胎盤生長因子在新生血管性眼病中的研究進展

周　駿，劉　濤

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胎盤生長因子在新生血管性眼病中的研究進展

周駿1，劉濤2

新生血管是許多致盲性眼病的主要原因，例如糖尿病視網膜病變、早產兒視網膜病變、年齡相關性黃斑變性等。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在新生血管的形成中起著重要的作用，被認為是作用最強的血管生長因子。胎盤生長因子(placental growth factor, PlGF)是VEGF家族中的一員，可促進新生血管生成，刺激內皮細胞遷移增殖，介導免疫炎癥反應，且特異性表達于病理性新生血管，但在正常血管中不表達。因此近年來PlGF逐漸受到人們關注。本文對PlGF在新生血管性眼病中的作用機制進行探討。

胎盤生長因子；血管內皮生長因子受體；抗VEGF藥物；眼部新生血管

引用：周駿，劉濤.胎盤生長因子在新生血管性眼病中的研究進展.國際眼科雜志2016;16(11):2053-2058

0　引言

病理性新生血管是多種眼部疾病的共同病理改變，是致盲的重要原因之一。新生血管的形成是一個極其復雜的過程，受多種細胞因子的調控，VEGF是一種同型二聚體糖蛋白，在新生血管的形成中起著重要的作用，被認為是作用最強的血管生長因子[1]。其家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和PlGF，其中VEGF-A是最常見、最主要的一種，其生物活性主要表現為：選擇性增強血管內皮細胞有絲分裂，刺激血管內皮細胞增殖并促進血管形成；增強血管尤其是小血管的滲透性，使血漿蛋白等大分子外滲沉積在血管外的基質中，為新生毛細血管網的建立提供營養[2]。因此，VEGF是治療新生血管性眼病的重要靶點，抗VEGF藥物成為眼部新生血管疾病的一線治療手段。同為VEGF家族成員之一的胎盤生長因子(placental growth factor, PlGF)的促血管生成作用曾一度被人們所忽視，近年來研究發現，PlGF與眼部病理性新生血管亦有密不可分的關系。本文就PlGF在新生血管性眼病病理進程中的作用及抗PlGF藥物的研究進展做一綜述。

1　PlGF概述

1.1 PlGF的分子結構PlGF是VEGF家族中的一員，于1991年由Maglione等[3]從人體胎盤cDNA文庫分離純化而來，是一種分泌型二聚體糖蛋白，分子量46000～50000kDa，其蛋白氨基酸序列與VEGF有42%的同源性。主要表達于人體胎盤、心、肺、甲狀腺、骨骼肌中。人類的PlGF基因位于第14號染色體，含有七個外顯子。根據PlGF基因的選擇性拼接，可以產生4種不同的異構體：PlGF-1(PlGF131)，PlGF-2(PlGF152)，PlGF-3(PlGF203)，PlGF-4(PlGF224)，它們大小不同，分泌特性和受體親和力也不一。PlGF-1和PlGF-3不與肝素結合，而PlGF-2和PlGF-4具有較強的與肝素結合的能力，主要與細胞膜、基底膜或細胞外基質肝素結合。PlGF-1由1～5、7號外顯子編碼，PlGF-2由1～7號外顯子編碼較PlGF-1多第6號外顯子，編碼肝素結合區，含有63bp。因此，PlGF-2與PlGF-1的不同在于前者由于第6號外顯子的存在而具有肝素結合活性，PlGF-3除有PlGF-1的6個外顯子外，在4和5號外顯子之間還插有216bp的編碼序列，PlGF-4除了含有與PlGF-3同樣序列外，還增加有PlGF-2所具有的第6外顯子，編碼肝素結合區[4]。

