結腸腺癌組織Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白表達及意義

楊瑞琦 王鐘焰

(齊齊哈爾醫學院附屬第三醫院肛腸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

結腸腺癌組織Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白表達及意義

楊瑞琦 王鐘焰

(齊齊哈爾醫學院附屬第三醫院肛腸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

目的 檢測結腸腺癌中絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)的表達，分析其臨床意義。方法 85例結腸腺癌患者術后的蠟塊組織作為觀察組，30例結腸黏膜上皮內瘤變組織作為對照組，非腫瘤性的結腸黏膜組織30例作為正常對照組。應用免疫組化方法檢測三組中Aurora-B和TPX-2的表達。結果 三組中Aurora-B和TPX-2陽性率差異顯著。觀察組中Aurora-B和TPX-2的陽性率與腫瘤的分化程度密切相關，Aurora-B的陽性率與腫瘤的淋巴結轉移密切相關，TPX-2的陽性率與腫瘤的Ki67增殖指數密切相關。結論 Aurora-B和TPX-2在結腸腺癌中高表達是促進腫瘤形成的重要因素，二者異常表達可以促進腫瘤的進展。

結腸腺癌；Aurora-B；靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)

結腸腺癌為黏膜腺體異型增生(上皮內瘤變)后的繼發性病變，病變以侵襲肌層為特征，在此過程中，相關基因和蛋白的表達失調，對促進腫瘤形成有重要影響〔1,2〕。絲氨酸/蘇氨酸激酶家族被認為與腫瘤性病變有關，其共包括3個成員，Aurora-B是家族中的經典成員，參與多種生物學過程，在調節細胞有絲分裂的中心體調節、紡錘體形成、染色體分離等過程中發揮重要作用〔3,4〕。靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)是一個受細胞周期嚴格調控的細胞核增殖蛋白，參與細胞有絲分裂的紡錘體微管功能，近年研究認為Aurora-B和TPX-2可能在腫瘤形成和進展中有重要促進作用〔5,6〕。本實驗檢測結腸腺癌組織Aurora-B和TPX-2的表達，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年1～12月我院結腸腺癌住院患者85例為觀察組，均行根治手術，術后經病理醫師確診及明確分型，同時符合WHO中的診斷標準，其中男44例，女41例；年齡36～83歲，平均(57.2±9.0)歲。30例結腸黏膜上皮內瘤變組織作為對照組，其中男15例，女15例；年齡34～75歲，平均(53.6±8.6)歲。非腫瘤性的結腸黏膜組織30例作為正常對照組，其中男15例，女15例；年齡38～78歲，平均(56.4±8.5)歲。三組常規資料無明顯差異。

1.2 Aurora-B和TPX-2的檢測方法 術后組織均常規取材，并應用甲醛溶液固定，石蠟包埋后切取4 μm切片，烤片20 min后，行Aurora-B和TPX-2蛋白的檢測。Aurora-B和TPX-2的檢測均采用免疫組化二步法，應用二氨基聯苯胺(DAB)顯色。

1.3 Aurora-B和TPX-2結果的判讀 Aurora-B和TPX-2均以細胞核中出現淺黃色到深棕色顆粒為陽性反應細胞，選擇上皮細胞染色集中的區域進行觀察，選擇400倍的視野共3個分別計數，計算陽性率，取平均值。以陽性率<5%為陰性，以陽性率≥5%為陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行χ2檢驗或線性相關性分析。

2 結 果

2.1 3組Aurora-B和TPX-2陽性率的比較 3組Aurora-B和TPX-2陽性率差別顯著(P<0.001)。見表1。

表1 各組Aurora-B和TPX-2陽性表達比較〔n(%)〕

組別nAurora?BTPX?2觀察組8536(42 4)46(54 1)對照組306(20 0)8(26 7)正常對照組302(6 7)3(10 0)χ2/P值11 25/<0 00110 24/<0 001

2.2 觀察組Aurora-B和TPX-2 在不同臨床病理特征中比較 觀察組Aurora-B和TPX-2陽性率與腫瘤分化程度密切相關，觀察組Aurora-B陽性率與腫瘤淋巴結轉移密切相關，TPX-2陽性率與腫瘤Ki67增殖指數密切相關。見表2。

