍 暉 劉永蘭

在臨床上，進行乙肝病毒抗原抗體檢測是篩查乙肝的主要方法。乙肝表面抗原（Hepatitis B surface antigens,HBsAg）是篩查乙肝的重要指標。酶聯免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent Assay ,ELISA） 在 檢 測HBsAg方面具有高度的靈敏度和特異性[1]。目前，此法是進行HbsAg 檢測最準確的方法。膠體金免疫層析法（Gold ImmunochromatographyAssay , GICA）在檢測HBsAg方面具有檢測時間短、不需使用特殊設備等優勢，近年來在臨床上得到了推廣應用。為了分析GICA法在檢測HBsAg方面的臨床價值，我院對186 例患者的血清標本及HBsAg 定值血清分別采用GICA法、ELISA法進行HBsAg 檢測，并對比分析其檢測結果，現報告如下：

1 資料與方法

1.1 試劑與儀器

本研究所用的3種HBsAg 定值血清均購自衛生部臨床檢驗中心，其中HBsAg的含量分別為0.5ng/ml、1.0ng/ml和2.0 ng/ml。本研究中采用GICA 法檢測HBsAg所用的GICA試紙條由杭州艾博生物醫藥有限公司生產，采用ELISA法檢測HBsAg所用的ELISA 試劑盒由上海英科新創科技有限公司生產。本研究選用美國伯樂公司生產的CODA型全自動酶免分析儀對患者進行相關的檢驗。

1.2 血清標本

本研究中的患者均為2013年6 月-2014年12 月我院收治的186 例患者。在這些患者中，有男性98例，女性92例，其年齡為18 -72 歲，平均年齡為（50.38±9.16）歲。在早晨這些患者空腹時抽取其4ml的外周靜脈血，置于離心機中以3000r/min的速度進行高速離心操作，在10min后分離出血清待測。

1.3 方法

分別采用GICA 法和ELISA 法檢測HBsAg 定值血清和本組患者的待測血清。在采用GICA 法進行HBsAg檢測時將試紙條固定在操作卡上，用一次性微量吸管吸取20μl以上的待測血清，滴于試紙條的加樣區內，在10 -30 分鐘內判讀檢測結果。在采用ELISA 法進行HBsAg檢測時，用CODA 型全自動酶免分析儀分別對定值血清與患者待測血清的標本進行檢測，并嚴格按照試劑盒的說明書進行相關的操作。參照Jiang 等[2]的方法判讀檢測結果。采用GICA法進行HBsAg檢測的陽性判定標準是：在完成檢測操作后，檢測帶呈紅色。采用ELISA 法進行HBsAg檢測的陽性判定標準是：S/CO≥1.0。將為本組患者采用ELISA 法進行HBsAg檢測獲得的結果作為金標準，分析對其采用GICA法進行檢測的靈敏度。

1.4 統計學方法

采用SPSS19.0統計學軟件錄入數據并進行統計學分析，用免疫層析法檢測HBsAg的符合率與靈敏度采用頻數和率（n%）表示，行卡方檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 采用GICA法與ELISA法對HBsAg定值血清進行HBsAg檢測結果的分析

在用GICA法對HBsAg定值血清進行HBsAg檢測時，最小的HBsAg檢出量為1.0ng/ml。 在用ELISA法對HBsAg定值血清進行HBsAg檢測時，最小的HBsAg檢出量為0.5ng/ml。詳情見表1。

表1 采用GICA法與ELISA 法對HBsAg定值血清進行HBsAg檢測的結果分析

2.2 對本組患者的血清標本采用GICA法與ELISA法進行HBsAg檢測的結果分析

對本組患者的待測血清采用GICA 法進行HBsAg檢測的陽性率為20.43%，對其采用ELISA 法進行檢測的陽性率為22.58%，二者相比差異無統計學意義（χ2=0.255,P＞0.05）。以對本組患者的血清采用ELISA 法進行檢測的結果為準，對本組患者采用GICA法進行檢測的符合率為97.30%，敏感度為90.48%。詳情見表2。

表2 對本組患者的血清標本采用GICA法與ELISA 法進行HBsAg檢測結果的分析[n（%）]

3 討論

在臨床上，乙型肝炎病毒（HBV）血清標志物的免疫學檢測法主要有ELISA法、化學發光法及時間分辨免疫熒光法。其中，ELISA 法在檢測HBV血清標志物方面具有高度的特異性和靈敏性，是進行HbsAg 檢測最準確的方法[3]。但此法的操作程序復雜，獲得檢測結果的時間較長，不適合對急診患者進行HbsAg 檢測。GICA法是一種操作快速簡易的免疫學標記物檢測方法，在檢測HBsAg方面具有操作簡便快速、檢測時間短、對樣本的污染少、不需使用特殊設備、可進行單份樣本測定等優點[4]。

本研究的結果顯示，ELISA 法與GICA 法均是檢測HBsAg 的理想方法，但采用ELISA 法檢測HBsAg 的敏感度高于GICA 法。在用GICA 法對乙肝患者進行HbsAg檢測時，其病情有可能被漏診。這一結果與相關文獻報道的研究結果相一致[5]。在臨床上，我們應根據患者的具體情況為其合理地選擇ELISA 法與GICA 法進行HbsAg 檢測[6]。對于急診患者及進行乙肝初篩的患者，可為其首選GICA 法進行HbsAg 檢測。在患者的條件允許時可為其首選敏感度高的ELISA酶免法進行HbsAg檢測，以提高其檢測結果的準確性。

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[2] Jiang SF, Zhang XP, Li BL, et al. Evaluation of partially purified soluble egg antigens in colloidal gold immunoc hromatography assay card for rapid detection of anti-Schistosoma japonicum antibodies[J]. Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2014，45（3）：568-75

[3] 陳佑明, 黃敬, 劉京平,等. 兩種方法檢測乙型肝炎病毒表面抗原的比較[J]. 檢驗醫學與臨床，2009，6（7）：495-496.

[4] 孟峻，張保平，王永祥，等.膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原應用評價[J].中國病案，2013，14（11）：1-2.

[5] 李伶俐，孫俊聰. 400 例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結果分析[J].中國醫學創新,2011，8（28）:35-36.

[6] 簡敏華，張健，陳慧英，等. 乙型肝炎病毒血清標志物GICA檢測性能的比對分析[J].檢驗醫學，2013，11：1040-1043.