1.2 PlGF的受體PlGF的受體有血管內皮生長因子受體-1(vascular endothelial growth factor receptor-1，VEGFR-1/Flt-1)、硫酸類肝素蛋白多糖(heparin sulfate proteoglycan，HSPG)、neuropilin-1(NRP-1)受體和neuropilin-2(NRP-2)受體。其中，VEGFR-1與PlGF-1和PlGF-3結合，PlGF-4可與VEGFR-1及HSPG結合，PlGF-2可分別與四種受體結合，從而產生不同的生物學效應。VEGFR-1可與四種亞型結合，是PlGF的特異性受體，除此之外，VEGFR-1還可與VEGF-A、VEGF-B、TfsvVEGF結合，其分子量約為180kDa，由7個胞外免疫球蛋白樣結構域、一個跨膜區、一個近膜結構和一個胞內酪氨酸激酶結構域組成。主要在內皮細胞和胚胎滋養層細胞中表達，在成骨細胞、單核細胞/巨噬細胞、及造血干細胞中也能檢測到它的存在[5]。VEGFR-1在胚胎發育階段對于內皮細胞分化、血管形成及適當維持血管穩定有重要作用。通過自分泌和旁分泌作用調節血管內皮細胞和滋養細胞的功能，影響內皮細胞的分化成熟，在新生血管形成及胎盤的形成發育中起關鍵作用。研究表明在生物體的不同生長發育階段VEGFR-1起著完全相反的作用。VEGFR-1基因缺陷小鼠在胚胎發生早期內皮細胞增生，但不能形成正常的血管系統，所以不能存活，但敲除VEGFR-1酪氨酸激酶結構域基因的小鼠能健康存活且血管基本正常，說明在胚胎發生早期，VEGFR-1在血管形成過程中起負調控作用，且與VEGFR-1酪氨酸激酶結構域密切相關。VEGFR-1介導的促新生血管生成的作用在缺血、腫瘤等病理環境下發揮更大作用，VEGFR-1依靠其酪氨酸激酶的活性介導下游的信號轉導通路，刺激誘導新生血管的形成[6]。由于VEGFR-1被激活后可誘導新生血管的形成，因此有研究嘗試通過抑制VEGFR-1表達來調控眼部新生血管的生成。Luttun等[7]應用抗VEGFR-1的單克隆抗體抑制了腫瘤和缺血性視網膜病變新血管的形成，抗VEGFR-1治療2wk后，腫瘤微血管的密度降低45%，血管大小降低30%。抗VEGFR-1治療也使患自身免疫性關節炎的患者的炎癥性關節毀損和血管新生減輕。還有研究發現一針對VEGFR-1的siRNA片斷序列：Sirna-027，它對于體外培養的內皮細胞系、小鼠體內的視網膜及脈絡膜新生血管的抑制率高達40%以上[8]。

1.3 PlGF的生物學功能

1.3.1 PlGF與血管形成PlGF是多效的細胞因子，能促進血管內皮細胞尤其是微血管內皮細胞增殖，并可作為VEGF的趨化因子來調節內皮細胞的生長，促進血管生成。PlGF還能促進單核細胞和內皮細胞的遷移，增加內皮細胞的通透性。PlGF在胎盤絨毛膜的血管形成中起重要作用，在胎兒和成體發育中具有很強的血管形成特性。實驗顯示在兔角膜和雞胚絨毛尿囊膜中最早發現的PlGF-1具有促血管生成作用，呈現劑量與時間依賴性的血管生成，且此效應可被抗PlGF抗體所阻斷[9]。雖然PlGF在胎盤中高度表達，但有PlGF基因缺陷的小鼠仍可以健康的生存，而在人類生理性血管代償性增生，如運動引起心臟及肌肉新生血管的形成也并不依賴PlGF[10]，表明PlGF不影響正常的發育。在細胞激活或病理狀態下,如缺氧、傷口愈合、組織缺血、炎癥反應、惡性腫瘤等，可引起PlGF高表達，說明PlGF對生理性血管的生成影響不大，而對病理性新生血管具有關鍵作用[11]。Luttun等[12]應用PlGF基因敲除小鼠的研究表明PlGF減少病理性新生血管，缺乏PlGF使皮膚傷口處變應原和神經性炎癥誘導的血管滲漏減少。目前認為，PlGF促進病理性血管形成與其直接刺激血管內皮細胞生長、遷移、存活有關。其機制可能是由于大量PlGF競爭性結合VEGFR-1受體位點，使更多VEGF活化VEGFR-2，并與其結合；通過VEGFR-1傳遞信號，作用于VEGFR-2，增強低濃度水平VEGF的敏感性；PlGF活化VEGFR-1，通過分子間的轉磷酸作用，增加VEGFR-2受體酪氨酸的磷酸化水平，促進新生血管的形成；PlGF與VEGF形成VEGF/PlGF復合物，從而激活和傳遞血管生長信號給VEGFR-2/VEGFR-1受體復合物；PlGF與VEGF競爭性結合VEGFR-1，刺激VEGFR-2/VEGFR-1受體復合物，發揮調控血管生成作用[13]。此外，還可通過促進平滑肌細胞和纖維母細胞的增殖和募集、單核-巨噬細胞系的分化、骨髓祖細胞的成熟來影響血管的生成[4]。

