淺析結核分枝桿菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥性

吳懷戈

氟喹諾酮類藥物是治療結核病的常用藥物。近年來，隨著結核病發病率的不斷升高，結核病患者對氟喹諾酮類藥物的抗藥性也隨之增強，嚴重地影響其治療效果。為了進一步探討結核分枝桿菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥性，筆者對2014年9月～2015年5月期間在我院接受治療的結核病患者攜帶的178株結核分枝桿菌的檢測資料進行回顧性研究，以便為臨床合理用藥提供參考。現將研究結果報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對象為2014年9月～2015年5月期間在我院接受治療的結核病患者攜帶的178株結核分枝桿菌。這178株結核分枝桿菌經常規生化鑒定和分子生物學鑒定后，均被確定為結核分枝桿菌。

1.2 檢測方法

使用液體培養基聯合MTT技術對這178例結核分枝桿菌均進行耐藥性檢測。進行檢測的項目為，氧氟沙星、莫西沙星和左氧氟沙星對這178株結核分枝桿菌的最低抑菌濃度（MIC）和BactecMGIT960藥敏性。進行耐藥性檢測的方法為：①配制7H9-S液體培養基：Middleebrook7H9液體培養基，包括0.5%的甘油，0.1%的酪蛋白胨，葡萄糖，10%的油酸，牛血清白蛋白，過氧化氫酶添加劑。②配制試劑的方法：用0.1mol/L的NaOH溶解氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星，將其分裝后放置在-70℃中備用。使用PH=6.8的磷酸緩沖液溶解MTT（噻唑藍），將其配制成濃度為5mg/ml的溶液，用0.22μm的無菌濾過器對此溶液進行除菌后，避光放置在4℃中備用。③進行MIC檢測的方法為：按照WHO推薦的比例法對這178株結核分枝桿菌進行藥敏試驗，接種量為10-104。將這三種氟喹諾酮類藥物的藥物濃度設定為：氧氟沙星的濃度為0.125～32μg/ml，左氧氟沙星的濃度為0.125～32μg/ml，莫西沙星的濃度為0.063～4μg/ml。④進行MGIT960藥敏檢測的方法為：按照柳正衛等人[1]的試驗方法對這178株結核分枝桿菌對氧氟沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的耐藥性進行檢測。將H37Rv作為每次試驗的質控菌株。

2 結果

2.1 進行MGIT960藥敏檢測的結果

在這178株結核分枝桿菌中，對氧氟沙星敏感的菌株有119株，對該藥耐藥的菌株有59株（占33.1%），有82株菌株對一線抗結核藥和兩種二線抗結核藥全敏，其中對氧氟沙星耐藥的菌株有2株，其MIC值分別為2μg/ml和0.5μg/ml。在這82株菌株中，有80株對氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星均敏感，其中氧氟沙星對這些菌株的MIC值為2μg/ml，左氧氟沙星對這些菌株的MIC值為1μg/ml，莫西沙星對這些菌株的MIC值為0.25μg/ml。在這178株結核分枝桿菌中，有86株菌株對一線抗結核藥物全敏，其中氧氟沙星對這些菌株的MIC值為4μg/ml，左氧氟沙星對這些菌株的MIC值為2μg/ml，莫西沙星對這些菌株的MIC值為0.5μg/ml。上述結果顯示，這178株結核分枝桿菌對氧氟沙星的耐藥性最高，對左氧氟沙星的耐藥性次之，對莫西沙星的耐藥性最低。

2.2 對三種氟喹諾酮類藥物對耐多藥結核分枝桿菌進行MIC檢測的結果

在這178株結核分枝桿菌中，耐多藥結核分枝桿菌有74株。這74株結核分枝桿菌對莫西沙星的的MIC值均≤1μg/ml。對這三種藥物進行兩兩秩和檢驗的結果顯示，其P值均小于0.05。詳情見表1。

表1 這74株耐多藥結核分枝桿菌在不同藥物濃度下其MIC值的分布

2.3 對廣泛耐藥結核分枝桿菌進行MIC檢測的結果

在這178株結核分枝桿菌中，廣泛耐藥的菌株有28株，占15.7%。對這28株廣泛耐藥的菌株對這三種氟喹諾酮類藥進行MIC檢測的結果為：氧氟沙星對這些菌株的MIC值≥8μg/ml的菌株有15株（占53.6%），左氧氟沙星對這些菌株的MIC值≥4μg/ml的菌株有18株（占64.3%）。對這兩種藥物進行比較秩和檢驗的P值均小于0.05。這說明，這28株菌株對氧氟沙星和左氧氟沙星均具有耐藥性。

3 討論

目前，在臨床上結核分枝桿菌對常用的氟喹諾酮類藥物中的氧氟沙星的耐藥性最為嚴峻，對左氧氟沙星的耐藥性次之[2]。在6種一線和二線抗結核病藥物中，結核分枝桿菌對氧氟沙星的耐藥性最高[3]。因此，在使用氟喹諾酮類藥物對結核病患者進行治療時，應充分重視其所攜帶的結核分枝桿菌對氧氟沙星和左氧氟沙星的耐藥性，需根據其進行藥敏檢測的結果，為其合理用藥。

[1] 柳正衛,何海波,繆梓萍等.984株結核分枝桿菌耐藥情況分析.中國防疥雜志,2007,29(2):167-170.

[2] 吳小林.結核病藥物研發的進展、挑戰和展望[J].國外醫藥抗生素分冊,2010,31(3):119-123.

[3] 中華人民共和國衛生部.全國結核病耐藥性基線調查報告(2007-2008年).人民衛生出版社,2010:25-52.