應用乳酸諾氟沙星治療雞大腸桿菌病

王彩先 劉華棟 詹麗娥 陸冰洋 唐娟 李婷婷 丁樹榮

摘要：本研究目的是通過乳酸諾氟沙星治療雞大腸桿菌病，總結出其對雞大腸桿菌病的效果以及藥物使用的劑量。從太原地區某雞場分離到一株大腸桿菌，使用乳酸諾氟沙星、氯霉素、卡那霉素、慶大霉素、紅霉素等藥物對其做藥敏實驗，檢測出乳酸諾氟沙星對雞源大腸桿菌具有高敏感性。使用試管法測定其對雞大腸桿菌的最低抑菌濃度，結果表明乳酸諾氟沙星對雞大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.24？g/mL。最后通過治療實驗對180只無大腸桿菌病的雞做攻毒和治療實驗，表明不同劑量的藥物治療組雞的死亡率明顯低于感染不給藥組。通過本實驗證明乳酸諾氟沙星用于治療雞大腸桿菌病具備高效低毒特點，為雞大腸桿菌病的臨床用藥提供參考。

關鍵詞：乳酸諾氟沙星；大腸桿菌；藥敏實驗；抑菌濃度

諾氟沙星屬于喹諾酮類第三代產品，在第二代的毗呢酸的基礎上，引入F原子，使抗菌范圍擴大，抗菌活性顯著增強，所以第三代稱為氟咬諾酮類，是于1978年日本杏林制藥公司首次報道（AM-715，MK-366）。由于其不僅具有抗菌譜廣、殺菌活性強、生物利用度高等優點，尤其是對革蘭氏陰性菌的抑菌作用明顯優于第一、二代喹諾酮。而且該藥既能口服飲水，又能靜脈注射和肌肉注射給藥。所以自該藥產生以來，在我國乃至世界臨床醫學上已廣泛應用，療效滿意，無明顯的不良反應。在獸醫臨床上也得到廣泛的應用。

乳酸諾氟沙星是乳酸與諾氟沙星結合生成的水溶性諾氟沙星乳酸鹽。在水中的溶解度比諾氟沙星提高1200倍，對機體組織刺激性小，使體內生物活性物質提高2-3倍，因而易吸收，作用快。它能直接作用于細菌的核，抑制細菌DNA旋轉酶，從而阻斷DNA復制，從細菌核的深處破壞細菌的代謝和增殖，因而能迅速把細菌殺死。乳酸諾氟沙星具有廣譜、高效、低毒、價廉等優點。對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有較強的殺滅作用。對鏈球菌的作用是吡哌酸的60倍，對禽多殺性巴氏桿菌的作用與環丙沙星相當，對大腸桿菌和痢疾桿菌的作用超過氧氟沙星，是腸道感染的首選藥。安全范圍廣，毒副作用極小，雞的口服半致死量為3175mg/（kg·bw），是治療量的300余倍。價格與同類產品相比，以注射劑為例，價格僅為乳酸氧氟沙星的1/8，為乳酸環丙沙星的1/12。

本實驗選取乳酸諾氟沙星也是試圖通過實驗分析其對雞大腸桿菌病的治療效果。

1 材料和方法

1.1 藥物

乳酸諾氟沙星注射液和乳酸諾氟沙星預混劑是由鄭州瑞達制藥有限公司生產，含量5mg/mL，包裝5mL/瓶。藥敏紙片購于北京天壇藥物生物技術開發公司，共6種常見藥物，分別是：乳酸諾氟沙星、氯霉素、卡那霉素、慶大霉素、紅霉素、青霉素。諾氟沙星。大腸桿菌為太原地區某雞場分離。麥康凱瓊脂培養基購于中國廣東環凱微生物科技公司。營養瓊脂購于北京雙旋微生物培養基制品廠。三糖鐵瓊脂購于杭州天和微生物試劑有限公司，營養肉湯購于杭州天和微生物試劑有限公司，血瓊脂購于鄭州安圖綠科生物工程有限公司。

