一測多評法在中藥質量控制中的應用進展

王 欣， 覃 瑤， 王德江， 卿大雙， 姚林才， 李隆云， 羅維早*

（1.成都中醫藥大學藥學院，四川成都610072；2.重慶市中藥研究院，重慶400065；3.太極集團有限公司，重慶401147）

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一測多評法在中藥質量控制中的應用進展

王 欣1，2， 覃 瑤2，3， 王德江1，2， 卿大雙1，2， 姚林才1，2， 李隆云2， 羅維早2*

（1.成都中醫藥大學藥學院，四川成都610072；2.重慶市中藥研究院，重慶400065；3.太極集團有限公司，重慶401147）

摘要:總結、歸納近年來一測多評法在中藥質量控制中的實例，探討其在中藥不同類型成分定量分析中的最新研究進展。該方法采用易得、價廉的對照品來測定多個活性成分，適合中藥多成分、多功效作用的評價模式，其簡單、可行，將有利于提高中藥質量控制的水平。

關鍵詞:一測多評法（QAMS）；質量控制；中藥

dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.035

中藥質量評價是中藥現代化的基礎，與單一指標相比，多指標的質量評價模式更符合中藥多成分、多功效的特點。由于對照品緊缺和檢測費高昂，多指標的質量評價模式多用于科學研究，而較少用于實際質量監督中。一測多評法（quantitative ana1ysis of mu1ti-comPonents by Sing1e Marker，QAMS）是利用中藥有效成分之間的內在函數和比例關系，通過測定一個成分（對照品易于得到）而實現多個成分（對照品難以得到或供應）的同步測定，是適合中藥特點的多指標質量評價模式。本文將介紹一測多評法的原理及特點，概述近年來其在中藥質量控制的應用進展。

1 一測多評法的概述

一測多評法是在內標法、外標法及校正因子法等分析方法的基礎上發展起來的。文乾映等［1］報道，《美國藥典》34版中25個天然藥物及制劑、《歐洲藥典》7.0版中9個天然藥物的質量評價均運用該方法，而《中國藥典》2010年版中［2］黃連藥材生物堿及銀杏葉總黃酮醇苷的含有量測定計算也均采用該方法。2006年，王智民等［3］最早建立了一測多評法在中藥評價中的方法學考察模式，該研究思路在木通藥材中皂苷成分的含有量測定中得到驗證。一測多評法適用于對照品制備難度大、成本高或對照品不穩定的多成分質量控制。

1.1 基本原理［3-4]在一定線性范圍內，組分的量（質量或濃度）與檢測器響應值成正比。在多指標質量評價中，以廉價、易得的對照品為內參物，建立與其他待測組分之間的相對校正因子（fs/k，RCF），通過測定內參物的含有量，根據相對校正因子（RCF）計算其他組分的含有量，公式如下。

1.2 一測多評法的技術要求［4-6]在檢測指標方面，首先選擇藥材或制劑中藥理作用比較明確的有效成分，或與臨床功效相關的指標性成分作為檢測指標，HPLC色譜條件的優化和方法學考察分別參照《中國藥典》2010年版（一部）附錄VID和X VIII的要求。驗證、方法再驗證要求的樣本量分別為30、10批，待測成分色譜峰定位考察內容包括色譜條件（流動相組成、PH值、柱溫、流量等）、色譜儀、色譜柱、實驗室及操作人員等。

2 一測多評法的應用

自從一測多評法［7］應用于中藥材和制劑的多成分定量分析以來，已發表相關研究論文達100多篇，在2012—2014年間，每年發表都在40篇以上，其已逐漸被中藥行業認可，在中藥質量評價研究和日常質量監督中都得到了一定范圍的應用。一測多評法不僅可用于同類型化學成分，還可用于一些紫外吸收相近的不同類型化學成分的定量分析，如皂苷、黃酮、醌類、生物堿、香豆素、萜類及酚酸等。