表2 不同臨床病理特征的觀察組Aurora-B和TPX-2表達〔n(%)〕

臨床特征nAurora?BTPX?2分化程度 高399(23 1)13(33 3) 中3419(55 9)23(67 6) 低128(66 7)10(83 3) χ2值 P值8 2680 0048 9870 002淋巴結轉移 無6020(33 3)30(50 0) 有2516(64 0)16(64 0) χ2值 P值6 7970 0091 3930 340Ki67增殖指數 <25%2412(50 0)8(33 3) ≥25%6124(39 3)38(62 3) χ2值 P值0 8010 4665 8180 028

3 討 論

結腸腺癌是高增殖性腫瘤，病變形成時腺管異型，在肌層出現明顯的浸潤性生長，腫瘤是高增殖性病變，在增殖過程中，有絲分裂過程中的偏差也可以導致基因組的不穩定，從而引發腫瘤性的失控性增生〔7,8〕。本實驗提示Aurora-B和TPX-2異常表達可以促進結腸黏膜腺上皮的異型增生、癌變。二者參與腫瘤由幼稚到成熟的形成過程，二者高表達時提示腫瘤處于幼稚狀態，此時幼稚的細胞異型性大，細胞核染色深，細胞出現明顯的分化失成熟的現象。Aurora-B高表達可能提示或預示著淋巴道播散，此時腫瘤細胞播散的潛能升高，手術不易切除干凈，臨床預后可能較差。TPX-2高表達可以促進腫瘤細胞的分裂和繁殖過程，促進腫瘤細胞的增生，腫瘤體積增大。Aurora-B是有絲分裂中組蛋白H3的10位絲氨酸化所必需的激酶，對染色體的濃縮非常重要。Aurora-B有調節動力的功能，是糾正染色體排列和分離、調整紡錘體檢查點功能和胞質分裂所必需的〔9,10〕。Aurora-B被認為是染色體的過客蛋白，其主要定位于有絲分裂早期的染色體著絲粒的相關分布區域，在細胞分裂的后期則從著絲粒移至紡錘體赤道板的微管的位置，隨著紡錘體的有效延伸，細胞開始出現分裂〔11,12〕。有研究認為Aurora-B可以聚集于紡錘體中央裂溝的部位，并可以向內移動，最終在中間體處形成聚集〔13〕。有研究認為Aurora-B可以與3個染色體過客蛋白-INCENP、survivin和Borealin進行結合發揮作用〔14〕，因此Aurora-B可能發揮相關蛋白的協同作用，共同促進腫瘤性病變的形成。TPX-2基因是一個分子量為100 kD的核增殖相關蛋白，位于染色體20q11.2，其表達狀態受細胞周期的嚴格調控，有研究認為TPX-2只在G1-S期交界期被檢測到，在細胞分裂完成后則消失〔15〕。而在S期和G2期，TPX-2分布在細胞核，在分裂期細胞可以與有絲分裂的紡錘體密切結合，動力蛋白XkIp2靶向附著于紡錘體的微管，從而保證正常的紡錘體極性〔16〕。TPX-2在人體組織，特別是腫瘤中的過度表達可以引起中心體擴增，異倍體形成，促進腺上皮組織的癌變和惡性腫瘤的進展〔17〕。劉紅春等〔18〕觀察TPX-2在食管鱗癌中的表達，發現TPX-2在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌組織中的表達率依次增加，認為TPX-2蛋白異常表達可能是食管鱗癌淋巴結轉移的危險因素，TPX-2的檢測可望成為食管鱗癌早期診斷指標。因此Aurora-B和TPX-2高表達對腫瘤的形成和進展可能有一定的提示作用〔17，19，20〕。

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〔2015-04-18修回〕

(編輯 苑云杰)

齊齊哈爾市科技局社會發展計劃重點項目(No.SFGG-201313)

楊瑞琦(1983-)，男，主治醫師，碩士，主要從事肛腸疾病研究。

R735

A

1005-9202(2016)24-6169-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.059