1.3.2 PlGF與炎癥反應炎性反應的特征之一就是血管新生，如類風濕關節炎、銀屑病、皮膚的遲發型變態反應等,在這些疾病的病理性血管新生中PlGF的表達是上調的。PlGF通過調節血管內皮細胞的功能來參與炎癥反應。PlGF可以通過上調腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表達，提高IL-8及單核細胞趨化蛋白-1β(Monocyte chemoattractant protein 1β,MCP-1β)等炎癥介質的水平，進而誘導炎癥反應，同時PlGF通過與VEGFR-1結合，促進MCP-1活化、遷移，從而促進單核細胞與巨噬細胞趨化、聚集，以促進炎癥反應[14]。Yoo等[15]在關節炎患者滑膜及滑液中檢測出PlGF和VEGFR-1，并且證實與外周血單核細胞升高相關，且能被TNF-α、IL-8、IL-1β、MCP-1誘導而呈高表達，趨化巨噬細胞聚集，并誘導產生組織因子，促進炎癥反應。Oura等[16]應用PlGF基因缺陷小鼠對比觀察了遲發型變態反應在PlGF基因缺陷小鼠和野生型小鼠中的差異，發現缺乏P1GF可導致炎癥血管增生減少，基因缺陷小鼠的炎癥反應范圍往往比野生型要小，時間縮短，尤其是炎性新生血管和水腫形成明顯減少，說明PlGF在控制皮膚炎癥方面具有重要的作用。這些提示了抑制PlGF的活性有可能成為抗炎治療的一種新的方法。多項研究表明PlGF在缺血、炎癥、傷口愈合及癌癥等疾病中直接或間接促進血管新生，包括腫瘤生長、心肌缺血、缺血性眼病、關節炎、動脈粥樣硬化、遲發型皮膚過敏等[17-20]。

2　PlGF在眼部新生血管疾病中的作用

病理性新生血管與多數眼部致盲疾病有關，例如：糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy, DR)以及早產兒視網膜病變(retinopathy of prematurity, ROP)，年齡相關性黃斑變性(age-related macular degeneration, AMD)等。無論是生理性還是病理性血管的形成，其調節過程都十分復雜，包括血管擴張及通透性的增加、血管周圍基質的降解、內皮細胞的激活增殖、遷移、存活以及新的毛細血管樣管腔的形成，最后新生血管成熟、重塑構成血管網。多種細胞因子參與新生血管生成的調控，諸如堿性成纖維細胞生長因子、血小板衍生生長因子、表皮生長因子、肝細胞生長因子、TNF、VEGF等，血管生長因子和抑制因子之間平衡的破壞是血管生成的關鍵因素之一，其中VEGF被認為是作用最強的血管生長因子[1]。然而，同為VEGF家族成員之一的PlGF，促血管生成作用曾一度被人們所忽視，近年來研究發現PlGF能刺激內皮細胞的增生、遷移，促進新生血管形成，介導炎性細胞浸潤，并與VEGF-A協同作用，提高血管活性，與眼部病理性新生血管有密不可分的關系。

