鄭松巖
梅毒標(biāo)本的批量檢測方法探討
鄭松巖
目的比較常用的三種檢測梅毒血清方法,包括梅毒酶及其免疫吸附檢測(TP-ELISA,ELISA檢測);梅毒明膠粒凝集檢測(TP-PA,PA檢測);常規(guī)性快速血漿反應(yīng)素的環(huán)狀卡片檢測(RPR檢測),以便找出適合梅毒標(biāo)本批量檢測的有效措施。方法2269例住院患者的標(biāo)本,使用RPR、PA、ELISA檢測三種不同方式對這些標(biāo)本進(jìn)行篩查與確認(rèn)。結(jié)果2269份樣本中,單純性使用ELISA檢測得到的陽性結(jié)果有57例,占2.51%;單純性使用PA檢測得到陽性結(jié)果有61例,占2.69%;單純性使用RPR檢測得到陽性結(jié)果有47例,占2.07%。若以ELISA檢測結(jié)果為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對57例陽性患者進(jìn)行PA檢測,陽性55例,兩種檢測結(jié)果的相符率為96.49%。若以PA檢測為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對61例陽性患者進(jìn)行RPR檢測,陽性23例,相符率為37.70%。若以RPR檢測結(jié)果為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對47例陽性患者進(jìn)行PA檢測,陽性39例,相符率為82.98%。結(jié)論批量梅毒檢測處理量較大,對檢測結(jié)果的質(zhì)量和速度要求較高,首先對患者進(jìn)行ELISA檢測,取陽性樣本使用PA檢測排除假陽性可能,留下真陽性患者,使用RPR檢測確定患者最終病情以及獲得治療方法。該種批量檢測方法速度快,真陽性檢測準(zhǔn)確率較高,可用于臨床常規(guī)性檢測應(yīng)用推廣。
梅毒;批量檢測;環(huán)狀卡片檢測;梅毒酶及其免疫吸附檢測;梅毒明膠粒凝集檢測
梅毒是一種常見的性疾病,傳播范圍較廣,傳播速度較快,主要致病原因是患者機(jī)體被梅毒螺旋體感染所致[1,2]。根據(jù)我國2012年的健康調(diào)查結(jié)果顯示,梅毒患者已經(jīng)超過百萬,且常規(guī)外科手術(shù)前檢查、婚前檢查、孕期檢查、輸血檢查等均需要用到梅毒檢測,檢測患者基數(shù)較大,對檢測結(jié)果要求較高,檢測結(jié)果要求急。在這種需求環(huán)境下,院內(nèi)快速批量梅毒檢測方法已經(jīng)亟待出臺,本文以RPR檢測、PA檢測、ELISA檢測方式為主要闡述點(diǎn),探究院內(nèi)快速梅毒診斷方法,提出建設(shè)意見。現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。
1.1 一般資料 選取本院2012年8月~2013年8月所給予檢測的2269例患者的臨床檢測報告。其中男995例,女1274例。年齡最大73歲,最小17歲,平均年齡(34.7±12.8)歲。其中常規(guī)性孕期檢測患者有312例,眼科相關(guān)手術(shù)前檢測患者923例,婚前檢測患者651例,皮膚疾病治療前檢測患者113例,常規(guī)體檢患者270例。該部分患者中曾有過梅毒感染史的患者共有396例,占總比例的17.45%,有過不潔性行為者629例,占27.72%,直系親屬有梅毒感染病史者178例,占7.84%。
1.2 檢測方法 本次研究中主要使用三種檢測方式:RPR檢測、PA檢測、ELISA檢測,使用院內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)檢測劑和檢測設(shè)備,由專業(yè)醫(yī)師進(jìn)行操作。首先對2269例患者進(jìn)行三種檢測,對比檢測結(jié)果的差異性,以及檢測時間。之后分別以PA檢測、ELISA檢測、RPR檢測作為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)對2269例患者進(jìn)行檢測,取陽性樣本進(jìn)行交叉檢測,最后留下的真陽性樣本使用。對比三種檢測方式的結(jié)果和真陽性結(jié)果發(fā)現(xiàn)幾率,合理考慮聯(lián)合使用方式,制訂批量梅毒檢測方式。
2269份樣本中,單純性使用ELISA檢測得到的陽性結(jié)果有57例,占2.51%;單純性使用PA檢測得到陽性結(jié)果有61例,占2.69%;單純性使用RPR檢測得到陽性結(jié)果有47例,占2.07%。若以ELISA檢測結(jié)果為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對57例陽性患者進(jìn)行PA檢測,陽性55例,兩種檢測結(jié)果的相符率為96.49%。若以PA檢測為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對61例陽性患者進(jìn)行RPR檢測,陽性23例,相符率為37.70%。若以RPR檢測結(jié)果為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn),對47例陽性患者進(jìn)行PA檢測,陽性39例,相符率為82.98%。分別以PA、RPR、ELISA單獨(dú)檢測結(jié)果為指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)后采用其他方法進(jìn)行檢測結(jié)果。見表1。
