譚國浩 譚翰清
實時熒光PCR在食源性致病菌食物中毒應急處置中的應用
譚國浩 譚翰清
目的探討實時熒光PCR在食源性致病菌食物中毒快速應急檢測中的應用價值。方法對一起食物中毒進行流行病學調查,采集患者、相關食品、廚房工作人員和廚具拭子等標本,對前增菌液進行食源性致病菌實時熒光PCR快速篩查,同步進行分離培養。結果該事件39名聚餐人員中共有22人發病,罹病率達59.5%,對采集的36份標本進行實時熒光PCR和分離培養,其中8份患者標本和3份食品標本副溶血性弧菌實時熒光PCR陽性,并相應分離出11株血清型為O3∶K6的副溶血性弧菌。結論本次食物中毒是由冰鮮海魚中的副溶血性弧菌污染熟食品而引起的,實時熒光PCR快速、特異、靈敏,可為食物中毒快速處置提供依據。
副溶血性弧菌;食物中毒;實時熒光PCR
副溶血性弧菌、沙門氏菌是主要的食源性致病菌[1],可引起食物中毒,常規檢測方法經過増菌、分離、生化試驗、血清學反應等過程,操作繁瑣,檢測周期長,約5~7天,不利于突發公共衛生事件的應急處置。快速、特異、靈敏的實時熒光PCR技術在病原微生物檢測中應用廣泛[2-4]。本研究探討實時熒光PCR技術在一起食源性致病菌引起的食物中毒中的快速檢測應用效果。
1.1 主要儀器與培養試劑
實時熒光PCR儀(LighCycler1.5)、核酸提取儀(西安天隆NP-960)、電熱恒溫培養箱(上海躍進醫療器械一廠)等;胰大豆蛋白胨肉湯、緩沖蛋白胨肉湯、GN肉湯、3%NaCl堿性蛋白胨肉湯、堿性蛋白胨……