OPN和MMP-9在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義

白春俠

OPN和MMP-9在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義

白春俠

目的 探討骨橋蛋白（OPN）和基質金屬蛋白酶9（MMP-9）在膀胱移行細胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)中的表達及臨床意義。方法 選取60例膀胱移行細胞癌患者，同時隨機選取20例非腫瘤患者，對其病理組織標本進行檢查，觀察OPN和MMP-9在膀胱移行細胞癌和正常膀胱組織中的表達以及OPN、MMP-9在膀胱移行細胞癌中的表達與病理特征的關系。結果 OPN主要表達在細胞的細胞漿中，細胞癌組織中總陽性率為80.0%，正常膀胱組織中無陽性表達，OPN在BTCC中的陽性表達水平明顯高于正常膀胱組織陽性表達水平，差異有統計學意義（χ2=13.33，P＜0.05）。MMP-9的主要表達在細胞的細胞漿中，正常膀胱組中中無陽性表達，細胞癌組織中總陽性率為68.4%，MMP-9在BTCC中的陽性表達水平明顯高于正常膀胱組織陽性表達水平，差異有統計學意義（χ2=6.35，P＜0.05）。OPN在不同病理分級、臨床分期、是否復發、腫瘤數量方面的陽性表達率差異均有統計學意義（P＜0.05），MMP-9在病理分級、臨床分期、是否復發方面的陽性率差異有統計學意義（P＜0.05）。結論 OPN和MMP-9在膀胱組織中的表達升高與腫瘤細胞轉移和侵襲具有密切關系，檢測OPN和MMP-9對膀胱移行細胞癌的診斷和預后判斷具有重要參考價值。

膀胱移行細胞癌；骨橋蛋白；基質金屬蛋白酶9

膀胱癌是臨床常見惡性腫瘤，膀胱移行細胞癌是其中最多發的腫瘤[1]，誘發因素多，發病機制復雜，準確的診斷和預后判斷對該病的診治具有重要意義。骨橋蛋白（OPN）屬于一種酸性糖蛋白，生物學功能多樣，與多數實體腫瘤細胞的侵襲和繁殖相關[2]。基質金屬蛋白酶9（MMP-9)被認為是腫瘤轉移、侵襲過程中的一種最重要、最直接的金屬蛋白酶。本研究分析了OPN和MMP-9在BTCC中的表達及臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月～2014年12月營口市中心醫院收治的BTCC患者60例，男38例，女22例，年齡25～84歲，平均（62.5±5.8）歲。患者均經病理學檢查確診，24例為初發腫瘤，36例為復發腫瘤；35例單發，25例多發；17例腫瘤直徑＞3 cm，43例腫瘤直徑≤3 cm；其中54例行經尿道膀胱腫瘤電切除術，2例行部分膀胱切除術，4例行全膀胱切除術。根據世界衛生組織修訂的病理分級：18例G 1、19例G 2、23例G 3。腫瘤分期：21例淺表型、39例浸潤型。同時隨機選取20例非腫瘤患者的正常膀胱切除組織標本，取自膀胱經活組織檢查或開放手術。

1.2 方法 將用作免疫組織化學的玻片在洗潔精術中浸泡24 h，用水流沖洗，蒸餾水漂洗，然后將玻片浸泡在95%乙醇中24 h，蒸餾水漂洗，置入烤箱中徹底干燥。用蒸餾水將多聚-L-賴氨酸溶液稀釋10倍，將玻片在稀釋液中浸泡1～5 min，45℃烤箱烘干。對所有標本組織進行40%甲醛水溶液處理和石蠟包埋。利用自動切片機將處理好的標本切成4 μm厚的切片3～4張，進行漂片，然后貼附于玻片上，65℃烤箱烘烤4 h。利用梯度乙醇和二甲苯對切片進行逐步脫蠟，用蒸餾水沖洗2次，3 min/次，用PBS沖洗3次，3 min/次。根據抗體說明書，對組織抗原給予相應修復，OPN利用高壓高溫修復法，MMP-9無需修復。

1.3 結果評價標準 隨機選取在400倍光鏡下每張切片上的5個視野，每個視野的細胞計數為200，共100個細胞計數；利用顯微圖像分析系統系統標記具有代表性的陽性視野中的棕黃色顆粒，對所有視野的陽性結果進行標準化檢測，蛋白顆粒密度有參數積分光密度表示。細胞無棕色或背景一致為陰性，或陽性細胞＜5%，可判定為陰性：陽性細胞＜25%，判定為陽性；陽性細胞25%～50%為中等陽性；陽性細胞＞50%為強陽性[3]。

1.4 統計學方法 應用SPSS 18.0統計學軟件處理數據。計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 OPN的表達 OPN主要表達在細胞的細胞漿中，呈棕黃色顆粒，少見細胞核著色[4]。正常膀胱組織中無陽性表達，細胞癌組織中12例陽性表達（20.0%）、12例陰性（20.0%）、14例中等陽性（23.3%）、22例強陽性（36.7%），總陽性率為80.0%。OPN在BTCC中的陽性表達水平明顯高于正常膀胱組織陽性表達水平，差異有統計學意義（χ2=13.33，P＜0.05）。