2.1 PlGF與AMDAMD是發達國家50歲以上人群低視力和致盲的首要原因，在美國有800萬AMD患者，隨著社會的老齡化，其發病率有增高趨勢，截止2020年總體患病率預計將增加50%以上[21]。AMD的病理變化主要是視網膜上皮層、玻璃膜及脈絡膜毛細血管進行性萎縮，從而誘發脈絡膜新生血管(choroidal neovascularization, CNV)形成。在AMD的整個病程中，CNV的形成與發展都起著至關重要的作用，是導致其視力減退關鍵步驟[22]。VEGF促進新生血管及血管滲漏等作用已受到廣泛認可，近年來抗VEGF藥物顯示出對CNV明確的抑制作用[23]。PlGF作為VEGF的一個亞型，與VEGF-A具有協同作用，同時它能夠在病理性新生血管中特異性表達。Rakic等[24]運用RT-PCR技術測定新生血管膜中PlGF mRNA，發現PlGF在小鼠CNV模型及人的CNV中均有表達，在PlGF基因敲除鼠或在特異性阻斷PlGF受體的小鼠中，激光誘導的CNV的發生率顯著低于正常對照組，且嚴重程度明顯降低。研究指出給激光誘導的CNV小鼠模型玻璃體腔內注射PlGF抑制劑anti-PlGF(5D11D4)后脈絡膜血管滲漏、巨噬細胞浸潤均有所減少[25]。Huo等[26]通過ELISA測定激光誘導的CNV小鼠模型VEGF和PlGF濃度，發現VEGF-A與PlGF濃度顯著升高，進一步行玻璃體腔內注射抗VEGF-A抗體及抗PlGF抗體治療，發現抗VEGF-A可顯著減少新生血管密度，而抗PlGF治療沒有顯著降低新生血管的密度，但它增強了抗VEGF-A對新生血管的抑制作用，推測可能是由于VEGF-A與PlGF都可以和VEGFR-1結合，PlGF通過調節VEGFR-1介導的下游信號，形成PlGF/VEGF-A復合體，與VEGF-A具有協同作用。此外，他們還通過流式細胞術、RT-qPCR、ELISA，分析VEGF-A和PlGF在巨噬細胞、內皮細胞以及其他細胞中的濃度水平，結果顯示激光誘導的CNV小鼠模型中PlGF主要是由巨核細胞產生的，清除巨噬細胞后，CNV密度顯著減少。這些實驗表明，PlGF在AMD中發揮著重要作用，是CNV形成的關鍵因素，抗PlGF治療有望成為治療AMD的新靶點。

2.2 PlGF與DR糖尿病視網膜病變是糖尿病常見且嚴重的微血管并發癥之一，是許多發達國家工作年齡人群(20～70歲)致盲的常見原因之一[27]。DR患者可能因為糖尿病性黃斑水腫(diabetic macular edema, DME)、增殖型糖尿病視網膜病變(proliferative diabetic retinopathy, PDR)、玻璃體積血、牽拉性視網膜脫離、新生血管性青光眼(neovascular glaucoma, NVG)等微血管并發癥，逐漸或者突然出現視力下降，最終導致失明。其中，DME和PDR對視力損害最為嚴重[28]。多項DR與VEGF水平相關性研究結果顯示，VEGF水平和DR病程顯著相關，并且DR程度越重，VEGF水平越高[29]。最近有研究表明VEGF家族成員之一的PlGF在DR的發病機制中發揮著重要作用[30]。Khaliq等[31]對PDR患者術中切除的纖維增殖膜進行免疫組化染色，發現PlGF在血管內皮和血管周圍區域高度表達，而在無增殖性視網膜病變的糖尿病患者視網膜中，未見到有PlGF的表達或者表達很弱。在正常視網膜、全視網膜光凝治療后視網膜及無新生血管的視網膜前膜上均未見到有PlGF蛋白的表達。Yamashita等[32]采用ELISA方法測定PDR患者房水及玻璃體中PlGF的分布，結果顯示僅有一例嚴重的PDR患者房水中PlGF濃度高達2270pg/mL，其余房水樣本中未檢測到PlGF，玻璃體中PlGF平均濃度為360±272pg/mL。在正常對照組房水及玻璃體中均未檢測到PlGF。另一項研究同樣是用ELISA測定對不同程度的DR患者(DME、PDR、NVG)房水中PlGF濃度進行檢測，發現各組中PlGF濃度均升高，DME組PlGF平均濃度為24.5±4.8pg/mL，PDR組PlGF平均濃度為52.8±27.1pg/mL，NVG組PlGF平均濃度為577.4±277.2pg/mL，表明PlGF升高程度與疾病的嚴重程度密切相關[33]。Miyamoto等[34]研究發現給予人視網膜色素上皮細胞系ARPE-19一定量的PlGF能誘導細胞間的通透性增加；并且在缺氧或給予胰島素刺激的情況下，ARPE-19細胞系的PlGFmRNA水平顯著上升，細胞間的通透性也隨之提高。同時，他們給大鼠玻璃體腔內注射PlGF，發現注射后24h視網膜色素上皮細胞間緊密連接被明顯破壞、通透性增加，推測PlGF-1水平升高可引起RPE細胞胞漿的轉運過程，造成視網膜外屏障改變，導致細胞間隙增大，這些細胞間緊密連接的破壞可引起血漿外滲，導致視網膜下液體積聚、視網膜水腫、脈絡膜毛細血管擴張等病理改變。他們進一步研究發現PlGF表達上調的機理與MEK/ERK信號通路有關。另有研究指出PlGF基因敲除小鼠對于糖尿病所引起的視網膜細胞壞死、血管變性、視網膜毛細血管周細胞喪失以及血視網膜屏障的破壞具有一定保護作用，保護機制與Akt的磷酸化和HIF1α-VEGF通路抑制相關[35]。以上眾多實驗都表明PlGF在糖尿病視網膜病變及糖尿病黃斑水腫中起著至關重要的作用。

