銀杏葉黃酮聯(lián)合奧扎格雷鈉對(duì)急性腦梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3的影響

李季泓

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，沈陽(yáng)110032)

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銀杏葉黃酮聯(lián)合奧扎格雷鈉對(duì)急性腦梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3的影響

李季泓

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，沈陽(yáng)110032)

摘要：目的探討銀杏葉黃酮聯(lián)合奧扎格雷鈉對(duì)急性腦梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3水平的影響及其意義。方法選取急性腦梗死的患者180例,隨機(jī)分為2組,各90例，對(duì)照組行常規(guī)療法治療，實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用銀杏葉黃酮注射液，檢測(cè)2組臨床療效、神經(jīng)功能缺損評(píng)分及血清HIF-1α、TNF-α、Caspase-3水平，進(jìn)而對(duì)2種療法進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組總有效率78.9%，明顯優(yōu)于對(duì)照組的56.7%(P<0.05)；神經(jīng)功能缺損評(píng)分明顯低于對(duì)照組(P<0.05);血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論銀杏葉黃酮治療急性腦梗死,能有效改善神經(jīng)功能缺損評(píng)分,明顯改善臨床癥狀。

關(guān)鍵詞：銀杏葉黃酮；急性腦梗死；神經(jīng)功能缺損；HIF-1α；TNF-α；Caspase-3

腦梗死(CI),又稱為缺血性腦卒中(CIS)，是由于各種原因所致腦部血液供應(yīng)障礙，導(dǎo)致局部腦組織缺血、缺氧性壞死，而引起神經(jīng)功能缺損的一類臨床綜合征[1-4]。屬中醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”范疇，治宜益氣活血、祛瘀通絡(luò)[5]。銀杏葉黃酮，亦稱銀杏葉提取物，具有增加腦血管流量、降低腦血管阻力、改善血液循環(huán)以及保護(hù)腦組織細(xì)胞的藥理作用。研究[6-7]發(fā)現(xiàn)，低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、血清腫瘤壞死因子(TNF-α)在急性腦梗死早期具有重要意義。本研究通過(guò)觀察急性腦梗死患者經(jīng)銀杏葉黃酮治療后其血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平的變化，以探討其治療機(jī)制。

1資料與方法

1．1一般資料選擇2014年6月—2015年2月于我院神經(jīng)內(nèi)科以急性腦梗死為診斷而收入院的患者180例，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,各90例。均符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南》(2010年)[8]中診斷標(biāo)準(zhǔn):1)初次發(fā)作的腦梗死患者；2)發(fā)病24 h內(nèi)接受治療；3)CT或核磁共振等影像檢查確診為急性腦梗死患者，意識(shí)清醒同意并自愿參與本實(shí)驗(yàn)者。2組一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

項(xiàng) 目實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組平均年齡/歲67.63±9.2465.41±9.07平均病程/h16.23±2.5814.91±2.07男性/n(%)58(64.4)54(60.0)女性/n(%)32(35.6)36(40.0)收縮壓/mmHg152.58±21.09156.22±20.53舒張壓/mmHg112.45±14.13116.77±13.29高血壓/n(%)12(13.3)14(15.6)冠心病/n(%)15(16.7)17(18.9)糖尿病/n(%)11(12.2)13(14.4)

1.2治療方法

1.2.1對(duì)照組嚴(yán)格按《急性腦梗死的歐洲治療指南》[9]，予以常規(guī)治療，注射用奧扎格雷鈉(海南碧凱藥業(yè)有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H20054803，批號(hào)：20100816)80 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，2次/d

靜脈滴注；小牛血去蛋白提取物注射液(長(zhǎng)春天誠(chéng)藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20003820，批號(hào)：20110711)800 mg，250 mL氯化鈉注射液稀釋，1次/d靜脈滴注；阿司匹林腸溶片(江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H32026548，批號(hào)：20100820)100 mg，每晚1次口服，共治療2周。

1.2.2實(shí)驗(yàn)組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用銀杏葉提取物注射液(悅康藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20070226，批號(hào)：20121016)20 mL，以5%葡萄糖注射液250 mL稀釋，1次/d靜脈滴注，共治療2周。

1.3觀察指標(biāo)及方法觀察2組治療前后臨床療效、神經(jīng)功能缺損評(píng)分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平變化。血清指標(biāo)采集:所有研究對(duì)象均在治療前、后，空腹8 h后從肘靜脈抽取靜脈血3 mL，置于真空采血管中，4 ℃低溫環(huán)境下靜置1 h后以3 000r/min，離心20 min，分離血清，行雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清中HIF-1α、Caspase-3、TNF-α濃度水平。

