腎透明細胞癌中Smad3、4和磷酸酶及張力蛋白同源蛋白的表達及意義

姜擁軍

(臨沂市第三人民醫院泌尿外科，山東　臨沂　276023)

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腎透明細胞癌中Smad3、4和磷酸酶及張力蛋白同源蛋白的表達及意義

姜擁軍

(臨沂市第三人民醫院泌尿外科，山東臨沂276023)

摘要〔〕目的檢測腎透明細胞癌中Smad蛋白(Smad)3、4和磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)的表達，觀察其臨床意義。方法56例腎透明細胞癌患者臨床資料及術后標本作為觀察組，40例距腫瘤邊緣>3 cm的正常腎皮質作為對照組。應用免疫組化方法檢測兩組中Smad3、4和PTEN的表達。結果兩組Smad3、4和PTEN表達陽性率差別均顯著。觀察組Smad3、4和PTEN表達陽性率與腫瘤最大徑、Fuhrman分級密切相關，而與性別、年齡因素無關。相關性分析顯示觀察組中Smad3和PTEN、Smad4和PTEN間表達均呈正相關性。結論腎透明細胞癌術后組織中Smad3、4和PTEN低表達是促進腫瘤的發生和進展的重要因素。

關鍵詞〔〕腎透明細胞癌；Smad3；Smad4；磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)

第一作者：姜擁軍(1972-)，男，副主任醫師，主要從事泌尿系統疾病研究。

腎透明細胞癌病變形成過程中涉及癌基因和抑癌基因的表達失調〔1，2〕。Smad蛋白家族是轉化生長因子β信號轉導途徑中與細胞內信號轉導或調節密切相關的重要分子，Smad3和4是家族的重要成員，不僅參與Smad成員形成復合物的功能，還可以進入細胞核內調節目的基因，對腫瘤細胞來說，其減少可以引起細胞的過度增生〔3，4〕。磷酸酶及張力蛋白同源蛋白(PTEN)是一種經典的抑癌基因，其可以通過脫磷酸化作用調節細胞內信號傳導的通路，并調節細胞的生長和發育〔5〕。本研究針對腎透明細胞癌中Smad3、4和PTEN的表達進行分析，關注其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月至2013年12月我院行腎透明細胞癌手術治療的患者56例作為觀察組，留取臨床資料及術后蠟塊組織，納入均經病理醫師再次閱片復診，并符合WHO中的標準。男29例，女27例，年齡45～85歲，平均(61.4±8.9)歲。選擇上述患者中距腫瘤邊緣>3 cm的正常腎皮質40例作為對照組，男21例，女19例；年齡49～81歲，平均(60.8±8.3)歲。兩組一般資料無明顯差異。

1.2 Smad3、4和PTEN的檢測Smad3、4和PTEN蛋白的檢測均應用免疫組化SP法、二氨基聯苯胺(DAB)顯色，操作均由同一主管技師進行，做好質量控制。

1.3Smad3、4和PTEN結果判讀Smad3、4和PTEN均以細胞質中染成棕黃色定為陽性細胞(染色強度為中-重度染色，弱陽性不計為陽性)，選擇5個(400倍高倍視野)上皮細胞密集且染色較為明顯的區域進行計數，取平均值，以陽性率<10%為陰性，以≥10%為陽性。

1.4統計學方法應用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗及線性相關性分析。

2結果

2.1兩組Smad3、4和PTEN表達的比較觀察組Smad3、4和PTEN陽性率明顯低于對照組(P<0.000 1)。見表1。

表1　兩組Smad3、4和PTEN陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床特征中Smad3、4和PTEN陽性率的比較觀察組中Smad3、4和PTEN表達的陽性率與腫瘤最大徑、Fuhrman分級密切相關，而與性別、年齡因素無關。見表2。

表2　觀察組不同臨床特征中Smad3、4和

2.3觀察組中Smad3、4和PTEN的相關性Smad3和PTEN(r=0.45，P=0.043 2)、Smad4和PTEN(r=0.49，P=0.040 7)表達均呈正相關性。

3討論

引起腎透明細胞癌的發生因素較多，如吸煙、工業生產中接觸砷或飲用水中含砷、石棉、鎘、有機溶劑等。腫瘤常呈實性，多位于腎皮質，腫瘤與周圍腎組織界線較清楚，形成推壓式邊界和假包膜，彌漫浸潤于腎臟者少見。腫瘤含有脂質，呈金黃色或多彩狀，部分腫瘤可見囊腔、壞死、出血和鈣化。腫瘤細胞形成泡巢狀和腺泡狀結構，腫瘤由小的薄壁血管構成的網狀間隔，泡巢狀結構中無腔，內充以淡染的嗜酸性漿液，腫瘤細胞質內有脂質和糖原，使其細胞質變得透明，胞膜清楚。近年來學者關注基因和蛋白表達失調對腎腫瘤的促進作用〔2〕。Smad蛋白家族是近幾年發現的蛋白，至少有8種，按結構和功能分為三類：通路限制型、共同介導型和抑制型〔6，7〕。Smad3是通路限制型，是轉化生長因子(TGF)β的下游信號轉導分子，TGF-β與胞膜上的受體結合后，Smad3蛋白被磷酸化活化，隨即與Smad4結合成雜聚體轉導入細胞核內，激活靶基因的轉錄〔8，9〕。PTEN是磷酸酶家族中發現的第一個腫瘤抑制基因，可以對第二信使PIP3有脫磷酸作用〔10，11〕。PTEN能抑制細胞的生長、浸潤、遷移和聚集黏附，PTEN與張力蛋白tensin和輔助蛋白auxilin高度同源，而張力蛋白能與肌動蛋白結合形成復合體，與細胞聚集黏附明顯關聯〔12，13〕。PTEN基因的突變，失去了對細胞生長的負調控，引起腫瘤的生長〔14〕。梁增文等〔15〕通過對肝細胞癌組織中檢測Smad3的表達，發現Smad3在肝細胞癌中表達下降，認為其可能是一種抑癌基因，其表達水平的下調可能與肝細胞癌發生的早期事件有關。樊勇等〔16〕通過對肝外膽管癌中Smad4和PTEN的表達進行研究，發現肝外膽管癌中Smad4和PTEN的表達明顯低于對照組，且二者具有正相關性，認為Smad4和PTEN在腫瘤中的表達有助于反映肝外膽管癌生物學特性，為預后判斷提供參考指標。

本研究提示Smad3、4和PTEN低表達可以促進腎透明細胞癌的發生。Smad3、4的表達下降，在某種程度上失去了TGF-β抑制腫瘤細胞增殖及誘導凋亡的功能，使腫瘤的生長加速〔17〕。PTEN表達下降時，失去對PI3K信號途徑的下調作用，有利于三磷酸鹽質膜的形成，導致絲氨酸/蘇氨酸激酶(AKT)的活性增強，同時增強了對缺氧誘導因子的生成，使血管生成能力增強，也增加了腫瘤的侵襲能力〔18〕。本文提示Smad3、4和PTEN低表達時可以引起腫瘤的生長，腫瘤體積增大。Smad3、4和PTEN低表達是腫瘤進展的重要因素，由于Fuhrman分級被認為與腫瘤的預后有關，因此Smad3、4和PTEN的表達可能與腫瘤的預后有一定的關系。本實驗提示Smad3、4和PTEN之間可能有協同作用。三者的協同作用與腫瘤抑制基因對腫瘤細胞的作用有關，也可能與對增殖的影響有關。

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〔2014-12-19修回〕

(編輯苑云杰)

中圖分類號〔〕R73〔

文獻標識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2016)01-0115-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.052