3　PlGF與抗VEGF藥物

VEGF是治療新生血管性眼病的重要靶點。近年來抗VEGF藥物的問世使眼部新生血管疾病的治療狀況發生了革命性的進展[36]。單靶點抗VEGF-A藥物在新生血管性眼病的治療中取得了良好的效果。貝伐單抗(bevacizumab,avastin)為一類重組的人源化IgG1型單克隆抗體，能廣泛結合VEGF-A165及其他VEGF-A，因其具有對眼內新生血管生成的抑制作用，被嘗試用于治療各類眼內新生血管疾病，玻璃體注射bevacizumab能有效抑制視網膜及脈絡膜新生血管[37]。另一種與其作用相似抗VEGF藥物雷珠單抗(ranibizumab,lucentis)是一種抗體片段，可與VEGF-A的所有異構體結合并使其失活，從而抑制新生血管的形成。它是第一個被美國FDA批準用于治療眼部新生血管性黃斑變性的抗新生血管類藥物[21]。近兩年來，能廣泛結合VEGF-A、VEGF-B及PlGF的新一代多靶點抗VEGF藥物相繼上市，其中以阿柏西普(aflibercept,VEGF Trap-Eye, Eylea)和康柏西普(conbercept, KH902)為代表。新一代多靶點抗VEGF藥物可改善一些對單靶點抗VEGF藥物治療無反應患者的臨床癥狀[38]。

Aflibercept為可溶性重組VEGFR蛋白，包含VEGFR-1的第2免疫球蛋白域、VEGFR-2的第3免疫球蛋白域以及人類免疫球蛋白Fc融合而成，可誘導VEGF-A的所有亞型、VEGF-B及PlGF與其結合,從而阻斷VEGFR下游信號通路，抑制新生血管及血管滲漏[39]。有研究指出對CNV大鼠模型進行注射aflibercept治療，不僅減緩并抵消了部分CNV的生長，更極大地減少了CNV合并的白細胞浸潤和纖維生長[40]。國外以ranibizumab為對照組評價VEGF Trap-Eye玻璃體腔注射治療AMD的隨機雙盲Ⅲ期臨床試驗VIEW 1和VIEW 2[39]。受試者被隨機分為ranibizumab 0.5mg q4wk、VEGF Trap-Eye 0.5mg q4wk、VEGF Trap-Eye 2.0mg q4wk以及VEGF Trap-Eye 2.0mg q4wk×12w+2.0 mg q8wk共4個組。觀察至52wk，3個VEGF Trap-Eye治療組最佳矯正視力(best corrected visual acuity, BCVA)較基線下降不超過15個字母的患者比例均與ranibizumab組相當，而各VEGF Trap-Eye治療組中BCVA、中央視網膜厚度(central retinal thickness, CRT)等指標的變化值與ranibizumab組接近，各組的眼部或全身不良事件相似。該研究結果表明，VEGF Trap-Eye對VEGF-A的親和力明顯高于ranibizumab，且藥物作用時間更長，VEGF Trap-Eye每2mo注射與ranibizumab每月注射具有相似的有效性和安全性。這可能與抑制PlGF，從而抑制了VEGFR-1活化及人視網膜內皮細胞遷移有關[41]。在VISTA-DME研究中[42]，患者隨機分為VEGF Trap-Eye 2mg q4wk，VEGF Trap-Eye 2mg q8wk(完成最初5mo每月2mg VEGF Trap-Eye治療后)，激光光凝治療3組。數據表明，治療100wk后，VEGF Trap-Eye 2mg q4wk治療組，BCVA相對基線增加了11.5個字母，CRT平均減少185.9μm；VEGF Trap-Eye 2mg q8wk治療組，BCVA相對基線增加了11.1個字母，CRT平均減少183.1μm；激光光凝治療組，BCVA相對基線增加了0.9個字母，CRT平均減少66.2μm，說明與激光光凝相比，VEGF Trap-Eye在改善視力，減輕水腫方面具有顯著優勢。