2.2 MMP-9的表達 MMP-9的主要表達在細胞的細胞漿中，呈棕黃色顆粒，未見細胞核著色[5]。正常膀胱組中中無陽性表達，細胞癌組織中19例陰性表達（31.7%）、14例陽性（23.3%）、8例中等陽性（13.3%）、19例強陽性（31.7%），總陽性率為68.4%。MMP-9在BTCC中的陽性表達水平明顯高于正常膀胱組織陽性表達水平，差異有統計學意義（χ2=22.57，P＜0.05）。

2.3 OPN、MMP-9在BTCC中的表達與病理特征的關系OPN在不同性別、腫瘤直徑方面的陽性表達率差異無統計學意義；在不同病理分級、臨床分期、是否復發、腫瘤數量方面的陽性表達率差異均有統計學意義（P＜0.05），G 1與G 2、G 1與G 3間的陽性率差異有統計學意義（P＜0.05），G 2與G 3間陽性率差異無統計學意義。MMP-9在性別、腫瘤數量、腫瘤大小方面的陽性率差異無統計學意義，在病理分級、臨床分期、是否復發方面的陽性率差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

3 討論

膀胱癌是臨床常見泌尿系惡性腫瘤，其中BTCC是發生率最高的腫瘤，具有容易復發、浸潤性生長、多中心的特點[6]，隨著病情發展，最終可能成為轉移性或肌層浸潤性細胞癌。相關研究發現，腫瘤侵襲是由多種細胞因子和蛋白基因所決定的[4]，涉及細胞黏附、遷移、增殖等環節。目前臨床多通過BTCC的臨床分期和病理分級對預后進行評估判斷[7]，但腫瘤細胞的轉移和浸潤是一個復雜的過程，因此預后判斷的準確性并不理想。

找到能夠準確預測BCTT腫瘤復發、轉移、浸潤的相關指

標，給予相應治療，有助于降低復發率、提高患者的生存質量。本研究結果顯示，OPN和MMP-9在BTCC組織中的表達高于其在正常膀胱組織中的表達，說明兩者在腫瘤細胞轉移、浸潤過程中發揮一定作用。本研究中，OPN的陽性表達與患者性別、腫瘤數量、腫瘤大小無關，但與病理分級、臨床分期及復發情況等有密切聯系，在G 2、G 3中的表達明顯高于在G 1中的表達，說明OPN在高分化腫瘤組織中的表達低于低分化腫瘤，提示BTCC的病變程度與OPN表達相關。同時，OPN在淺表型腫瘤的表達低于浸潤型腫瘤，說明OPN表達與腫瘤細胞的浸潤和增殖能力相關。相關研究顯示，MMP-9在多種惡性腫瘤中的陽性表達率均較高[8]。本研究中，MMP-9的在BTCC腫瘤組織中的陽性表達率隨著腫瘤病理分級的增高而上升，且在浸潤型腫瘤中的表達水平更高，說明MMP-9的表達和患者疾病臨床分期之間有密切聯系。

綜上所述，OPN和MMP-9是評估BTCC復發和惡性程度的重要指標，為膀胱癌的臨床診治提供了科學的依據。

[1] 趙建華，王晨宇，羅勇，等.MMP-2、MMP-9在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義[J].國際泌尿系統雜志，2013，33（2）:194-197.

[2] 李亞偉，姜書傳，黃后寶，等.骨橋蛋白和MMP-10在膀胱尿路上皮癌中的表達及臨床意義[J].現代泌尿外科雜志，2013，18（5）:449-452.

[3] 段波，梁培禾，吳剛，等.骨橋蛋白在膀胱移行細胞癌中的表達及臨床意義[J].重慶醫學，2007，36（14）：1372-1374.

[4] 戴宇，焦伊勝，王永來，等.骨橋蛋白和基質金屬蛋白酶9在上皮性卵巢癌中的表達及二者相關性[J].中國醫科大學學報，2009，38（10）：775-776.

[5] 楊立華，尚小領，張凡，等.喉鱗狀細胞癌中OPN、MMP-9的表達及意義[J].臨床與實驗病理學雜志，2012，28（4）：403-405.

[6] 張東濤，袁靜，楊力.OPN、IKK-13、NF-κB、 p 65和MMP-9在胃癌細胞中的表達及意義[J].實用醫學雜志，2009，25（9）：1359-1361.

[7] 詹自力，茍欣.P 27、cyclin D 1及膀胱移行細胞癌中的表達及其臨床意義[J].當代醫學，2010，16（24）：31-33.

[8] 楊麗君，陳鐘.OPN和MMP-9在結直腸癌中的表達及其與肝轉移的相關性[J].當代醫學，2012，18（12）：7-9.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.1.013

遼寧 115000 營口市中心醫院病理科 （白春俠）