VEGF、MMP及IL-6相關指標的表達與非霍奇金淋巴瘤的相關性

李興，馬麗娜，彭大為，王美清，毛山山

(中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院海口市人民醫院腫瘤化療科1、神經內科2，海南 海口 570208)

VEGF、MMP及IL-6相關指標的表達與非霍奇金淋巴瘤的相關性

李興1，馬麗娜2，彭大為1，王美清1，毛山山1

(中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院海口市人民醫院腫瘤化療科1、神經內科2，海南 海口 570208)

目的 觀察血管內皮生長因子(VEGF)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)、白細胞介素-6(IL-6)的表達，并探討其與非霍奇金淋巴瘤(NHL)的關系。方法選擇2010年1月至2013年12月在我院腫瘤化療科接受治療的NHL患者61例作為觀察組，選擇同期在我院接受治療的良性淋巴結病變患者50例作為對照組。比較兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達情況，同時分析其與不同病理的關系。結果觀察組患者的VEGF、MMP-9及IL-6陽性表達率分別為75.41%(46/61)、63.93%(39/61)、54.10%(33/61)，均明顯高于對照組的14.00%(14/50)、8.00%(4/50)、4.00%(2/50)，差異均有統計學意義(P＜0.05)；在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化、LDH升高患者中VEGF表達陽性率更高，差異均有統計學意義(85.11%vs 42.86%，95.83%vs 35.14%，94.12%vs 68.18%，91.43%vs 53.85%，94.74%vs 61.90%，均P＜0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化患者中MMP-9表達陽性率更高，差異均有統計學意義(91.67%vs 18.92%，88.24%vs 54.55%，82.86%vs 38.46%，均P＜0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達為陽性的比例更大，差異均有統計學意義(87.50%vs 32.43%，76.47%vs 45.45%，均P＜0.05)。結論NHL患者的VEGF、MMP-9及IL-6均呈現高水平表達，同時與病理分型、惡化程度、腫瘤大小等存在顯著的關系，臨床上可以根據這些指標進行腫瘤治療及預后判斷，具有較高的應用價值。

非霍奇金淋巴瘤；血管內皮生長因子；基質金屬蛋白酶；白細胞介素；相關性

侵襲與轉移作為腫瘤主要的臨床特性，對治療以及預后都有非常顯著的影響[1]。相關侵襲的嚴重結果容易導致治療的失敗，因此臨床上對相關侵襲的關注是顯得非常重要。非霍奇金淋巴瘤(NHL)在整個病變過程中就會表現出多個淋巴結轉移，臨床上通過測定腫瘤標志物進行觀察[2]。其中血管內皮生長因子(VEGF)作為常見的生長因子，是血管新生增殖的主要因素。但新生的血管不穩定性高，從而加大了病變的可能性。除此之外，基質金屬蛋白酶(MMP)以及白細胞介素(IL)等指標也為NHL的臨床治療、預后提供較多的理論依據[3]。鑒于此，本文通過觀察NHL患者VEGF、MMP-9以及IL-6等指標的水平，分析其與NHL的關系，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2013年12月在我院接受治療的NHL患者61例作為觀察組，其中男性38例，女性23例；年齡28～79歲，平均(55.3±5.19)歲。另選擇同期在我院接受治療的良性淋巴結病變患者50例作為對照組，其中男性30例，女性20例；年齡30～71歲，平均(53.9±5.13)歲。兩組患者的年齡、性別等基本資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 完善兩組患者的資料，包括病理分型、臨床分期腫瘤大小、惡性程度。同時對是否出現全身癥狀、血清乳酸脫氫酶(LDH)水平升高等進行確定，然后采用免疫組化法對VEGF、MMP-9以及IL-6水平進行測定。將得到的標本應用10%甲醛固定后石蠟包埋，然后制成4 μm的連續切片備用。其中鼠抗人的VEGF、MMP-9以及IL-6單克隆抗體均購自上海長嘉生物科技公司，按照說明書對組織進行免疫組織化學法檢測。最后在顯微鏡下觀察染色結果，并通過對染色陽性腫瘤細胞比例與強度評分。

1.3 判斷標準[4-5]首先進行染色強度的計分：沒有染色者記為0分、輕度染色記為1分、中度染色記為2分以及強度染色記為3分。然后對染色細胞面積進行定量計分：沒有細胞染色記為0分、＜25%的細胞被染色記為1分、25%～50%的細胞被染色記為2分以及＞50%的細胞被染色記為3分。最后將兩種計分相加記為染色總結果，當總分＞2分記為陽性，反之為陰性。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0統計軟件進行數據分析，計數資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達情況比較 觀察組患者的VEGF、MMP-9、IL-6陽性表達率均顯著高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達情況比較[例（%）]

2.2 VEGF與NHL的病理關系 不同性別、年齡、是否有全身癥狀患者的VEGF表達情況比較差異均無統計學意義(P≥0.05)。在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化、LDH升高患者中VEGF表達陽性率更高，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 VEGF與NHL的病理關系[例（%）]

2.3 MMP-9與NHL的病理關系 不同性別、年齡、病理分型、是否有全身癥狀以及是否存在LDH升高患者中MMP-9表達情況比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化患者中MMP-9表達陽性率更高，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 MMP-9與NHL的病理關系[例（%）]

2.4 IL-6與NHL的病理關系 不同性別、年齡、病理分型、是否有全身癥狀、惡性程度以及是否存在LDH升高患者中IL-6表達情況比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達陽性陽性率更高，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表4。

表4 IL-6與NHL的病理關系[例（%）]