1.4療效標(biāo)準(zhǔn)參照1995年全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的標(biāo)準(zhǔn)判定[10]，顯效：神經(jīng)功能缺損評(píng)分減少90%以上；有效：神經(jīng)功能缺損評(píng)分減少45%～90%；進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損評(píng)分減少18%～45%；不進(jìn)步：神經(jīng)功能缺損評(píng)分減少17%～0%；惡化:神經(jīng)功能缺損評(píng)分增加18%以上；死亡。神經(jīng)功能缺損評(píng)分：參照1996年全國(guó)第四屆腦血管病會(huì)議制定的評(píng)分方法進(jìn)行2組神經(jīng)功能缺損評(píng)分，最低為0分，最高為45分。

2結(jié)果

2.1治療2周后2組臨床療效結(jié)果比較見(jiàn)表2。

表2　治療2周后2組臨床療效結(jié)果比較(n=90)　例(%)

注：與對(duì)照組比較，#P<0.05

2.22組治療前后神經(jīng)功能缺損評(píng)分比較見(jiàn)表3。

±s,n=90)

注：與治療前比較，#P<0.05，##P<0.01；與對(duì)照組比較，△P<0.05

2.3治療2周后2組血清各指標(biāo)變化比較見(jiàn)表4。

3討論

急性腦梗死是一種具有高發(fā)病率、高病死率、高致殘率的臨床常見(jiàn)病，且由于人口老齡化的加劇、飲食結(jié)構(gòu)等因素的變化，其好發(fā)人群逐漸年輕化。傳統(tǒng)

±s,n=90)

