家畜布氏桿菌病的檢疫方法

孟慶彤　王美玲　遼寧省彰武縣動物疫病預防控制中心　123200

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家畜布氏桿菌病的檢疫方法

孟慶彤王美玲遼寧省彰武縣動物疫病預防控制中心123200

布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的人畜共患傳染病。該病在家畜中以羊、牛、豬最易感，造成患病家畜生殖器官和胎膜發炎，引起流產、不育和各種組織病變，患病公畜則表現為關節炎和睪丸炎。人感染后的表現較為復雜，大多出現波浪熱、關節疼痛、睪丸炎及子宮內膜炎等癥狀。

1　流行病學

該病的傳染性極強，易感動物范圍很廣，羊、牛、豬、牦牛、鹿、駱駝、野豬、馬、狗、狐、狼、野牛、野兔、猴、羚羊、雞、鴨及一些嚙齒動物均能感染，而羊、牛、豬最易感。傳染源是病畜及帶菌動物，主要感染途徑是消化道，即通過污染的飼料與飲水而感染，也能通過皮膚、結膜和交配等感染。人接觸病畜及其產品，如接產、飲用病畜生乳或制品、食用未經煮透的病畜肉等都能感染。

2　活體檢疫

母畜最顯著的癥狀是流產，可發生于妊娠期任何階段，但牛常發生于懷孕后的6～8個月、羊3～4個月、豬1～ 3個月。流產前精神和食欲不振，陰唇和乳房腫脹，陰道黏膜紅腫，流出不潔的分泌物。流產后胎衣往往停滯，胎兒死亡，常發生子宮炎，長期不愈，屢配不孕，失去生育能力。公畜發病的癥狀是睪丸炎和副睪炎。

3　肉尸檢疫

該病的明顯病變在子宮、胎兒及胎衣。胎衣呈黃色膠凍樣浸潤，有的部位覆有纖維素片和膿液，有的增厚并有出血斑點。胎兒呈現敗血癥變化。胃特別是第四胃有淡黃色或白色黏液絮狀物。淋巴結、脾臟和肝臟呈現不同的腫脹，出現散在壞死灶。公畜睪丸和副睪有炎性壞死灶和化膿灶。該病的明顯癥狀是流產，但是彎桿菌病、胎兒滴蟲病、鉤端螺旋體病、乙型腦炎、衣原體病、豬細小病毒病和藍耳病都能發生流產，因此必須通過實驗室檢驗與之鑒別。

4　實驗室檢驗

布氏桿菌病檢疫的檢驗方法有病原學檢查和血清學檢查兩種。動物檢疫常采用的血清學方法有虎紅平板凝集試驗、乳牛布氏桿菌病全乳環狀試驗、試管凝集試驗和補體結合試驗等。前兩者主要用于動物檢疫的篩選，后兩者主要用于布氏桿菌病的定性。

（1）虎紅平板凝集試驗。適用于各種家畜布氏桿菌病篩選試驗。出現陽性反應的血清樣品，應根據情況進行試管凝集試驗或補體結合試驗，或布氏桿菌病其他診斷試驗確定。材料準備。準備好虎紅抗原 （由獸醫生物藥品廠供應），按說明書使用。抗原宜在4～15℃冰箱保存，不能凍結。其外觀應呈玫瑰紅色的懸浮液，有凝集者棄之。使用前充分搖勻，置室溫中30～60分鐘。標準陰、陽性血清由獸醫生物藥品廠供應。被檢血清須新鮮、無溶血、無腐敗現象，保存期不超過15日。

實驗方法。取一潔凈的玻璃板，畫成20mm×20mm的方格。每一格分別滴入被檢血清約0.03mL，然后在被檢血清旁滴加虎紅抗原0.0mL（使用時先將抗原瓶搖動，使之均勻懸浮），用牙簽或小棒攪動血清和抗原，使抗原液混合。于4分鐘內觀察結果。

結果判定。如果在4分鐘內出現肉眼可見的凝集現象者判為陽性，否則判為陰性。

（2）乳牛布氏桿菌病全乳環狀試驗（MRT）。該方法適用于乳牛場泌乳母牛布魯氏菌病的監測和篩選試驗。受檢乳必須為新鮮的全脂乳。對患有乳房疾病的乳汁、加工處理后的牛乳、腐敗變質和凍結過的乳不能使用。采集乳樣時應將母畜的乳房用溫水洗凈，再用紗布擦干，然后擠于潔凈的器皿中。夏季應于當天檢查，若保存于2℃，7天內仍可使用。

材料準備。事先準備好布氏桿菌病全乳環狀抗原（由獸醫生物藥品廠供應）。目前我國生產的全乳環狀反應抗原有兩種，一種是蘇木素染色抗原，呈藍色；另一種是四氮唑染色抗原，呈紅色。試驗結果均按乳脂和乳柱的顏色判定。其他器材包括凝集試驗管、試管架、吸管、微量加樣器和水浴箱等。

實驗方法。取乳樣1mL加入滅菌凝集試驗管。將全乳環狀抗原充分搖蕩均勻后取1滴（約50uL）加入乳樣中充分混勻，置37～38℃水浴中60分鐘。取出后勿振蕩，立即按乳脂和乳柱的顏色進行判定。

結果判定。乳柱上層乳脂形成紅色或藍色環帶、乳柱白色、分界分明的為強陽性反應。乳脂層的環帶雖呈紅色或藍色，但不顯著，乳柱略帶顏色為陽性反應。乳脂層的環帶顏色較淺，但比乳柱顏色略深為弱陽性反應。乳始層環帶不明顯，與乳柱分界不清，乳柱不褪色為疑似反應。乳柱上層無變化，乳柱顏色均勻為陰性反應。脂肪較少或無脂肪的乳樣呈陽性反應時，菌體呈凝集現象下沉管底，判定時以乳柱的反應為準。

由于布氏桿菌病是人畜共患病，是威脅畜牧或獸醫從業者的一種嚴重的職業病，必須引起重視，在生產中要做好該病的檢疫工作，及時淘汰感染和發病動物，并注意做好自身的防護工作。