2.1 一測多評法在藥材及飲片中的應用

一測多評法已運用于黃連、淫羊藿、人參、三七、丹參和大黃等40多種藥材的多成分質量控制中，見表1。

表1　一測多評法在藥材及飲片中的應用情況

續表1　

一測多評法可用于藥材及飲片中同類型化學成分的質量控制。匡艷輝［8］以黃連為研究對象，建立小檗堿與巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的RCF，測定小檗堿的含有量，再以RCF計算巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的含有量。與外標法相比，一測多評法所得5個生物堿的含有量與實測值之間無明顯差異（RSD＜5％），可用于黃連藥材和飲片的質量控制。陳靜等［12］建立了氧化苦參堿與其他4種生物堿間的RCF，只用一個對照品就可測定苦參中多個生物堿類成分的含有量，解決了苦參藥材質量控制中對照品不足的問題。該方法只需測定苦參中氧化苦參堿的含有量，經計算得到其余生物堿含有量，實現多指標的同時測定，其結果與外標法實測值無明顯差異，可用于苦參藥材和飲片的質量控制。Li等［17］以淫羊藿為研究對象，以藥材中5個黃酮類化合物為指標，以RCF計算淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和寶藿苷I的含有量，同時采用外標法測定藥材中5種生物堿的含有量，并比較計算值與實測值的差異，驗證一測多評法的準確性和可行性。結果表明，該方法控制淫羊藿藥材的質量是可行、準確的。Cao等［18］以木蝴蝶的黃芩苷為內參物，建立其分別與黃芩苷元、黃芩苷元-7-O-龍膽二糖苷、白楊素-7-O-龍膽二糖苷、黃芩苷元-7-O-葡萄糖苷、白楊素-7-O-葡萄糖醛酸、白楊素的RCF，測定黃芩苷，再計算其余6個成分的含有量，結果無顯著性差異（P＞0.05），即一測多評法可用于木蝴蝶藥材的質量控制。另外還發現，以上7個成分的含有量與樣品的形態有一定關系，即具有光滑表面的黃綠色木蝴蝶含有較多黃酮。朱晶晶等［22］通過建立人參皂苷Rb1與另外8種皂苷的RCF，實現用一個對照品測定人參和三七藥材中多個人參皂苷成分的含有量，解決了人參等藥材質量控制中對照品供應不足的問題。結果表明，兩種藥材中一測多評法與外標法所得結果均無顯著性差異（P＞0.05），可用于人參、三七藥材及其相關產品的定量分析及質量評價。李樹翠等［28］分別以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚為內參物，計算大黃及其制劑中其余4種成分的含有量，發現以大黃素為內參物時，其余4種成分含有量與外標法所測得的結果無明顯差異（P＞0.05），可作為大黃及其制劑中蒽醌類成分的質量評價。馮偉紅等［29］以中藥秦皮為研究對象，分別建立秦皮甲素與秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的RCF，外標法測定秦皮甲素的含有量，以RCF計算其余3個成分的含量，發現與外標法比較，一測多評法計算得到的含有量值無顯著性差異（P＞0.05），可用于秦皮中香豆素成分的質量評價。

一測多評法可用于藥材及飲片中不同類型化學成分的質量控制。何兵等［50］以綠原酸為參照物，建立與其余9個成分的RCF，并計算其含有量。因10個成分中有不同的結構類型，故在外標法中，參考各類型成分的紫外最大吸收波長，分段變波長測定各成分。結果與外標法比較，6批款冬花中10個成分的計算值與實測值之間無顯著性差異（P＞0.05），可用于款冬花的質量控制。Lou等［52］將一測多評法用于分析日曬當歸和硫磺當歸中阿魏酸、洋川芎內酯A、蒿本內酯含有量的差異，發現化學分類法區分不同炮制方法的當歸飲片是一種有效的途徑。Pan［53］等建立一測多評法，以牡荊素-4"-O-葡萄糖苷為內參物，以RCF計算其余不同類型成分的含有量、方法耐用性和系統適應性評價（RSD＜5％），結果無顯著性差異（P＞0.05），表明一測多評法具有可行性。