注：與治療前比較，#P<0.05，##P<0.01；與對(duì)照組比較，△P<0.05

醫(yī)學(xué)將急性腦梗死歸屬于“中風(fēng)”范疇，治療當(dāng)以益氣活血、祛瘀通絡(luò)為主要治療大法[11-13]。銀杏葉提取物注射液是近年來(lái)新興的藥物，提取自白果科植物白果的干燥葉，其主要有效成分為銀杏葉黃酮。現(xiàn)在臨床主要將之應(yīng)用于治療冠心病、心絞痛、腦動(dòng)脈硬化以及高血壓等心腦血管疾病。據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道，銀杏葉黃酮具有多種藥理作用，不僅能增加腦血流量、改善腦部組織血液循環(huán)、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，還能抑制血小板聚集、抗衰老、提高免疫力的功能[14]。臨床雖有將銀杏葉黃酮用于治療急性腦梗死的文獻(xiàn)報(bào)道，但并沒(méi)有從HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等血清指標(biāo)的角度進(jìn)行分析研究。因此，本研究通過(guò)對(duì)急性腦梗死患者應(yīng)用銀杏葉提取物注射液，進(jìn)一步探究其對(duì)患者神經(jīng)功能缺損評(píng)分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標(biāo)的影響，以明確其臨床療效，并得出相關(guān)結(jié)論。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，銀杏葉黃酮能有效改善急性腦梗死患者神經(jīng)功能缺損癥狀，提高治療率。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)2周治療后，其有效率明顯優(yōu)于對(duì)照組，病死率明顯低于對(duì)照組。其原因可能是銀杏葉黃酮能有效增加受損腦部組織的血流量，改善其缺血程度，以及還能抑制血小板聚集，防治血栓形成、缺血加劇，從而降低神經(jīng)功能缺損評(píng)分，提高治療有效率，降低病死率。亦有學(xué)者研究[15]證明，銀杏葉黃酮具有降低血液黏稠度、清除自由基、改善腦功能的作用，在急性腦梗死發(fā)生早期即及時(shí)有效的清除了大量的自由基，在一定程度上防治神經(jīng)功能缺損癥狀的加劇，這一結(jié)論也可能是實(shí)驗(yàn)組患者有效率、神經(jīng)功能缺損評(píng)分優(yōu)于對(duì)照組的原因。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，銀杏葉黃酮能有效調(diào)節(jié)急性腦梗死患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指標(biāo)水平。HIF-1α是在人體缺氧的條件下而產(chǎn)生的一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，在正常氧氣充足條件下并不表達(dá)，只有當(dāng)機(jī)體組織發(fā)生缺氧時(shí)，才會(huì)被誘導(dǎo)激活并發(fā)揮其特有的生理作用，是人體在缺氧條件下維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的主要物質(zhì)。研究[16]發(fā)現(xiàn)，HIF-1α主要通過(guò)調(diào)節(jié)缺氧反應(yīng)性基因表達(dá)的分子通路而發(fā)揮其生理作用，據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，HIF-1α的下游基因多達(dá)百余種，在缺氧發(fā)生時(shí)不僅可以促進(jìn)紅細(xì)胞、血管的生成，還能調(diào)節(jié)糖代謝、維持人體微環(huán)境穩(wěn)態(tài)。但其發(fā)揮作用的具體機(jī)制目前仍未十分清楚，各家觀點(diǎn)亦不十分相同。在本研究中治療前2組HIF-1α水平均較高，其原因可能與腦組織突發(fā)梗死急劇缺氧、缺血促進(jìn)其大量表達(dá)有關(guān)，而治療結(jié)束后實(shí)驗(yàn)組明顯低于對(duì)照組，其原因可能是實(shí)驗(yàn)組在應(yīng)用銀杏葉黃酮后，病變部腦組織的血流量增加，其缺血、缺氧程度得到有效改善，因此血清HIF-1α水平也隨之恢復(fù)。Caspase-3是一種能夠促使細(xì)胞凋亡的蛋白酶，在急性腦梗死發(fā)生時(shí)具有促進(jìn)病變區(qū)神經(jīng)元凋亡的重要作用。人體在正常生理?xiàng)l件下，Caspase-3以沒(méi)有活性的酶原形式存在，并不發(fā)揮其生理作用，只有被細(xì)胞開(kāi)始凋亡的信號(hào)激活后，才會(huì)活化并發(fā)揮其加速誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。研究發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死患者在應(yīng)用Caspase-3抑制劑后，能夠明顯減輕病變區(qū)腦組織缺血神經(jīng)元的損傷，且通過(guò)抑制Caspase-3表達(dá)亦可減輕腦缺血的損傷程度，降低致殘率。在本研究中，2組在新發(fā)病時(shí)Caspase-3皆高度表達(dá)，而治療結(jié)束后實(shí)驗(yàn)組患者血清Caspase-3水平明顯低于對(duì)照組，這一結(jié)果可能與實(shí)驗(yàn)組在應(yīng)用銀杏葉黃酮后體內(nèi)Caspase-3表達(dá)受到相應(yīng)抑制有關(guān)，結(jié)合“抑制Caspase-3表達(dá)亦可減輕腦缺血的損傷程度”的結(jié)論，本研究中實(shí)驗(yàn)組療效及神經(jīng)功能缺損評(píng)分低的結(jié)果能夠得以解釋。TNF-α是一種早期炎性因子，主要由單核-巨噬細(xì)胞活化產(chǎn)生，在腦梗死急性期可加重患者腦缺血局部組織的損害，實(shí)驗(yàn)組患者經(jīng)治療后其血清TNF-α水平明顯低于對(duì)照組，其原因可能與銀杏葉黃酮調(diào)節(jié)免疫的功能有關(guān)，但其具體抗炎、調(diào)節(jié)免疫的機(jī)制目前尚不十分清楚。

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Ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serum HIF-1α, TNF-α and Caspase-3

LI Jihong

(Department of pharmacy, Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110032,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3.MethodsThe 180 acute cerebral infarction patients were selected and divided into control group treated by clinical routine therapy and experiment group treated by ginkgo biloba flavone injection,the clinical efficacy of the two groups of patients,neurological impairment score and serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level.The clinical effect were compared by SPSS 17.0.ResultsCompared with control group,the efficiency were higher(P<0.05).Compared with control group,the neurologic impairment score were lower(P<0.05).Compared with control group,the serum HIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level were lower(P<0.05).ConclusionFlavonoids from the leaves of Ginkgo biloba on acute cerebral infarction patients better clinical curative effect,and can effectively improve symptoms in patients with neurological deficit,for the clinical treatment of cerebral infarction with important significance.

Keywords：Ginkgo biloba flavone;acute cerebral infarction;neurological function defect;HIF-1α;TNF-α;Caspase-3

(收稿日期:2015-06-10)

文章編號(hào)：2095-6258(2016)01-0091-04

中圖分類號(hào)：R255.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

作者簡(jiǎn)介：李季泓(1970-),女,大學(xué)本科,副主任藥師,主要從事藥物提取與分離研究。

基金項(xiàng)目：“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2007BA120B076)。

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.01.029