郭秀麗,徐襯英,田紅成,李紅,付雪姣
(河南省睢縣林業(yè)局,河南 睢縣 476900)
園林花卉快繁技術
郭秀麗,徐襯英,田紅成,李紅,付雪姣
(河南省睢縣林業(yè)局,河南 睢縣 476900)
園林花卉的快速繁殖又叫試管繁殖,是指用組織培養(yǎng)方法快速無性繁殖花卉的一種新技術,本文簡要的介紹了園林花卉的快速繁殖具體措施和技術。
園林花卉;快速繁殖;技術
植物組織培養(yǎng)是指將植物的離體生活組織部分(器官、組織和細胞)在適宜的人工培養(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng),使其增殖(產(chǎn)生愈傷組織)并逐步分化出器官(芽和根)和形成小植株的方法。它是建立在植物細胞具有全能性的理論基礎上,即植物體的每一個生活細胞都攜帶著一套完整的基因組并且具有產(chǎn)生完整植株的能力。
(一)嚴格無菌
植物組織培養(yǎng)的整個操作過程和培養(yǎng)過程都要求在嚴格無菌的條件下進行,避免微生物(主要是細菌和真菌)的污染。因此,操作過程要在接種室或超凈工作臺上進行;選用的植物材料要進行表面消毒;配制的培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌和無菌過濾。
(二)溫度
1.培養(yǎng)溫度。培養(yǎng)物生長的最適溫度大致上和該植物原來生長所需最適溫度相同。
2.不同的溫度處理。
低溫處理:一些植物如唐菖蒲、百合等的試管苗、小鱗莖,在盆栽前低溫處理(2℃)4-6周,可大大提高移栽成活率。
高溫處理:高溫處理不僅可以獲得無病毒植株,而且對一些植物的器官發(fā)生也有影響。如葡萄的莖尖分生組織培養(yǎng)在35℃下3個月可以產(chǎn)生無病毒苗;菊芋塊莖在35℃下培養(yǎng)能促進生根。
(三)光照
1.光強。少數(shù)植物器官發(fā)生在無光條件下,但其進一步的生長發(fā)育和大多數(shù)植物的器官發(fā)生必須有光。莖尖的起始生長及試管苗的繼代增殖以1 000-3 000lx光強適宜;生根成苗以及小植株的生長以3 000-10 000lx為宜。
2.光質。光質對愈傷組織誘導,培養(yǎng)組織的增殖,以及器官的分化都有明顯的影響。如百合珠芽在紅光下生長的愈傷組織比藍光和白光下生長快;唐菖蒲子球塊在藍光下培養(yǎng)比在紅光下培養(yǎng)出現(xiàn)的芽早,幼苗生長旺盛,根系粗壯。
3.光照時間。最常用的光周期是16小時的光照、8小時的黑暗。但是,有些植物對光周期反應很敏感。如有人將對短日照敏感的葡萄品種的莖段進行培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)在短日照下形成根,而在長日照下只產(chǎn)生愈傷組織;長日植物-雙色金光菊的莖尖,在日照超過12小時的條件下會形成花蕾。可見,通過光照時間的控制,可控制芽的分化方向。
(四)培養(yǎng)基的PH值和滲透壓
1.PH值。培養(yǎng)基的PH值因培養(yǎng)植物的種類而異。大多數(shù)花卉都要求在PH5.6~5.8的條件下進行組織培養(yǎng)。有些植物,如喜酸性的杜鵑花、蘭花以PH5為宜。
2.滲透壓。培養(yǎng)基的滲透壓在試管繁殖中并不太強調。然而,對于花藥與原生質體的培養(yǎng)來說,卻是成敗的關鍵。合適的滲透壓可提高花藥中花粉愈傷組織的誘導率,保持原生質體呈正常的球形與進一步的細胞分裂,不因吸水過多而破碎,也不因失水太多而萎縮。固體培養(yǎng)常用2%~5%的蔗糖維持。
(五)氣體的影響
組織培養(yǎng)中的外植體呼吸需要氧氣。因此,在固體培養(yǎng)時,培養(yǎng)物必須置于固體培養(yǎng)基表面,避免沉入培養(yǎng)基中;在液體培養(yǎng)時,通過用振蕩的方法解決供氧問題。
培養(yǎng)基是組織培養(yǎng)成功的重要因素之一,它為外植體細胞的增殖、器官的分化與幼苗的生長提供了營養(yǎng)物質和生長調節(jié)物質。另外還起著維持一定的滲透壓和酸堿度的作用。培養(yǎng)基有液體和固體兩種。固體培養(yǎng)基中加有0.7%~1%的瓊脂。花卉試管繁殖常采用的是固體培養(yǎng)基。
(一)培養(yǎng)材料的選擇
為了獲得無病毒植株,最好選用莖尖、生長點、形成層等作為外植體。此外,還可選用葉片、鱗片、根莖、莖段、花瓣、子房、珠心、子葉、下胚軸等。
(二)材料表面無菌
先用肥皂水洗滌材料,然后用自來水沖洗,再放入70%的酒精中約30秒鐘,后取出在0.1%的升汞中浸泡5~10分鐘或在10%的漂白粉上清液中浸泡10~15分鐘,最后用蒸餾水沖洗3次。
(三)接種
從滅過菌的芽中剝取莖尖或生長點,或將根莖、幼莖、下胚軸等切成0.5~1cm長的切段,或將葉片、花瓣、子葉等切成0.5~1cm2的切塊。在無菌室內或超凈工作臺上接種培養(yǎng)基上。
(四)培養(yǎng)
1.初次培養(yǎng)。外植體在組織培養(yǎng)的初期,首先是產(chǎn)生愈傷組織,再分化出芽,或直接產(chǎn)生芽,形成帶根植株。在初次培養(yǎng)所用的激素中,細胞分裂素以6-芐基腺嘌呤(BA)效果最好,生長素以加萘乙酸(NAA)效果好。在BA和NAA配合使用時,外植體往往會脫分化或腋芽萌動而增殖。
2.芽的增殖。此階段的培養(yǎng)目的是繁殖大量有效的芽和苗。在芽增殖的培養(yǎng)基中,細胞分裂素是不可缺少的。
3.生根培養(yǎng)。其培養(yǎng)基目的是使第一和第二階段培養(yǎng)的苗發(fā)生不定根,并使苗繼續(xù)長大,從而長成完整的小植株。
(五)煉苗與移栽
1.煉苗。為保證移栽后成活,使試管苗適應從異樣型轉變?yōu)樽责B(yǎng)型的過程,因此需要煉苗。其步驟:把培養(yǎng)物放置在移栽環(huán)境中3~10天,使其適應新的光、溫、濕條件。在移栽前一天打開瓶塞,第二天再移苗。
2.移栽。
苗的取出:先在瓶中注入清水,用鑷子輕輕地將培養(yǎng)基塊攪碎,將苗取出。然后用清水漂去粘附在根部的培養(yǎng)基,這樣可避免根部受傷以及因培養(yǎng)基帶人土中而引起的腐爛。
種植:先將生根苗移栽到洗凈滅菌的河沙中進行沙培。初期應注意保持移栽苗環(huán)境中有較高的濕度和較穩(wěn)定的氣溫(20-22℃)。沙培2~3周之后則可移栽到裝有土壤的花盆或木箱中培養(yǎng)成栽培用苗。
(編輯:劉國華)
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1673-9019(2016)08-0030-02
2016-03-22
郭秀麗(1979-),女,河南睢縣人,工程師,主要從事園林綠化技術推廣工作。