Conbercept是由我國自主研發的新一代抗VEGF藥物[43]，于2013年年底上市,其結構為VEGFR-1的免疫球蛋白樣區域2和VEGFR-2的免疫球蛋白樣區域3，4融合到人IgG的Fc段所組成的融合蛋白。與aflibercept不同的是conbercept包含了VEGFR-2的第4免疫球蛋白域，可使結合更加緊密，同時它也可減少VEGF與受體的解離速率,降低細胞外基質的附著力[44]。一項多中心、隨機、雙盲、不同劑量和不同頻度給藥的平行對照臨床試驗AURORA[43]中，AMD受試者在前3mo按1∶1隨機分配到2個劑量組：0.5mg q1mo和2.0mg q1mo。3mo后兩組患者BCVA分別提高了8.97和10.43個字母。在延長治療期，受試者再按1∶1隨機分配到4個劑量組： 0.5mg q1mo；0.5mg按需給藥；2.0mg q1mo；2.0mg按需給藥，研究周期為12mo。結果表明，4個劑量組的BCVA、CRT相對基線減少厚度、CNV區域滲漏面積等臨床治療效果相當，說明conbercept對于AMD有很好的療效，且藥劑量及方案對試驗結果無影響，有較強的安全性和有效性。Chen等[45]研究表明，用Annexin-V/PI染色和MTT比色法分析KH902對人體外培養人視網膜內皮細胞(human retinal endothelial cells, HRECs)的細胞毒性，發現KH902的濃度在100ng/mL至100μg/mL對HRECs無細胞毒性。ELISA法檢測到高糖環境下KH902能與HRECs分泌的VEGF165和PlGF相結合。通過劃痕試驗及Transwell 試驗發現KH902抑制高糖誘導HRECs的遷移和發芽，進一步用免疫印跡法檢測Src、p-Src、PI3K、Akt1、p-Akt1、Erk1/2和p-Erk1/2蛋白水平發現，KH902是通過抑制Src-Akt1-Erk1/2通路的激活，從而與VEGF和PlGF相結合。 Huang等[46]研究將鏈脲佐菌素誘導的糖尿病大鼠模型作為實驗組分為玻璃體腔內注射KH902(D+KH)，玻璃體腔內注射avastin(D+A),玻璃體腔內注射PBS緩沖液(D+PBS)，不注射組(D),以及非糖尿病大鼠作為對照組，共5組。注藥4wk后分別檢測各組視網膜電圖(electroretinogram, ERG)，了解視網膜電生理功能；伊文斯蘭染色法觀察視網膜內屏障(inner blood retinal barrier, iBRB)完整性；免疫組化驗查檢測VEGFR-2和PlGF的表達；蛋白印跡法檢測VEGF信號通路的蛋白水平。結果發現實驗組中各小組ERG a波與b波振幅均降低，視網膜電生理功能受損，視網膜血管滲漏，iBRB完整性遭到破壞，PlGF表達于視網膜神經節細胞層、內叢狀層、視錐視桿細胞層以及色素上皮層，其中視網膜色素上皮層高度表達，VEGFR-2表達于視網膜神經節細胞層、內叢狀層、內核層、外叢狀層、外核層以及視錐視桿細胞層，VEGFR-2、PI3K、AKT、 p-AKT、 p-ERK 、p-SRC蛋白水平均升高。玻璃體腔內注射KH902和avastin均可以升高a、b波振幅，提高視網膜電生理功能，減少視網膜血管滲漏，阻止iBRB被破壞，且KH902更加有效。KH902可減少PlGF和VEGFR-2的表達，而avastin只能減少VEGFR-2的表達。KH902可以降低VEGFR-2、PI3K、AKT、p-AKT、 p-ERK、 p-SRC的蛋白水平，但對于總的ERK和SRC蛋白水平并未見到顯著影響。說明KH902可以通過抑制VEGFR-2、PlGF和PI3K的表達以及SRC、AKT和ERK的激活來抑制iBRB被破壞和保護視網膜電生理功能，是一個潛在的治療DR或其他眼部新生血管性疾病的抗VEGF藥物。