2.2 一測多評法在成方制劑中的應用

一測多評法已應用于小檗堿咳喘寧片、金雞膠囊、丹參注射液、硫磺解毒片和速效救心丸等30多種成方制劑的多成分質量控制中，見表2。

表2　一測多評法在成方制劑中的應用情況

續表2　

一測多評法可用于成方制劑中同類型化學成分的質量控制。劉永利等［58］以嗎啡為對照品，建立咳喘寧片中嗎啡與磷酸可待因、鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿的RCF，以其計算磷酸可待因、鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的含有量，同時用外標法進行比較。結果表明，以RCF計算的含有量值與外標法之間沒有明顯差異（P＞0.05），可用于咳喘寧片的質量控制。楊菲等［60］以銀黃制劑為研究對象，建立黃芩苷與漢黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素間的RCF，分別采用外標法和一測多評法測定銀黃制劑中4種黃酮類成分的含有量。結果表明，一測多評法的計算結果與外標法之間無顯著性差異（P＞0.05），可作為銀黃制劑中黃酮類成分的含有量測定。李安平等［66］以原兒茶醛為內參物，采用外標法同時測定丹參注射液中丹參素鈉、原兒茶酸、原兒茶醛、香草酸、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B 7個水溶性酚酸類成分的含有量，建立原兒茶醛與其他6個成分的RCF進行計算。結果，與外標法比較，一測多評法與其之間無顯著性差異（P＞0.05），可為全面控制丹參注射液的內在質量提供參考。林青等［33］以消炎利膽片為研究對象，以穿心蓮內酯為內參物，建立一測多評法計算其余3種成分的含有量。結果，與外標法比較，計算值與實測值無顯著性差異（P＞0.05），可用于消炎利膽片中二萜內酯類成分的質量控制。

一測多評法可用于成方制劑中不同類型化學成分的質量控制。何兵等［81］以雙青咽喉片為研究對象，采用3種校正方法分別建立沒食子酸與其余9個成分的RCF，計算成分含有量。結果，與外標法和回歸方程法比較，一測多評法所得結果無顯著差別（P＞0.05），可用于雙青咽喉片中多個不同類型成分的質量控制。Sun等［82］以毛蕊異黃酮為內參物，建立黃芪制劑中其與毛蕊異黃酮苷、染料木苷、芒柄花苷、金雀異黃酮、芒柄花黃素、美迪紫檀素、黃芪甲苷IV的RCF，一測多評法計算7個成分的含有量，同時采用外標法，測定黃芪制劑中8個成分的含有量，發現一測多評法可作為黃芪制劑的質量控制方法。Xiong等［87］以丹參滴丸和丹參片為研究對象，采用UPLC-DAD技術，以丹參素、人參皂苷Rg1和隱丹參酮為內參物，建立丹參素與原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A及丹酚酸C的RCF，以及人參皂苷Rg1與三七皂苷R1、人參皂苷Re的RCF，建立隱丹參酮與丹參酮ⅡA的RCF，可用于同時測定不同類型的3組成分的含有量。

3 展望

一測多評法作為一種多指標質量控制方法，當各待測成分含有量差距懸殊時，其有一定局限性，可用對照品外標法彌補，隨著一測多評法研究體系的逐步完善，可客觀評價中藥的整體質量。該方法具有操作成本低、簡單、快捷的優點，適用于藥效成分復雜多樣的中藥，符合中藥多成分、多功效的作用特點。另外，一測多評法既能用于同類型成分中藥的質量控制，也能用于一些紫外吸收相近的不同類型成分中藥的質量控制，是中藥多成分質量評價模式的發展方向之一。

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*通信作者:羅維早，男，博士，研究員，博士生導師，主要從事中藥化學及新劑型方向的研究。Te1:（023）89029026，E-mai1: 1oweizao@163.com

作者簡介:王 欣，男，博士生，主要從事中藥化學研究。Te1: 13883867645，E-mai1: wangxin_ cq386@sina.com

基金項目:重慶市科委項目（2015）；國家科技惠民計劃項目（2013GS500102）

收稿日期:2015-04-21

中圖分類號:R284.1

文獻標志碼:A

文章編號:1001-1528（2016）02-0395-08