3 討 論

淋巴癌作為惡性腫瘤之一，已經引起研究人員的主要關注。在不同地區淋巴瘤的發生率存在差異，而在不同年齡階段都有發生淋巴癌的可能性。淋巴癌以NHL居多，臨床上對NHL的治療及預后是研究的主要內容。因此，尋找準確、高效的腫瘤標記物能顯著提高預后效果。本文通過研究NHL患者與腫瘤良性增生患者相關水平，結果發現：觀察組VEGF、MMP-9以及IL-6陽性表達率均顯著高于對照組。符合Zhang等[6]和Wróbel等[7]的報道。VEGF作為腫瘤研究過程中主要預后不良因素，在整個研究過程中起到非常重要的指導作用。MMP-9是一類與腫瘤生長、侵襲存在顯著關系的基質金屬蛋白酶，與IL-6共同為腫瘤的發生、預后提供有效指導依據。

本文通過對比VEGF、MMP-9以及IL-6與NHL的不同病理關系，分析得到：(1)在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化以及LDH升高患者中VEGF表達為陽性的比例更大；(2)在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm以及高度惡化患者中MMP-9表達為陽性的比例更大；(3)在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達為陽性的比例更大。現對結果做如下分析：(1)VEGF是目前臨床上作用效果最為顯著的促血管生成因子，通過與血管內皮細胞膜上相關酶的特異性結合達到促進血管內皮細胞增殖的效果[8-9]。新生血管在生成后其通透性過高并且形成不穩定，這就使得大量的血漿外滲后積攢在血管外的基質中。長期作用下，形成嚴重疾病。因此，腫瘤臨床分期越高、惡化程度越高以及腫瘤越大的NHL患者中VEGF水平越高。(2)腫瘤的侵襲以及轉移是研究的主要焦點，并且經常將相關病理學特點作為臨床上對腫瘤良惡性及預后的判斷。在一般情況下腫瘤是從相應瘤細胞脫離以后向相近組織發生侵犯行為，就細胞腫瘤跨過基質等主要屏障。其中，基質金屬蛋白酶作為構成物中最主要的蛋白酶而被重點關注。尤其是MMP-9的高表達，往往是腫瘤深入研究過程中的主要標志物[10]。MMP-9也被稱為明膠酶B，在細胞外基質以及膜表面都有作用，也可在正常的上皮細胞中表達。在許多肺癌等嚴重疾病腫瘤細胞的出現、轉移等都發現MMP-9表達異常，還會出現在間質腫瘤以及上皮相關來源的腫瘤。因此，MMP-9的表達與腫瘤的分化、分期都存在相關性。(3)IL-6對人體具有雙重的代表意義，不僅對生理水平有控制作用，同時又參與多數疾病的發展過程[11-12]。IL-6是可以來源于單核細胞、內皮細胞甚至膠質細胞的細胞因子，同樣在正常人體內含量少。只在炎癥發生或存在腫瘤時會有IL-6表達異常，并參與組織細胞的分化、功能等多個過程。因此，在NHL患者中當臨床分期增加以及腫瘤增大的過程中水平逐漸升高，發揮的負面影響也更大。

綜上所述，在NHL患者中VEGF、MMP-9以及IL-6水平顯著升高，同時VEGF、MMP-9以及IL-6水平的研究還能為臨床上對NHL的治療與預后提供理論依據，具有重要意義。

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Correlation between expression of VEGF,MMP and IL-6 related parameters and non-Hodgkin lymphoma.

LI Xing1,MA Li-na2,PENG Da-wei1,WANG Mei-qing1,MAO Shan-shan1.Department of Tumor-Chemotherapy1, Department of Neurology2,Central South University Xianya School of Medicine Affiliated Haikou Hospital(Haikou People's Hospital),Haikou 570208,Hainan,CHINA

Objective To observe the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase-9(MMP-9)and interleukin-6(IL-6),and to investigate their relationship with non-Hodgkin's lymphoma.MethodsSixty-one patients with non-Hodgkin lymphoma(NHL)were selected as the observation group and 50 patients with benign lymph node disease were enrolled as the control group(with hospitalized time limited from January 2010 to December 2013).The expression of VEGF,MMP-9 and IL-6 were compared between the two groups,and the relationships between them and different pathological changes were analyzed.ResultsThe positive expression rate of VEGF,MMP-9 and IL-6 were significantly higher in the observation group than the control group[75.41%(46/61)vs 14.00%(14/50),63.93%(39/61)vs 8.00%(4/50),54.10%(33/61)vs 4.00%(2/50),P＜0.05].The VEGF positive expression rates of patients with invasive pathological typing,Ⅲ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm,high deterioration,elevated LDH were significantly higher(85.11%vs 42.86%,95.83%vs 35.14%,94.12%vs 68.18%,91.43%vs 53.85%,94.74%vs 61.90%,P＜0.05).The MMP-9 positive expression rate of patients withⅢ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm,high deterioration were significantly higher(91.67%vs 18.92%,88.24%vs 54.55%,82.86%vs 38.40%,P＜0.05).The IL-6 positive expression rate of patients withⅢ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm were significantly higher(87.50%vs 32.43%,76.47% vs 45.45%,P＜0.05).ConclusionVEGF,MMP-9,IL-6 in NHL patients show a high level of expression,and they have significant relationships with pathological type,deterioration degree and tumor size.These indicators can be used for tumor treatment and prognosis evaluation,which has great application value.

Non-Hodgkin lymphoma(NHL);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Matrix metalloproteinases(MMP);Interleukin;Correlation

R733.4

A

1003—6350（2016）09—1412—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.09.013

2015-11-18)

李興。E-mail：370485421@qq.com