1.2 實驗動物

20日齡的SPF雞200只，購于北京梅里亞微通實驗動物技術有限公司。

1.3 方法

1.3.1 藥敏實驗采用K-B試紙擴散法，挑取大腸桿菌單個菌落均勻涂布于營養瓊脂平板，將含有抗生素的藥敏紙片用燒灼滅菌的鑷子分別貼于平板表面，紙片之間間隔24mm以上，37℃培養24h后觀察結果，測量藥敏紙片抑菌圈的直徑，參照CLSI手冊中的標準作出判斷。

1.3.2 乳酸諾氟沙星最低抑菌濃度測定采用試管法，取無菌試管15支，第一試管中加入肉湯培養基0.9mL，其余14支試管各加入0.5mL。吸取5mg/mL乳酸諾氟沙星注射液0.1mL加入第1管中，充分混勻后吸出0.5mL移人第2管中，混勻后再由第2管移出0.5mL到第3管中，依次到第14管，棄去0.5mL。第15管作為對照。然后向各管中加入菌液0.05mL，置37℃恒溫培養24h觀察結果。兀細菌生長的藥物最高稀釋管即為該菌對藥物的最低抑菌濃度。

1.3.3 乳酸諾氟沙星對雞大腸桿菌病的治療實驗將購買的SPF雞隨機分成6組，每組30只，分組情況如表1。試驗開始將雞氣囊接種本次分離到的大腸桿菌，每只雞0.5mL，72h后給各治療組的雞在飲水中分別飲用含有相應劑量的乳酸諾氟沙星和諾氟沙星，1次ld，連用Sd。記錄試驗雞的臨床癥狀和死亡情況，死亡雞進行剖檢，觀察其變化。

2 結果

2.1 藥敏試驗結果

乳酸諾氟沙星31.3mm、氯霉素28.2mm、卡那霉素26.2mm、慶大霉素17.4mm、紅霉素11.1mm、青霉素8.0mm。結果表明大腸桿菌分離株對乳酸諾氟沙星最敏感。

2.2 乳酸諾氟沙星最低抑菌濃度測定結果

經實驗結果顯示，第12支試管兀細菌生長，表明乳酸諾氟沙星對大腸桿菌對最低抑菌濃度為0.24μg/mL。

2.3 乳酸諾氟沙星對雞人腸桿菌治療結果治療結果如表2。

由表的結果可以看出，治療組雞的死亡率明顯低于感染后不給藥組。高、中劑量組的治療效果明顯優于低劑量的乳酸諾氟沙星和對照藥物諾氟沙星。

3 討論

目前喹諾酮類藥物常用于治療革蘭氏陰性菌感染的疾病，特別是第三代喹諾酮類如諾氟沙星、氧氟沙星等藥物使用更為常見，尤其是在對大腸桿菌病的治療上，使用諾氟沙星更為常見，但其成品藥物多為其酸性鹽，如鹽酸諾氟沙星、乳酸諾氟沙星等。

本試驗通過使用乳酸諾氟沙星對大腸桿菌病雞進行治療，可以看出在高劑量治療組[1.2g/（kg·bw）]時其對人工致病的大腸桿菌病雞的治愈率可以達到100%，中劑量治療組[0.8g/（kg·bw）]也可以達到95%的治愈率，這明顯優于使用諾氟沙星治療的84.2%的治愈率。表明乳酸諾氟沙星對本試驗分離到的雞大腸桿菌對抗菌活性要優于諾氟沙星。姜中其等的研究認為3種諾氟沙星鹽（鹽酸諾氟沙星、煙酸諾氟沙星、乳酸諾氟沙星）對大腸桿菌、沙門氏菌的抗菌活性差異不大，和諾氟沙星差異也不大。陳志寶等也通過試驗得出相同的結論。這與本試驗結果不一致，有可能是本次的分離株存在變異的原因。

由于大腸桿菌很容易產生耐藥株，因此在養殖過程中應該注意藥物的輪換和交替使用。