4　展望

目前抗VEGF藥物在治療多種眼部新生血管性疾病中起著重要作用。由于VEGF在血管生理、病理性生長的調節中均起著重要作用[2]，所以抗VEGF藥物的潛在的風險引起注意。有研究報告顯示bevacizumab可能會誘導視網膜光感受器細胞凋亡，引起毒性反應[47]。兩項針對糖尿病黃斑水腫的多中心III期臨床實驗(RISE、RIDE)中發現：ranibizumab組中的患者死亡例數及腦血管意外例數高于對照組[48]。而aflibercept和conbercept由于在臨床上使用時間并不長，仍需長期觀察評判其有效性和安全性。因此，人們一直致力于尋找一個特異性更強，安全性更高的藥物作用靶點。PlGF不僅能在病理狀態下能誘導產生新生血管，而且對它進行抑制并不影響處于正常組織中的靜止期血管，這使PlGF有望成為治療病理性新生血管的一個更為安全有效的靶點。抗PlGF抗體不僅可以抑制內皮細胞增殖、抑制血管生長，它還能促使內皮細胞死亡，從而使現存血管退化。Fischer等[49]研制出一種新的抗PlGF單克隆融合抗體：αPIGF，它能在動物體內有效抑制腫瘤新生血管的生長，并且未引起新生血管代償性重生及其他嚴重的副作用。另一種抗PlGF單克隆抗體TB-403在治療腫瘤方面已經進入臨床實驗階段[50]。在眼科領域中，對抗PlGF的研究及應用目前較少，有研究指出在激光誘導的CNV小鼠模型玻璃體腔內注射抗PlGF藥物(5D11D4)，可抑制CNV的形成，且這種作用是通過介導的VEGFR-1受體完成的[51]。因此，針對PlGF及VEGFR-1抑制劑的研究有著重要的臨床意義，它將有望成為更安全有效抑制新生血管的新一代藥物。

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Progress in placental growth factor in ocular neovascular disease

Jun Zhou1, Tao Liu2

1Xi’an Medical University, Xi’an 710000, Shaanxi Province, China;2Department of Ophthalmology, San Er Ling Yi Hospital, Hanzhong 723000, Shaanxi Province, China

Tao Liu. Department of Ophthalmology, San Er Ling Yi Hospital, Hanzhong 723000, Shaanxi Province, China. taoliustone@163.com

2016-06-22Accepted：2016-09-23

?Neovascularization is the main cause of blindness, such as diabetic retinopathy, retinopathy of prematurity and age-related macular degeneration. Vascular endothelial growth factor(VEGF) plays an important role in the formation of angiogenesis, and is considered to be the most potent angiogenic growth factor. Placental Growth Factor(PlGF) is one of the VEGF family, which play a crucial role in endothelial cell proliferation and migration, angiogenesis, and immune-mediated inflammation. Meanwhile, PlGF is specifically expressed in pathological angiogenesis, but not in normal blood vessels. In recent years, there has been increasing attention to PlGF, therefore this article reviews the role of PlGF in neovascular ocular diseases.

placental growth factor; vascular endothelial growth factor receptor; anti-VEGF drugs; ocular neovascularization

1(710000)中國陜西省西安市，西安醫學院；2(723000)中國陜西省漢中市，三二〇一醫院眼科

周駿，在讀碩士研究生，研究方向：眼底病。

劉濤，博士，主任醫師，碩士研究生導師，三二〇一醫院副院長，研究方向：眼底病.taoliustone@163.com

2016-06-22

2016-09-23

Zhou J, Liu T. Progress in placental growth factor in ocular neovascular disease.GuojiYankeZazhi(IntEyeSci) 2016;16(11):2053-2058

10.3980/j.issn.1672-5123.2016.11.17