基質金屬蛋白酶在類風濕性關節炎患者血清中的表達及意義

周瓊竦

[摘 要] 目的：探討基質金屬蛋白酶在類風濕性關節炎患者血清中的表達及意義。方法：選取我院2011年7月—2014年10月收治的類風濕性關節炎病患125例作為研究組，按照配對方式選取我院同期健康體檢者125例為對照組。檢測2組MMP-9、MMP-3、MMP-2、MMP-1水平，并觀察分析RA病患血清高表達MMPs與PA、CRP、ES、WBC及PLT等血清生化學指標的相關性。觀察比較高活動度RA病患與中低活動度RA病患血清MMPs水平。結果：觀察組血清MMP-3、MMP-2與MMP-9水平明顯高于對照組，差異存在統計學意義（P<0.05）。活動期RA血清MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平顯著高于穩定期RA，差異存在統計學意義。MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平與CRP、PLT、ESR及WBC呈正相關（P<0.05）；與PA呈負相關（P<0.05）。結論：MMP-3、MMP-2與MMP-9在類風濕性關節炎血清中高表達，同時與RA進展評估指標呈正相關，能夠預測疾病嚴重程度。

[關鍵詞] 基質金屬蛋白酶；類風濕性關節炎；活動度

中圖分類號：R593.22 文獻標識碼：B 文章編號：2095-5200（2016）02-055-03

DOI：10.11876/mimt201602020

類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一類以關節軟骨及骨質破壞為特點的慢性炎癥性與自身免疫性疾病，以關節滑膜受累為主，臨床多表現為反復不愈的增生反應、炎癥反應軟骨及其下方骨質遭到破壞，病情最終進展至骨關節不可逆性畸形[1]。文獻報道，過度降解細胞外基質致使病患關節軟骨發生不可逆性退行性變是RA的一個重要特征[2]。基質金屬蛋白酶 （Matrix Metallo proteinases，MMPs ）是和細胞外基質及其功能存在緊密相關性的一類蛋白酶家族，同時，從RA病患采集的關節液中可發現MMP-2 與MMP-3高表達[3]。但采集關節液樣本是有創檢查，采集操作步驟也稍顯煩瑣。本次實驗采集RA病患外周血樣本，分析MMPs家族在血清中表達情況及其臨床運用價值，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2011年7月—2014年10月收治的類風濕性關節炎病患125例作為研究組，診斷按照1987年美國風濕病學會制定的RA診斷標準，其中高活動度RA病患[4]（DAS28≥5.1）67例，中低活動度RA病患（DAS28<5.1）58例。排除標準：1）確診為其他免疫風濕疾病者；2）合并糖尿病、高血壓等慢性疾病者；3）病患及其家屬不愿參與本次實驗或病患依從性較差者。按照配對方式選取我院同期健康體檢者125例為對照組，使2組年齡、性別等一般臨床資料差異不存在統計學意義。

1.2 方法

采2組空腹清晨靜脈血2mL，離心，提取上層血清，將其分裝入1.5mL的EP管中，并置入-70℃冰箱保存。

ELISA法檢測MMPs水平，操作嚴格按照試劑盒的使用操作說明書進行。前白蛋白 （PA）使用日本的Hitachi7600自動生化儀進行檢測，C反應蛋白 （CRP）使用Beckman Coulter公司（美國）的全自動免疫分析儀進行檢測，血沉 （ESR）使用ALIFAX公司（意大利）的全自動血沉分析儀進行檢測，白細胞 （WBC）及血小板 （platelet， PLT）使用Sysmex公司（日本）的全自動血液分析儀進行檢測。

比較2組血清MMP-9、MMP-3、MMP-2、MMP-1水平，并觀察分析RA病患血清高表達MMPs蛋白與PA、CRP、ES、WBC及PLT等血清生化學指標的相關性。觀察比較高活動度RA病患與中低活動度RA病患血清MMPs水平。

1.3 統計學方法

使用SPSS18.0軟件對所采集數據進行分析，計量資料使用（x±s）表示，采用2組間t檢驗；使用Spearman相關分析對MMPs與血清生化指標進行分析，以P<0.05為差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 比較2組受試者血清MMPs水平

2組血清MMP-1水平差異不存在統計學意義（P>0.05）；觀察組血清MMP-3、MMP-2與MMP-9水平明顯高于對照組，差異存在統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 中低活動度與高活動度RA病患MMPs水平比較

活動期RA病患血清MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平顯著高于穩定期RA病患，差異存在統計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 MMPs與生化指標相關性分析

如上所述，MMPs家族中MMP-2 、MMP-3、MMP-9在RA病患血清中高表達。3者水平與CRP、PLT、ESR及WBC呈正相關（P<0.05）；與PA呈負相關（P<0.05），見表3。

3 討論

現今對RA病因及發病機制尚未研究清楚，這既限制了RA疾病的早期診斷和篩查，也使得臨床缺少特異性的治療藥物與手段[5]。RA機制研究的推進，為臨床早期診斷與篩查及病情進展判斷提供檢測依據，也將為臨床靶向治療靶點。目前認為，關節軟骨及其周圍骨質退行性病變及不斷破壞與作為軟骨細胞生存基礎的細胞外基質持續降解存在極為緊密聯系[6-7]。

MMPs家族主要參與細胞外基質降解及結構改型與重塑，現已有二十多種家族成員被發現和研究[8]。

文獻[9-10]報道，細胞外基質降解關鍵步驟是活化MMPs，在RA病患關節液中存在著異常增高MMPs及其相關蛋白，其中以MMP-3與MMP-2升高最為顯著，其能夠直接降解骨質與關節軟骨來推進RA病情發展。Avdeeva等[11]對MMPs家族在骨關節液中含量分析檢測，發現其對風濕免疫相關疾病診斷篩查及病情活動與否判斷具有較高價值。但當臨床檢測出MMPs明顯升高時，關節滑膜、軟骨及其相關骨質已經遭受嚴重損害，治療效果已經大打折扣[12]。研究證實[13]，在RA病患外周血清樣本中可同樣檢測出異常增高MMPs家族，同時發現其與血管形成相關步驟存在密切關系，而在關節囊內及滑膜表面形成新生血管翳能夠促進對炎癥細胞及相關因子募集，且可直接引起關節軟骨及其周圍骨質慢性炎癥反應。

本研究進一步對不同活動度患者進行分析發現高活動度患者血清MMP-9、MMP-3、MMP-2水平顯著高于中低活動度患者，這與國內外相關研究[14-15]結果相似，表明MMPs水平與RA嚴重程度存在緊密聯系。MMP-2作用底物包含Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅺ型膠原及蛋白多糖、層黏連蛋白、纖維結合素等重要關節軟骨組成成分，直接破壞和損傷關節軟骨[16]。MMP-3作為一種水解蛋白酶，能夠直接破壞軟骨組織，同時使間質膠原酶與膠原蛋白酶等激活而引發瀑布式軟骨組織破壞反應，進一步促進形成血管翳及降解軟骨組織[17]。相關性分析發現MMP-9、MMP-3和MMP-2與CRP、PLT、ESR及WBC等血清生化指標呈正相關，與PA呈負相關。這表明血清MMPs高表達蛋白水平與RA病情進展緊密關聯，其能夠較好反映病情進展程度。

綜上所述，MMP-9、MMP-3與MMP-2在RA病患血清中表達異常，能夠客觀準確對RA病病情及活動與否進行判斷。

參 考 文 獻

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