根據(jù)上文的研究結(jié)果顯示,三種梅毒檢測結(jié)果均存在假陽性結(jié)果的可能,其中ELISA檢測與PA檢測結(jié)果的相符率較高,而RPR檢測與其他兩者的相符率較低,應(yīng)將RPR檢測作為臨床治療和定斷的最后依據(jù)。
單純性使用RPR、PA、ELISA檢測中的任何一種檢測方式均不能有效提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報告,均有假陽性樣本存在。假陽性梅毒樣本存在的主要原因是當(dāng)患者受到梅毒螺旋體感染后機(jī)體內(nèi)會生成特異性的梅毒螺旋體抗體(TPAB)以及非特異性抗體,而兩種抗體的生成數(shù)量與梅毒螺旋病毒的侵染時間以及侵染量成正比關(guān)系,梅毒患者的不同病理階段,兩種抗體的生成數(shù)量不同,而以上三種檢測方式對不同抗體的敏感程度不同,為了全面判定梅毒患者的病理特征,單純性使用一種檢測方式是無法對梅毒結(jié)果進(jìn)行準(zhǔn)確檢測的,要聯(lián)合至少兩種檢測方法。本次研究為了滿足院內(nèi)梅毒檢測量化以及準(zhǔn)確化的總體要求,決定使用三種檢測方式聯(lián)合檢測的方式,最終確定結(jié)果,下文重點(diǎn)闡述檢測方法排順的根據(jù)。一般來講梅毒檢測主要以兩個方向?yàn)橹鳎好范韭菪w血清檢測以及非梅毒螺旋體血清檢測,其中前者為確診之用,后者則為確定梅毒病理期限和治療方法之用[2,3]。三種檢測方法中,PA檢測為梅毒確診性檢測,ELISA檢測為特異性抗體檢測,RPR為非特異性抗體檢測。其中只要患者曾經(jīng)患有過梅毒,無論通過何種治療方式治療,患者終生都有可能會攜帶特異性梅毒抗體,所以在檢測中可能出現(xiàn)假陽性病例。而RPR檢測則是對梅毒螺旋抗體侵染后集體產(chǎn)生出的一系列反應(yīng)素進(jìn)行檢測,但諸如孕婦懷孕、常見急性傳染性疾病患者的RPR檢測結(jié)果可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果,所以在臨床檢測過程中RPR不可以用作指導(dǎo)性檢測手段。另外RPR檢測結(jié)果也與患者梅毒的病發(fā)時間有著緊密的關(guān)系,實(shí)驗(yàn)表明在梅毒初期患者體內(nèi)反應(yīng)素生成量不多,所以RPR檢測結(jié)果出現(xiàn)陰性,所以在臨床檢測過程中可以使用RPR作為判定患者梅毒期數(shù)的標(biāo)準(zhǔn),用于治療方法確定之用。另外ELISA檢測結(jié)果雖然對梅毒有著較高的敏感度,但其只能判定患者體內(nèi)是否存在梅毒抗體,不能證明該梅毒抗體是由于現(xiàn)行梅毒侵染所產(chǎn)生或是曾經(jīng)治愈后留下的。PA檢測結(jié)果對梅毒活動性有著較為理想判定效果,可以證明梅毒螺旋體是否正在進(jìn)行活動[4,5]。
綜上所述,確定梅毒檢測順序?yàn)槭紫冗M(jìn)行ELISA檢測,取陽性樣本使用PA檢測排除假陽性可能,留下真陽性患者,使用RPR檢測確定患者最終病情以及獲得治療方法。該種批量檢測方法速度快,真陽性檢測準(zhǔn)確率較高,具有實(shí)踐應(yīng)用意義,可用于臨床常規(guī)性檢測應(yīng)用推廣。
[1]阮豪驥.兩種梅毒檢測方法比較的初步研究.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,20(12):180-186.
[2]趙艷華,譚浩,張傳桂.梅毒血清學(xué)試驗(yàn)三種方法比較評價.當(dāng)代醫(yī)學(xué),2012,14(7):295-298.
[3]蔣銀,王紅華,馮婭萍.三種梅毒血清學(xué)試驗(yàn)在梅毒診斷中的臨床對比研究.中國性科學(xué),2013,22(11):40-42.
[4]梁雪靜,李永東,張德志,等.1119例血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)聯(lián)合梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對梅毒院內(nèi)檢測結(jié)果觀察.新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2012,11(2):398-401.
[5]李金,劉培,陳慧.評價梅毒RPR、ELISA、TPPA血清學(xué)檢測方法的臨床意義.上海醫(yī)科大學(xué),2012.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.018
2015-12-07]
124200 大洼縣疾病預(yù)防控制中心微生物檢驗(yàn)科